MCF-7Adr细胞（人乳腺癌阿霉素耐药细胞株MCF7亚株）

MCF-7Adr是一种从MCF-7细胞衍生的阿霉素（Adriamycin，ADR）耐药人乳腺癌细胞株。通过对MCF-7细胞进行阿霉素药物诱导和筛选，最终获得了这一耐药亚株。MCF-7Adr细胞能够在500ng/mL的阿霉素环境下生存并稳定传代。

MCF-7/Adr细胞株源自人乳腺癌细胞系MCF-7。MCF-7细胞系最初从一名69岁乳腺癌患者的胸腔积液中分离建立，患者为白人女性，患有乳腺腺癌。MCF-7细胞在体外培养中保留了多个乳腺上皮的分化特性，如通过胞质雌激素受体加工雌二醇，并在培养中形成隆突结构（domes）。

MCF-7Adr细胞特性特征

• 生长特性: MCF-7/Adr细胞能够在500ng/mL的阿霉素环境中存活并稳定传代，显示出对阿霉素的耐药性。

• 激素受体: MCF-7细胞表达雌激素受体（ER），能够通过胞质雌激素受体加工雌二醇，显示出激素依赖性特征。

• 癌基因表达: MCF-7细胞株表达WNT7B癌基因，可能与细胞的增殖和生存相关。

• 细胞因子: 肿瘤坏死因子α（TNF-α）能够抑制MCF-7细胞的生长，提示其在细胞生长调控中的重要性。

• 基因表达: MCF-7细胞在抗雌激素处理后能够调节胰岛素样生长因子结合蛋白（IGFBP）的分泌，反映出其在生长因子信号传导中的作用。

• 增殖特性: MCF-7细胞通常以松散的三维团簇形式出现，生长速度较慢，通常需要6-12天才能达到80%的生长密度。

MCF-7Adr细胞参数表

MCF-7Adr人乳腺癌阿霉素耐药细胞株MCF7亚株培养教程

MCF7-ADR细胞复苏

• 将冻存的MCF7-ADR细胞迅速放入37℃水浴中融化，确保冻存管盖子始终在液面上方，以避免污染。轻轻摇动冻存管以加速融化，但切勿使用涡旋混合器。
  

• 融化后，用70%酒精擦拭冻存管外壁，确保操作环境的无菌性。

• 将MCF7-ADR细胞悬液转移至离心管中，以500g离心2-5分钟，弃去上清液。

• 向离心后的MCF7-ADR细胞中加入适量不含药物的完全培养基，轻轻混匀，使细胞重悬。

• 将重悬后的MCF7-ADR细胞转移至T25培养瓶中，标记细胞株名称和日期。

MCF7-ADR细胞培养

• 将培养瓶中的MCF7-ADR细胞放入37℃、5% CO2的培养箱中，静置48-72小时，以确保细胞贴壁。

• 定期观察MCF7-ADR细胞的生长状态，通常MCF7-ADR细胞会以松散的三维团簇形式出现。

• 当MCF7-ADR细胞密度达到80%汇合度时，准备进行传代操作。

MCF7-ADR细胞传代

• 用PBS洗涤MCF7-ADR细胞，去除培养基残留。

• 加入适量0.25%胰蛋白酶-0.53 mM EDTA溶液，轻轻摇动培养瓶，使其均匀分布于MCF7-ADR细胞表面。

• 将培养瓶放入37℃培养箱中，观察MCF7-ADR细胞脱落情况，通常需要2-5分钟。

• 细胞脱落后，加入完全培养基以中和胰蛋白酶，轻轻吹打混匀MCF7-ADR细胞。

• 以500g离心2-5分钟，弃去上清液。

• 将MCF7-ADR细胞重悬于新的培养基中，转移至新的培养瓶进行培养。

MCF7-ADR细胞药物处理

• 药物准备:阿霉素(ADR)溶液，配制成500 ng/mL的工作液。

• 在MCF7-ADR细胞传代1-2次后，向培养基中加入400 ng/mL的阿霉素，继续培养至细胞完全汇合。
  

• 如果MCF7-ADR细胞状态良好，可以逐步将阿霉素浓度增加至500 ng/mL。

• 如果发现MCF7-ADR细胞增殖减缓或停止，应降低药物浓度，或短期使用不含药物的培养基，以恢复MCF7-ADR细胞的增殖状态，之后再逐渐恢复药物浓度。

MCF7-ADR细胞冻存

• 收集并离心MCF7-ADR细胞，弃去上清液。
  

• 加入预冷的冻存液，轻轻混匀。

• 将MCF7-ADR细胞悬液分装至冻存管中，标记细胞株名称和冻存日期。

• 将冻存管放置在-80℃冰箱中过夜，随后转移至液氮罐中长期保存。

注意事项

• 在所有操作过程中，保持无菌操作以防止MCF7-ADR细胞污染。

• 细胞复苏后，建议至少进行3次传代以确保MCF7-ADR细胞状态稳定。

• 定期监测MCF7-ADR细胞的生长状态，并根据需要调整培养条件和药物浓度。