
SNU-182细胞(人肝癌细胞)
- 来源:肝
- 细胞特征:贴壁细胞 , 上皮细胞样
- 培养基:RPMI-1640+10% FBS+1% P/S
- 其他:Southern blot杂交可检测到乙型肝炎病毒(HBV)DNA
SNU-182细胞系于1989年建立,来源于一位24岁的韩国男性肝癌患者。SNU-182细胞系是在患者接受细胞毒性治疗前,从其原发性肝细胞癌组织中提取。
SNU-182细胞是非整倍体;模态数=70;含有单个细胞核。
SNU-182细胞特征特性
Southern blot杂交可检测到乙型肝炎病毒(HBV)DNA
SNU-182细胞不表达HBV基因组RNA
表达特征:抗原表达:O型血;Rh阳性
形态学特征:原发肿瘤为单发结节;组织学上主要呈现小梁型和小腺泡型结构;
病毒学特征:携带HBV DNA,但不表达HBV基因组RNA;此特征表明细胞可能来自HBV感染相关的肝癌患者,但病毒处于非活跃状态。
SNU-182细胞参数表
细胞名称 | SNU-182细胞(人肝癌细胞) |
来源信息 | 人类;24岁;男性;亚洲(韩国) |
组织类型 | 肝癌 |
细胞特性 | 上皮细胞样;贴壁生长 |
核型 | 非整倍体;模态染色体数70 |
抗原表达 | O型血;Rh阳性 |
病毒状态 | HBV DNA阳性;HBV RNA阴性 |
培养基 | RPMI-1640+10% FBS+1% P/S |
培养条件 | 37℃;95%空气+5%CO2;湿度70-80% |
传代方法 | 1:2至1:4;每周2-3次 |
冻存条件 | 90%FBS+10%DMSO;梯度降温;液氮储存 |
安全等级 | 2级 |
细胞规格 | 1×10^6 cells/T25瓶或1mL冻存管 |
质量控制 | 无支原体;复苏存活率>90%;STR检测通过 |
保藏信息 | ATCC;编号CRL-2235 |
生长特性 | 倍增时间约46小时 |
运输方式 | 复苏发货(T25瓶)或冻存发货(干冰) |
用途限制 | 仅供科研使用 |
培养教程
SNU-182人肝癌细胞培养教程
SNU-182细胞复苏
将含1 mL SNU-182细胞悬液的冻存管在37℃水浴中快速解冻。
加入4 mL预热的完全培养基,混合均匀。
以1000 rpm离心3分钟,弃上清。
用1-2 mL新鲜培养基重悬SNU-182细胞。
将细胞悬液转移到含6-8 mL完全培养基的T25培养瓶中。
在37℃条件下培养过夜,次日观察SNU-182细胞状态并更换培养基。
SNU-182细胞传代
当SNU-182细胞密度达到80-90%时进行传代。
首次传代建议1:2比例,之后根据细胞生长情况调整为1:2至1:4;每周传代2-3次。
弃旧培养基,PBS洗涤1-2次。
加入适量胰酶,37℃消化3-5分钟。
加入等体积培养基终止消化。
以1000 rpm离心3-5分钟,弃上清。
用新鲜培养基重悬SNU-182细胞,按所需比例接种到新培养瓶中。
SNU-182细胞冻存
使用无血清冻存液;调整SNU-182细胞密度至1×10^6 cells/mL;将细胞悬液分装到冻存管中。
使用程序降温盒,在-80℃冰箱中保存过夜;次日转入液氮中长期保存。
培养基优化建议
基础培养基: 可尝试使用DMEM或特定的肝细胞培养基以提高SNU-182细胞的生长率。
血清浓度: 增加血清浓度至15-20%,或尝试使用特殊处理的血清(如胎牛血清替代物)来促进SNU-182细胞的生长。
生长因子: 添加表皮生长因子 (EGF) 或肝细胞生长因子 (HGF) 可能会刺激SNU-182细胞的生长。
添加剂: 增加丙酮酸钠至2%,提高谷氨酰胺浓度,添加非必需氨基酸 (NEAA)。
抗氧化剂: 考虑添加N-乙酰半胱氨酸 (NAC) 或维生素C,以减少氧化应激,提高SNU-182细胞的生存率。
pH值调整: 确保培养基pH在7.2-7.4之间,根据SNU-182细胞的生长情况进行微调。
抗生素浓度: 如果可能,考虑减少或去除青霉素-链霉素,因为长期使用可能会影响SNU-182细胞的生长。
特殊补充物: 可以考虑添加肝细胞特异性的补充物,如胰岛素、转铁蛋白、硒等,以促进SNU-182细胞的健康生长。
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STR鉴定及相关
Amelogenin | X,Y |
CSF1PO | 10,12 |
D3S1358 | 16,18 (PubMed=25877200) |
17 (KCLB=00182) | |
D5S818 | 11,12 |
D7S820 | 11 |
D8S1179 | 10 |
D13S317 | 11,14 (AddexBio=C0015003/4954; ATCC=CRL-2235; Cosmic-CLP=1240216; PubMed=25877200; PubMed=31378681) |
14 (KCLB=00182) | |
D16S539 | 11,13 |
D18S51 | 16 |
D21S11 | 29,34.2 |
FGA | 22,24 |
Penta D | 9 |
Penta E | 20 |
TH01 | 9 |
TPOX | 8,11 |
vWA | 17 (AddexBio=C0015003/4954; ATCC=CRL-2235; Cosmic-CLP=1240216; PubMed=25877200; PubMed=31378681) |
17,18 (KCLB=00182) |
参考文献
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