
PLC/PRF/5细胞(人肝癌亚力山大细胞)
- 来源:肝癌;亚力山大细胞
- 细胞特征:贴壁细胞 , 上皮细胞样
- 培养基:DMEM+10% FBS+1% P/S
- 其他:plcprf5细胞能够分泌乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)
PLC/PRF/5细胞系是一种人肝癌细胞系,源自一名24岁非洲男性肝癌患者的原发性肝细胞癌组织。plcprf5细胞系常用于癌症、传染病及性传播疾病的研究。
PLC/PRF/5细胞被称为"亚力山大细胞",此名称可能与最初进行细胞分离的研究人员或实验室有关。
plcprf5细胞特征特性
plcprf5细胞能够分泌乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)
plcprf5细胞保留了许多与原发性肝癌相关的基因表达特征
plcprf5细胞能够稳定传代,保持其特性
plcprf5细胞最初受支原体污染,经BM-cycline处理后已净化
plcprf5细胞参数表
细胞名称 | PLC/PRF/5细胞(人肝癌亚力山大细胞) |
细胞别称 | PLC-PRF-5; PLC PRF 5; PLC/PRF5; PLCPRF5; PLC-8024; PLC8024; PLC; Alexander cells;Alexander; Primary Liver Carcinoma/Poliomyelitis Research Foundation/5 |
细胞类型 | 人肝癌亚力山大细胞 |
原始来源 | 24岁非洲男性肝癌患者的原发性肝细胞癌组织 |
支原体状态 | 经BM-cycline处理,已清除支原体污染 |
形态特性 | 上皮细胞样,多角形;贴壁生长 |
培养基 | PLC/PRF/5细胞专用培养基,已包含细胞生长所需的各种成分 |
培养环境 | 温度:37°C;CO2浓度:5%;传代方式:贴壁传代 |
分泌与表达 | 分泌乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg);保留原发性肝癌相关基因表达特征 |
细胞质量 | 含量:>1x10^6细胞数;STR鉴定; |
研究用途 | 癌症、传染病、性传播疾病研究;细胞培养、转染、药物筛选等实验 |
储存要求 | 储存温度:-196°C(液氮);运输温度:干冰 |
生物安全 | 生物安全等级:BSL-2 |
稳定性 | 能够稳定传代 |
培养教程
PLC/PRF/5人肝癌亚力山大细胞培养教程
复苏步骤
将PLC/PRF/5细胞冻存管从液氮罐中取出,迅速放入37°C水浴中,轻轻摇动约1-2分钟,直至PLC/PRF/5细胞完全融化。
用75%酒精消毒冻存管外表面后,在无菌操作台上打开管盖,将PLC/PRF/5细胞悬液转移到预先准备好的含有10 ml完全培养基的离心管中。
以1000 rpm离心5分钟,弃去上清液。
用新鲜的完全培养基轻轻重悬PLC/PRF/5细胞沉淀,确保混匀。
将PLC/PRF/5细胞悬液转移到PLC/PRF/5细胞培养瓶中,加入10-15 ml的完全培养基,置于37°C、5% CO2培养箱中培养。
传代步骤
当PLC/PRF/5细胞汇合度达到70-80%时,准备进行传代。
小心吸去PLC/PRF/5细胞培养瓶中的旧培养基。
用PBS缓冲液轻轻洗涤PLC/PRF/5细胞一次,以去除残留的培养基。
加入适量的0.25%胰蛋白酶-EDTA溶液,放入37°C培养箱中消化1-3分钟,观察PLC/PRF/5细胞是否脱落。
当大部分PLC/PRF/5细胞脱落时,加入完全培养基终止消化,轻轻吹打使PLC/PRF/5细胞形成单细胞悬液。
以1000 rpm离心5分钟,弃去上清液,用新鲜培养基重悬PLC/PRF/5细胞。
按1:3或1:4的比例将PLC/PRF/5细胞接种到新的培养瓶中,加入适量完全培养基,放入培养箱中继续培养。
冻存步骤
按传代步骤收集PLC/PRF/5细胞。
以1000 rpm离心5分钟,弃去上清液,用含10% DMSO的冻存培养基重悬PLC/PRF/5细胞。
将PLC/PRF/5细胞悬液分装到冻存管中,每管1-2 ml。
将PLC/PRF/5细胞冻存管放入程序降温盒中,置于-80°C冰箱中过夜。
次日将PLC/PRF/5细胞冻存管转移到液氮罐中长期保存。
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STR鉴定及相关
Amelogenin | X |
CSF1PO | 10 |
D1S1656 | 14 |
D2S441 | 12,14 |
D2S1338 | 19 (CLS=300315; PubMed=25877200) |
19,22 (ATCC=CRL-8024; CCRID) | |
D3S1358 | 15 |
D5S818 | 12 |
D6S1043 | 13,21 |
D7S820 | 9,11 |
D8S1179 | 13,16 |
D12S391 | 15,20 (CCRID) |
20 (CLS=300315; PubMed=25877200) | |
D13S317 | 11,12 |
D16S539 | 13 |
D18S51 | 17 |
D19S433 | 11,13 |
D21S11 | 30,33.2 |
FGA | 19.2,25 |
Penta D | 6,10 |
Penta E | 10,16 |
TH01 | 7,8 (CLS=300315; ECACC=85061113; JCRB=IFO50069; JCRB=JCRB0406; KCLB=28024; PubMed=25877200; PubMed=31378681) |
8 (ATCC=CRL-8024; CCRID) | |
TPOX | 8 |
vWA | 15,16 |
参考文献
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