
HepG2 2.2.15细胞系(人肝癌细胞系)
- 来源:肝癌;HBV阳性
- 细胞特征:贴壁细胞 , 上皮细胞样
- 培养基:生长培养基:EMEM(MEM+NEAA)+10% FBS+1% P/S+0.4mg/mL G418
- 其他:HepG2 2.2.15细胞具有稳定整合的HBV D型基因组
HepG2 2.2.15细胞系源自肝母细胞瘤组织(是从15岁男性患者的肝母细胞瘤组织中分离出亲本HepG2的细胞系),是从亲本HepG2细胞中分离出的亚克隆,具有稳定整合的HBV D型基因组。
HepG2 2.2.15细胞能够长期稳定地在培养基中分泌HBV表面抗原(HBsAg)、e抗原(HBeAg)和完整的HBV颗粒(Dane颗粒),特别应用体外筛选抗HBV药物研究工具。
相比亲代HepG2细胞,HepG2/2.2.15细胞表现出较低的增殖和侵袭活性,以及较低的裸鼠致瘤性,同时表达微管相关标志物双皮质素(DCX),适合用于研究HBV相关癌症及肝细胞对干扰素(IFN)应答的实验模型。
HepG2 2.2.15细胞起因
肝细胞癌是肝脏的主要原发性恶性肿瘤,也是全球癌症相关死亡的主要原因之一,发病机制与乙型肝炎病毒(HBV)感染密切相关。为了研究肝癌的进展和基本生物学特性,开发了稳定转染乙型肝炎病毒基因组的HepG2 2.2.15人肝癌细胞系。
HepG2 2.2.15细胞特性
HepG2 2.2.15细胞系是从肝母细胞瘤组织中分离的亲本HepG2细胞,稳定表达整合的乙型肝炎病毒(HBV)D型基因组。
HepG2 2.2.15细胞是用于研究乙型肝炎病毒复制、肝细胞对干扰素(IFN)应答的重要细胞模型之一。
HepG2 2.2.15细胞系对G418具有抗性,且含有HBV D型基因组的两个首尾二聚体。
HepG2 2.2.15细胞表达微管相关标志物双皮质素(DCX),适合用于研究HBV相关癌症。
HepG2/2.2.15细胞稳定表达乙型肝炎病毒的HepG2人肝母瘤的亚克隆,是HBV相关肝病最广泛使用的模型之一。
HepG2 2.2.15细胞参数表
细胞名称 | Hep G2.2.15人肝癌细胞(STR鉴定正确) |
细胞别称 | Hep-G2/2.2.15; HepG2-2.2.15; HepG2.2.15; 2.2.15;人肝癌细胞(HBV) |
细胞类型 | 人肝癌细胞 |
年龄性别 | 男;15岁 |
细胞形态 | 典型的肝癌细胞形态,贴壁生长 |
细胞代数 | 10代以内 |
细胞来源 | 肝母细胞瘤组织中的亲本HepG2细胞 |
转染物 | 乙型肝炎病毒(HBV)D型基因组 |
抗性 | 对G418抗性 |
分泌物 | HBV表面抗原(HBsAg)、e抗原(HBeAg)、完整的HBV颗粒(Dane颗粒)、复制中间体 |
生物学活性 | 比亲代HepG2细胞具有较低的增殖和侵袭活性,裸鼠中的致瘤性也较低 |
标志物 | 双皮质素(DCX) |
生物安全等级 | 2 |
支原体检测 | 无 |
培养基 | MEM+10% FBS+380ug/ml G418+1%双抗 |
培养条件 | 气相:95%空气+5%二氧化碳;温度:37℃ |
冻存条件 | 无血清冻存液,液氮储存 |
传代比例 | 1:3传代,3-4天传代一次 |
倍增时间 | 50-60小时(DSMZ) |
冻存液配方 | 完全培养基+10% DMSO |
培养难点 | 细胞有堆叠生长的特性,消化后需要两天贴壁至完全摊开 |
应用 | 研究乙型肝炎病毒复制、HBV相关癌症、肝细胞对干扰素(IFN)应答 |
研究工具 | 体外筛选抗HBV药物的良好模型 |
收录 | ATCC |
培养教程
HepG2 2.2.15细胞培养教程
复苏HepG2 2.2.15细胞
将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入5mL培养基混合均匀。
在1000RPM条件下离心5分钟,弃去上清液,补加4-6mL完全培养基后吹匀。
将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜,第二天换液并检查细胞密度。
传代HepG2 2.2.15细胞
弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
加入0.25%胰蛋白酶-0.53mM EDTA消化1-2分钟,观察细胞消化情况。
细胞脱落后,加入含10%血清的完全培养基终止消化,吹匀后离心。
按1:2到1:5的比例分到新的含5-6ml培养液的培养瓶或皿中。
冻存HepG2 2.2.15细胞
收集消化好的细胞到离心管中,根据细胞密度决定冻存密度。
1000rpm离心3-5分钟,去掉上清液,用细胞冻存液重悬细胞。
分配到冻存管中,标注名称、代数、日期后置于-80度冰箱过夜,之后转入液氮容器中储存。
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Amelogenin | X,Y |
CSF1PO | 10,11 |
D3S1358 | 15,16 |
D5S818 | 11,12 |
D7S820 | 10 |
D8S1179 | 15,16 |
D13S317 | 9,13 |
D16S539 | 12,13 |
D18S51 | 13,14 |
D21S11 | 29,31 |
FGA | 22,25 |
Penta D | 9,13 |
Penta E | 15,20 |
TH01 | 9 |
TPOX | 8,9 |
vWA | 17 |
参考文献
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