
CBRH7919细胞(大鼠肝癌细胞)
- 来源:肝脏
- 细胞特征:贴壁细胞 , 上皮细胞样
- 培养基:RPMI-1640+20%FBS+1%P/S
- 其他:CBRH7919细胞是通过二乙基亚硝胺(DEN)化学物质诱导形成肝细胞癌
CBRH7919细胞系是从Wistar大鼠的肝脏中提取的,属于上皮细胞类型的细胞系,专门用于肝癌研究和实验。CBRH7919细胞系的建立是通过二乙基亚硝胺(DEN)化学诱导肝细胞癌形成。CBRH7919细胞在形态上展现出典型的上皮细胞特征,使其适合用于各类生物医学研究,尤其是在肝癌免疫基因治疗领域的应用。
CBRH7919细胞特性特征
传代能力:经过化学诱导后,CBRH7919细胞系已成为稳定的细胞系,具有无限增殖能力。
诱导方式:通过二乙基亚硝胺(DEN)化学物质诱导形成肝细胞癌。
基因表达:CBRH7919细胞系可以表达多种与肝癌相关的基因,例如甲胎蛋白(AFP)等。
IL-2和B7-1表达:研究表明,通过逆转录病毒载体转染后,CBRH7919细胞系能够高效表达IL-2和B7-1基因。具体来说,转染后的CBRH7919/IL-2/B7-1细胞中,IL-2的表达量是未修饰细胞的190倍,而B7-1的表达量是未修饰细胞的3倍。
检测方法:使用实时荧光定量PCR、Western blot和ELISA等方法检测转染后基因的mRNA和蛋白质水平,结果显示IL-2和B7-1在转录和翻译水平上均有显著提高
CBRH7919细胞参数表
细胞名称 | CBRH7919细胞(大鼠肝癌细胞) |
细胞别称 | CBRH-7919 |
种属来源 | 大鼠 |
组织来源 | 肝脏 |
疾病特征 | 原发性肝癌 |
细胞形态 | 上皮细胞样 |
生长特性 | 贴壁生长 |
细胞代数 | 10代以内 |
支原体检测 | 阴性 |
病原体检测 | HIV、乙型肝炎、丙型肝炎均为阴性 |
培养基 | RPMI-1640 + 20% FBS + 抗生素 |
生长条件 | 温度:37℃;气相:95%空气 + 5%二氧化碳 |
传代方法 | 1:2至1:6,每周2次 |
消化液 | 0.25%胰蛋白酶 + 0.53 mM EDTA |
冻存条件 | 90% 完全培养基 + 10% DMSO,液氮储存 |
IL-2表达 | CBRH7919/IL-2细胞中IL-2表达量为未修饰细胞的190倍 |
B7-1表达 | CBRH7919/B7-1细胞中B7-1表达量为未修饰细胞的3倍 |
操作安全性 | 在二级生物安全台内操作,注意防护 |
细胞规格 | 1 x 10^6 cells/T25或1 mL冻存管 |
供应限制 | 仅供科学研究,不可用于治疗 |
培养教程
CBRH7919大鼠肝癌细胞培养教程
细胞复苏
将水浴锅预热至37℃。
准备含有4-6 mL完全培养基(如RPMI-1640 + 20% FBS + 抗生素)的离心管。
将冻存管中的1 mL CBRH7919细胞悬液置于37℃水浴中快速解冻,轻轻摇动以确保细胞均匀混合。
将解冻后的CBRH7919细胞悬液转移至离心管,1000 RPM离心3-5分钟,弃去上清液。
用1-2 mL新鲜完全培养基重悬CBRH7919细胞,轻轻吹打以确保均匀。
将重悬的CBRH7919细胞悬液转移至含6-8 mL完全培养基的培养瓶或10 cm培养皿中,放置于37℃培养箱中过夜。
次日,使用显微镜检查CBRH7919细胞的生长状态和密度。
细胞传代
当CBRH7919细胞的密度达到80%-90%时,进行传代。
弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS洗涤CBRH7919细胞1-2次,以去除残留培养基。
加入1 mL消化液(0.25%胰蛋白酶和0.53 mM EDTA),在37℃培养箱中消化1-2分钟。
观察CBRH7919细胞状态,若大部分细胞变圆并脱落,迅速取出并轻轻敲击培养瓶以终止消化,添加少量培养基。
补加6-8 mL培养基,轻轻混匀后以1000 RPM离心4分钟,弃去上清液。
将CBRH7919细胞悬液按1:2比例分配至新的含8 mL培养基的培养皿或瓶中。
细胞冻存
配制90%完全培养基与10% DMSO的冻存液。
在良好生长状态下,收集CBRH7919细胞并离心,弃去上清液。
用冻存液重悬CBRH7919细胞,并将其分装到冻存管中。
将冻存管放入-80℃冰箱中冷冻24小时,之后转移至液氮储存。
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