
MEL细胞系(小鼠红白血病细胞系)
- 来源:血液
- 细胞特征:悬浮细胞, 淋巴母细胞样
- 培养基:RPMI-1640+10% FBS+1% P/S
- 其他:MEL细胞系可被二甲基亚砜(DMSO)诱导分化为红系细胞
MEL细胞系来源于小鼠红白血病,是一种经过永生化处理的细胞系。MEL细胞最初从小鼠的骨髓或外周血中分离得到,并经过特殊处理以便在实验室环境下长期培养和传代。
MEL细胞具有以下特征
细胞形态:呈淋巴母细胞样,通常为圆形。
生长特性:以悬浮方式生长,即细胞在培养液中漂浮,而非附着在培养瓶底部。
分化潜能:二甲基亚砜(DMSO)DMSO可诱导MEL小鼠红白血病细胞向红系分化。
应用:广泛用作研究红细胞分化机制和血红蛋白合成的模型。
染色体数目:细胞染色体数目在35到44之间
MEL细胞系参数表
细胞名称 | MEL细胞系(小鼠红白血病细胞系) |
常用简称 | MEL cells |
种属来源 | 小鼠 (Mus musculus) |
组织来源 | 骨髓或外周血 |
细胞类型 | 永生化细胞系 |
生物安全 | 1级 |
细胞形态 | 淋巴母细胞样,圆形 |
贴壁特性 | 非贴壁,悬浮生长 |
细胞系来源 | 红白血病细胞 |
分化潜能 | 可向红系细胞分化,DMSO可诱导 |
主要表达 | 红系祖细胞相关基因 |
分化后表 | 血红蛋白及其他红细胞特异性蛋白 |
推荐培养基 | RPMI-1640 + 10% FBS + PS |
培养温度 | 37°C,5% CO2,饱和湿度 |
传代密度 | 细胞密度达80%-90% |
传代比例 | 1:2 到 1:4 |
冻存液 | 90% 培养基 + 10% DMSO |
冻存温度 | -196°C (液氮),细胞浓度1-5 × 10^6 cells/mL |
支原体检测 | 阴性 |
细菌真菌 | 阴性 |
细胞活力 | >90% |
主要用途 | 红细胞分化、血红蛋白合成、白血病机制研究、药物筛选 |
分化诱导 | DMSO处理3-5天可诱导红系分化 |
细胞周期 | 约18-24小时 |
克隆形成 | 约30-50% (软琼脂) |
运输方式 | 液氮运输或干冰运输 |
使用限制 | 仅用于科研,不可用于临床 |
培养教程
MEL小鼠红白血病细胞系培养教程
MEL细胞传代方法
观察细胞密度:当MEL细胞密度达到80%-90%时进行传代。
轻轻混匀:轻轻混匀培养皿中的MEL细胞悬液。
收集细胞悬液:将MEL细胞悬液收集到离心管中,900 rpm离心3-5分钟。
弃去上清:弃去上清液。
重悬细胞:加入适量新鲜完全培养基,轻轻重悬MEL细胞。
分配细胞:按1:2到1:4的比例将MEL细胞悬液分配到新的培养容器中。
补足培养基:补足培养基至适当体积。
继续培养:将培养容器放回37℃,5% CO2培养箱中继续培养。
MEL细胞注意事项
悬浮生长:MEL细胞为悬浮生长,但部分MEL细胞可能会轻微贴壁。如遇此情况,轻轻晃动培养基或轻柔吹打即可使MEL细胞脱落。
轻柔操作:操作时动作要轻柔,避免产生过多气泡,以免影响MEL细胞状态。
避免胰酶:不需要使用胰酶消化MEL细胞。
调整比例:传代时,具体分配比例可根据MEL细胞生长速度和密度进行调整。
MEL细胞冻存方法
收集细胞:收集对数生长期的MEL细胞,900 rpm离心3-5分钟。
弃去上清:弃去上清液,用预冷的冻存液重悬MEL细胞。
调整浓度:调整MEL细胞浓度至200-300万/ml。
分装:每管分装1 ml MEL细胞悬液。
程序降温:将冻存管放入程序降温盒,-80℃冰箱中过夜。
长期保存:次日转入液氮中长期保存。
MEL细胞复苏方法
解冻:将冻存管从液氮中取出,迅速放入37℃水浴中快速解冻。
转移细胞:将解冻的MEL细胞悬液转移到离心管中。
缓慢滴加培养基:缓慢滴加预温的完全培养基,轻轻混匀MEL细胞。
离心:900 rpm离心5分钟,去除DMSO。
重悬细胞:弃去上清,用新鲜完全培养基重悬MEL细胞。
培养:将MEL细胞悬液转移到培养容器中,补足培养基,放入37℃,5% CO2培养箱中培养。
避免MEL细胞附着瓶底的方法
收集细胞:将培养皿或培养瓶中的MEL细胞悬液收集到离心管中。
离心:在900 rpm条件下离心3-5分钟。
弃去上清:小心弃去上清液。
重悬细胞:加入1-2 ml新鲜培养基,轻轻吹打混匀MEL细胞悬液。
分配细胞:将MEL细胞悬液按1:2到1:4的比例分配到新的培养皿或培养瓶中,每个新容器中加入适量培养基。
轻轻晃动:如果发现部分MEL细胞附着在瓶底,轻轻晃动培养基或轻柔吹打,使MEL细胞脱落。
常见问答
- MEL细胞能分化成功么
- MEL细胞在DMSO的诱导下能够分化成熟的红细胞