
RBE细胞系(人肝胆管癌细胞系)
- 来源:肝;肝胆管
- 细胞特征:贴壁细胞 , 上皮细胞样
- 培养基:RPMI-1640+10% FBS+1% P/S
- 其他:RBE细胞能够分泌:癌胚抗原(CEA)和糖类抗原19-9(CA19-9)
RBE细胞系来源于一位64岁日本女性的肝内胆管癌(ICC)样本。RBE细胞能够分泌两种重要的癌症标志物——癌胚抗原(CEA)和糖类抗原19-9(CA19-9)。
RBE人肝胆管癌细胞系参数表
细胞名称 | RBE细胞系(人肝胆管癌细胞系) |
细胞别称 | reb; |
别名 | 人肝胆管癌细胞 |
来源 | 64岁日本女性肝内胆管癌患者 |
形态 | 上皮样 |
生长特性 | 贴壁生长 |
种属 | 人源 |
组织来源 | 肝胆管 |
培养基 | RPMI-1640 + 10%胎牛血清 |
抗生素 | G/A(庆大霉素-两性霉素B混合溶液) |
培养环境 | 37°C;95%空气,5%二氧化碳 |
传代时间 | 约3天可长满培养皿 |
换液频率 | 根据细胞生长情况决定 |
传代比例 | 根据细胞生长情况决定 |
分泌物 | CEA(癌胚抗原)、CA19-9(糖类抗原19-9) |
辐射研究 | 可用于质子辐射的剂量依赖性相对生物效应(RBE) |
安全检测 | 支原体、细菌、酵母和真菌检测均为阴性 |
病原体检查 | HIV、乙型肝炎、丙型肝炎均为阴性 |
生物安全 | 建议在二级生物安全台内操作 |
冻存条件 | 使用细胞保存液,液氮存储 |
STR鉴定 | 已通过 |
应用领域 | 癌症研究、药物筛选、辐射生物学研究 |
培养教程
RBE人肝胆管癌细胞系培养教程
RBE细胞复苏
从液氮中取出冻存的RBE细胞,迅速解冻以保持RBE细胞的活力。
将解冻后的RBE细胞悬液转移至含有预热培养基的培养瓶中。
轻轻摇晃培养瓶,以确保RBE细胞均匀分布。
RBE细胞的常规培养
RBE细胞为贴壁生长,呈上皮细胞样形态。
RBE细胞通常在3天内会长满培养皿。
根据RBE细胞生长情况,每2-3天更换一次培养基。
RBE细胞的传代步骤
当RBE细胞生长至80-90%汇合度时,进行传代。
吸除旧培养基,用PBS轻轻清洗RBE细胞1-2次。
加入适量的胰酶-EDTA溶液,37°C消化3-5分钟以分离RBE细胞。
轻轻拍打培养瓶,观察RBE细胞是否脱落。
用含血清的培养基终止消化。
收集RBE细胞悬液,1000rpm离心5分钟。
弃去上清,用新鲜培养基重悬RBE细胞。
按1:2或1:3的比例,将RBE细胞分装至新的培养瓶中,添加适量的新鲜培养基,并放入CO₂培养箱中继续培养。
防止RBE细胞污染
定期使用硫酸铜溶液擦拭CO₂培养箱内部以防止RBE细胞污染。
在培养箱水盘中加入饱和硫酸铜溶液或消毒磷酸氢二钠高盐液体,以防霉菌污染RBE细胞。
RBE细胞培养注意事项
操作时需在生物安全柜内进行,以保持RBE细胞的无菌环境。
定期观察RBE细胞形态和生长状况,避免RBE细胞过度生长或长期处于高密度状态。
定期进行支原体等污染检测,以确保RBE细胞的纯净。
RBE细胞污染常见症状
细菌污染:培养基浑浊,RBE细胞生长减慢或停止,RBE细胞形态异常。
酵母和真菌污染:培养基表面出现白色或黑色斑点,培养基混浊,RBE细胞生长受阻。
支原体污染:RBE细胞生长减慢,RBE细胞形态变异,如细胞变小或圆形,RBE细胞核染色质边缘化。
预防RBE细胞霉菌污染
定期清洁和消毒RBE细胞培养箱及工作台。
在培养箱水盘中添加饱和硫酸铜或消毒磷酸氢二钠高盐液体,以防霉菌滋生。
在生物安全柜内进行所有RBE细胞操作,使用无菌耗材和试剂,并定期更换培养基。
相关资料
STR鉴定及相关
Markers: | |
Amelogenin | X |
CSF1PO | 12 |
D2S1338 | 17,24 |
D3S1358 | 14,15 |
D5S818 | 11,12 |
D7S820 | 8,11 |
D8S1179 | 13,14 |
D13S317 | 9 |
D16S539 | 10,11 |
D18S51 | 13,15 |
D19S433 | 14,15.2 |
D21S11 | 29 |
FGA | 19,24 |
Penta D | 12 |
Penta E | 18 |
TH01 | 6 |
TPOX | 8 |
vWA | 20 |