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货号：STM-CL-5633 规格：1×10⁶cells/T25培养瓶或1mL冻存管
THLE-2人肝永生化细胞（SV40永生化） （暂不提供）
- 来源：肝; 左叶
- 细胞特征：贴壁细胞 , 上皮细胞样
- 培养基：BEGM kit培养基 (Lonza/Clonetics，CC-3170)备注：培养基包含（A+B），ATCC 不使用 BEGM 试剂盒提供的 GA（庆大霉素-两性霉素 B 混合物） 和肾上腺素（Epinephrine），另向其中添加额外的 5 ng/mL EGF、70 ng/mL 磷酸乙醇胺和 10% FBS。可根据实验要求添加P/S 1%
- 其他：THLE-2细胞具有接近二倍体的核型，不表达甲胎蛋白
THLE-2和THLE-3细胞系是通过SV40大T抗原感染正常人肝上皮细胞衍生出的永生化细胞，这些细胞是通过将含有SV40 T抗原Bgl I-Hpa I片段的逆转录病毒载体导入PA317包装细胞系中生成的病毒感染而获得的。
THLE细胞系在药物毒理学以及肝癌病因和发病机制的研究中提供了重要的体外模型。THLE-2和THLE-3细胞表现出正常成人肝上皮细胞的表型特征。广泛应用于肝功能、药物代谢和毒理学研究中，是研究肝脏疾病和药物反应的重要工具。
THLE-2肝细胞特性特征
无致瘤性：THLE-2细胞注射到无胸腺裸鼠体内时不会形成肿瘤。
THLE-2细胞能够将苯并[a]芘、N-亚硝基二甲胺和黄曲霉毒素B1代谢为最终的致癌代谢物，这些代谢物能够与DNA结合，表明其具有功能性的细胞色素P450途径。
酶表达：环氧化物水解酶、NADPH细胞色素P450还原酶、超氧化物歧化酶、过氧化氢酶、谷胱甘肽S-转移酶、谷胱甘肽过氧化物酶
THLE-2细胞系表达正常成人肝上皮细胞相关的基因，包括与肝功能、代谢和解毒相关的基因。
在恶性转化相关研究中，THLE-2-TCE变种显示出基因组不稳定性，增殖、迁移和侵袭相关的原癌基因表达显著升高，而抑癌基因表达降低。
THLE-2细胞在转化过程中涉及多个信号通路的异常活化，如TGFβ1/SMAD、MAPK、PI3K/AKT/mTOR和NFκB等，这些通路与细胞增殖和存活密切相关
THLE-2人肝永生化细胞参数表
| 细胞名称 | THLE-2人肝永生化细胞（SV40永生化） |
| 别称 | THLE2; Transformed Human Liver Epithelial-2 |
| ATCC编号 | CRL-2706 |
| 来源 | 正常人肝脏（左叶） |
| 细胞类型 | 上皮细胞样 |
| 生长特性 | 贴壁生长 |
| 细胞形态 | 多边形或柱状 |
| 培养基 | BEGM kit 培养基 (Lonza/Clonetics，CC-3170) 备注：培养基包含（A+B），ATCC不使用 BEGM 试剂盒提供的 GA（庆大霉素-两性霉素 B 混合物） 和肾上腺素（Epinephrine）， 另向其中添加额外的 5 ng/mL EGF、70 ng/mL 磷酸乙醇胺和 10% FBS。 可根据实验要求添加P/S1% |
| 培养环境 | 气相：空气95%，二氧化碳5% |
| 温度 | 37℃ |
| 湿度 | 70%-80% |
| 传代比率 | 1:2至1:6，每周2-3次 |
| 冻存液成分 | 90%完全培养基 + 10% DMSO |
| 冻存条件 | 液氮储存 |
| 支原体检测 | 阴性 |
| 安全等级 | BSL-2 |
| 细胞密度要求 | 不低于1×10^6 cells/mL |
培养教程
THLE-2人正常肝SV40永生化细胞培养教程
THLE-2细胞复苏
解冻THLE-2细胞：将冻存的THLE-2细胞从液氮中取出，迅速置于37℃水浴中解冻，过程中轻轻摇动，确保均匀解冻。
离心处理：将解冻后的THLE-2细胞悬液转移至离心管中，加入4 mL完全培养基后，在1000 RPM离心4分钟，弃去上清液。
重悬与培养：用1-2 mL新鲜培养基重悬THLE-2细胞，将细胞移入培养皿或培养瓶中，加入8 mL完全培养基，置于培养箱中过夜，次日观察细胞状态。
THLE-2细胞传代
传代时机：当THLE-2细胞铺满培养瓶或培养皿表面80%-90%时，进行传代操作。
洗涤细胞：弃去培养基，用不含钙、镁的PBS轻轻清洗THLE-2细胞1-2次。
消化细胞：加入1 mL含有0.25%胰酶和0.53 mM EDTA的消化液，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，观察THLE-2细胞变圆并脱落，随后加入培养基终止消化。
离心与重悬：在1000 RPM下离心4分钟，弃去上清液。用新鲜培养基重悬THLE-2细胞悬液。
分瓶培养：将消化后的THLE-2细胞按1:2的比例分至新的培养瓶或培养皿中，加入新鲜培养基。
THLE-2细胞冻存
细胞准备：在细胞状态良好且生长旺盛时，收获THLE-2细胞，弃去培养基，用PBS清洗。
消化与离心：加入胰酶消化THLE-2细胞，待细胞脱落后加入培养基终止消化。离心后弃去上清，加入10% DMSO的冻存液，以每管1×10^6个THLE-2细胞的密度分装。
冻存操作：将THLE-2细胞悬液分装至冻存管中，逐步降温至-80℃，最后移入液氮中保存。
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STR鉴定及相关
| Amelogenin | X,Y |
| CSF1PO | 11,13 |
| D2S1338 | 17,23 |
| D3S1358 | 14,15 |
| D5S818 | 11,13 |
| D7S820 | 10,12 |
| D8S1179 | 13 |
| D13S317 | 8,12 |
| D16S539 | 11,13 |
| D18S51 | 13,16 |
| D19S433 | 14 |
| D21S11 | 30,32.2 |
| FGA | 22,24 |
| Penta D | 10,13 |
| Penta E | 12,13 |
| TH01 | 7,9.3 |
| TPOX | 8,11 |
| vWA | 16,17 |
参考文献
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