NCI-H2126细胞（人肺癌细胞）

NCI-H2126细胞系来源于一位65岁白人男性非小细胞肺癌患者的胸腔积液（转移部位），而非直接来自肺癌组织。NCI-H2126细胞是一种上皮样细胞系，与同一患者的EBV转化淋巴母细胞系NCI-BL2126相关。然而，NCI-H2126细胞系本身并非通过EBV转化获得永生性

核型特征

NCI-H2126细胞系是一种超三倍体人类细胞系，核型模态数为79，范围在71到83之间。约20%的细胞具有79条染色体，5.5%的细胞表现出更高的倍性。核型异常复杂，大多数细胞含有超过22条标记染色体，许多标记染色体具有复杂的结构重排。特征性重排包括双拷贝的t（10qter--10q11.2::13C--13qter）和der（9）t（3;9）（p12;p22?），以及单拷贝的del（1）（p22）和i（1q）。每个细胞中有两条正常的X染色体，但未发现正常的Y染色体和N1、N5、N14、N15染色体。染色体N20和N22在每个细胞中通常存在四个或更多拷贝。

NCI-H2126细胞

• NCI-H2126细胞是贴壁生长，形态呈上皮细胞样，在适宜的培养条件下可以无限增殖。

• NCI-H2126细胞表现出多种酶的表达特征，包括：AK-1 (腺苷激酶1)、ES-D (酯酶D)、G6PD (葡萄糖-6-磷酸脱氢酶)、GLO-I (氧化还原酶I)、PGM1 (磷酸葡萄糖变位酶1)、PGM3 (磷酸葡萄糖变位酶3)

• NCI-H2126细胞具有遗传不稳定性，容易发生基因突变和染色体异常。
  

• NCI-H2126细胞表现出显著的致瘤性，在裸小鼠模型中能够形成肿瘤，并且具有在胸腔积液中的转移能力。
  

• NCI-H2126细胞对某些抗肿瘤药物表现出敏感性。
  

NCI-H2126细胞参数表

NCI-H2126细胞培养教程

细胞复苏步骤

• 准备37°C预热的完全培养基。

• 从液氮或-80°C冰箱中取出冻存的NCI-H2126细胞，在37°C水浴中快速解冻（约1分钟）。

• 将解冻的NCI-H2126细胞悬液转移到含5 ml预热完全培养基的15 ml离心管中。

• 1000 rpm离心5分钟，弃上清。

• 用2 ml完全培养基重悬NCI-H2126细胞，转移到T25培养瓶中。

• 放入37°C，5% CO2培养箱中培养。

• 24小时后观察NCI-H2126细胞贴壁情况，并更换新鲜预热的完全培养基。

细胞传代步骤

• 当NCI-H2126细胞生长至80%-90%汇合度时进行传代。

• 吸弃旧培养基，用1 ml PBS轻柔冲洗NCI-H2126细胞一次。

• 加入1 ml 0.25%胰酶，37°C孵育1-2分钟（具体时间可能因细胞状态而异）。

• 显微镜下观察NCI-H2126细胞脱落情况，轻拍培养瓶辅助脱落。

• 加入等体积完全培养基终止消化。

• 1000 rpm离心5分钟，弃上清。

• 用新鲜完全培养基重悬NCI-H2126细胞，按1:2或1:3比例传代到新培养瓶中。

注意事项

• 收到NCI-H2126细胞后，首次传代建议按1:2比例传代至T25培养瓶。

• 运输用的培养基不宜再次用于NCI-H2126细胞培养，应使用新配制的完全培养基。

• 若有未贴壁的NCI-H2126细胞，需离心回收并重悬。

• 定期观察NCI-H2126细胞形态，保持上皮细胞样贴壁生长特性。

细胞冻存

• 冻存液配方：90%血清，10% DMSO

• 细胞密度：>1×10^6 cells/ml

• 缓慢降温后转入液氮中长期保存

细胞污染处理

• 立即将污染的NCI-H2126培养瓶从培养箱中取出，以防止污染扩散到其他细胞。

• 拍照记录NCI-H2126细胞污染情况，并在24小时内联系供应商或销售人员，报告污染问题。

• 不要尝试挽救被污染的NCI-H2126细胞，以免污染物扩散或产生抗性菌株。

• 对培养箱进行彻底清洁和消毒，防止交叉污染。

• 使用备用的未污染NCI-H2126细胞重新开始培养。

• 审查实验室操作规程，找出可能的污染源，并采取预防措施避免未来污染。

活细胞与死亡细胞的区分

• 形态观察

• 活NCI-H2126细胞：呈现正常的细胞形态，贴壁牢固，边界清晰。

• 死NCI-H2126细胞：变圆，从培养瓶表面脱落，漂浮在培养基中。

• 贴壁能力

• 活NCI-H2126细胞：能够牢固地贴附在培养瓶表面。

• 死NCI-H2126细胞：失去贴壁能力，漂浮在培养基中。

• 细胞膜完整性

• 活NCI-H2126细胞：细胞膜完整，不透光。

• 死NCI-H2126细胞：细胞膜破裂，在显微镜下可能呈现颗粒状或透明状。

• 染色法

• 台盼蓝染色：活NCI-H2126细胞不着色，死细胞呈蓝色。

• FDA-PI双染：活NCI-H2126细胞呈绿色荧光，死细胞呈红色荧光。

• 细胞活力测定：使用MTT、CCK-8等试剂可以定量评估NCI-H2126细胞活力。

• 生长和增殖能力

• 活NCI-H2126细胞能够正常分裂和增殖。

• 死NCI-H2126细胞不会增殖，数量不会增加。