
SMMC-7721细胞(人肝癌细胞)
- 来源:肝脏
- 细胞特征:贴壁细胞 ,上皮细胞样
- 培养基:DMEM+10%FBS+1%P/S
- 其他:SMMC-7721细胞系对甲胎蛋白(AFP)呈阳性反应
SMMC-7721细胞系由中国第二军医大学的董荣春教授于1977年建立,源自一名50岁男性原发性肝细胞癌患者的手术切除组织。SMMC-7721细胞系的建立旨在提供一个稳定的肝癌研究模型。细胞通过静置和旋转管法培养,经过约11天开始生长,23天后完成首次传代并具备稳定的增殖能力。SMMC-7721细胞形态为上皮样,具有贴壁生长特性,增殖初期较慢,传代后生长迅速且稳定。SMMC-7721细胞系在肝癌的基础研究和药物筛选中具有广泛应用价值。
SMMC-7721细胞特性特征
增殖特性:SMMC-7721细胞初代培养时细胞增殖较慢,但在传代后生长迅速且稳定。细胞呈上皮样形态,具有贴壁生长的特性。
簇生长:SMMC-7721细胞在培养中常表现为簇生长现象。
生物标志物:SMMC-7721细胞对甲胎蛋白(AFP)免疫荧光染色呈阳性,表明其与肝癌相关的特征。此外,LDH同工酶谱变化与典型肝癌细胞一致。
基因表达:用Northern Blot方法未能检测到SMMC-7721细胞中1.3kb LFIRE-1/HFREP-1 mRNA的表达,这可能与其特定的分子机制有关。
SMMC-7721细胞在免疫缺陷小鼠体内具有较高的成瘤率,其肿瘤组织形态与原手术标本相似。这表明该细胞系能够有效模拟肝癌的生物学行为。
在应激反应中,SMMC-7721细胞表现出与多种应激原相关的基因表达变化。研究发现,在不同应激条件下,有53个基因的表达量显著变化,其中17个基因在G418和氯化钙处理下表现出一致的变化趋势。
SMMC-7721细胞参数表
细胞名称 | SMMC-7721细胞(人肝癌细胞) |
细胞别称 | SMMC 7721; SMMC7721; H7721; H-7721 |
种属来源 | 人 |
性别/年龄 | 男性; 50岁 |
组织来源 | 原发性肝细胞癌组织 |
细胞形态 | 上皮细胞样 |
生长特性 | 贴壁生长 |
细胞代数 | 10代以内 |
细胞规格 | 1×10^6 cells/T25培养瓶或1mL冻存管包装 |
保藏机构 | Ubigene; YC-C056 |
支原体检测 | 无 |
培养基 | DMEM + 10% FBS + 1% P/S |
培养条件 | 气相:95%空气 + 5%二氧化碳;温度:37℃ |
传代密度 | 80%-90%汇合度时进行传代 |
传代比例 | 建议1:2传代 |
培养时间 | 初代培养11天后开始生长,首次传代23天 |
生物标志物 | AFP阳性 |
基因表达特征 | Northern Blot方法未检测到1.3kb LFIRE-1/HFREP-1 mRNA的表达 |
成瘤能力 | 在免疫缺陷小鼠中具有较高的成瘤率 |
肿瘤特征 | 肿瘤组织形态与原手术标本相似 |
培养教程
SMMC-7721人肝癌细胞培养教程
SMMC7721细胞复苏
在37℃水浴中预热5 mL完全培养基。
从液氮中快速取出冻存的SMMC7721细胞,立即放入37℃水浴中轻轻摇晃以加速解冻(约1分钟)。
将解冻的SMMC7721细胞转移至15 mL离心管中,加入预热的完全培养基,轻轻混匀,随后在1000 rpm下离心5分钟,弃去上清液。
用2 mL完全培养基重悬细胞沉淀。
将重悬的SMMC7721细胞转移至T25培养瓶中,置于37℃、5% CO₂培养箱中培养。
24小时后观察SMMC7721细胞的贴壁情况,吸弃旧培养基,加入新鲜预热的完全培养基。
SMMC7721细胞传代
当SMMC7721细胞生长至80%-90%汇合度时,准备进行传代。
吸弃旧培养基,用1 mL无菌PBS洗涤细胞,以去除残余培养基及血清。
加入1 mL 0.25%胰酶,放入37℃培养箱消化1-2分钟,观察细胞皱缩并变圆。
加入1 mL完全培养基终止消化,轻轻拍打使细胞脱落成单个细胞悬液。
将细胞悬液收集于15 mL无菌离心管中,在1000 rpm下离心5分钟。
收集SMMC7721细胞沉淀,用适量的完全培养基重悬,依据需要调整接种比例(如1:2),然后转移至新的培养瓶中。
SMMC7721细胞冻存
按照传代方法收集SMMC7721细胞沉淀,并取少量用于细胞计数。
用预冷的冻存液将细胞重悬,密度为1×10^6 cells/mL。
将重悬的SMMC7721细胞分装至1.2 mL冻存管中,并做好标记。
将冻存管放入程序冻存盒,置于-80℃过夜后,再转入液氮进行长期保存。
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CSF1PO | 10 |
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D3S1358 | 15,18 |
D5S818 | 11,12 |
D6S1043 | 18 |
D7S820 | 12 |
D8S1179 | 12 |
D12S391 | 20,25,26 |
D13S317 | 13.3 |
D16S539 | 9,10 |
D18S51 | 16 |
D19S433 | 13 |
D21S11 | 27,28 |
FGA | 18,21 |
Penta D | 8,15 |
Penta E | 7,17 |
TH01 | 7 |
TPOX | 12 |
vWA | 16,18 |