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货号：STM-CL-5408 规格：1×10⁶cells/T25培养瓶或1mL冻存管
HPTF细胞（人胰腺肿瘤成纤维细胞SV40永生化）
- 来源：胰腺肿瘤，SV40永生
- 细胞特征：贴壁细胞 , 成纤维细胞样
- 培养基：成纤维细胞培养基
- 其他：HPTF细胞中引入的SV40大T抗原基因使其获得了无限增殖的能力
HPTF-SV40细胞系是一种通过慢病毒介导的SV40大T抗原转染获得的永生化人胰腺肿瘤成纤维细胞系。HPTF细胞系来源于手术切除的人类胰腺癌组织，通过SV40大T抗原的引入，使得这些细胞在体外能够长期培养，并且具备强大的增殖能力，至少可以稳定传代20代以上。HPTF-SV40细胞系特别适用于研究胰腺癌的生物学特性，肿瘤微环境分析以及药物筛选等科学研究领域。
HPTF细胞SV40永生化参数表
| 细胞名称 | HPTF细胞（人胰腺肿瘤成纤维细胞SV40永生化） |
| 细胞别称 | HPTF(SV40);人胰腺癌关联成纤维细胞永生化细胞系 |
| 来源 | 人类胰腺癌手术切除组织 |
| 永生化方法 | 慢病毒转染SV40大T抗原 |
| 细胞类型 | 永生化成纤维细胞 |
| 细胞形态 | 长梭形，贴壁生长 |
| 传代能力 | 至少稳定传代20代以上 |
| 生长特性 | 迅速增殖，适合低血清条件 |
| 培养基 | 成纤维细胞培养基 |
| 培养条件 | 37℃，5% CO₂，湿度70%-80% |
| 换液周期 | 每2-3天 |
| 培养基体积 | T25瓶：10-12 mL；10 cm皿：12-15 mL |
| 传代比例 | 1:2-1:4（视细胞生长速度及密度而定） |
| 冻存条件 | 冻存液：55%基础培养基+40% FBS+5% DMSO 温度：液氮 |
| 冻存规格 | 200-300万细胞/mL，1 mL每管 |
| 染色体核型 | 与原代细胞一致，46, XY, t(8;19)(q24.3;q13.1) |
| 应用领域 | 胰腺癌生物学特性研究、肿瘤微环境相互作用、药物筛选等 |
| 注意事项 | 避免长时间常温保存，谨慎操作以防污染 |
培养教程
HPTF人胰腺肿瘤成纤维细胞SV40永生化培养教程
HPTF细胞复苏
从液氮中取出冻存管，并迅速放入37℃水浴中解冻，解冻时轻轻摇动冻存管以加速过程。
解冻后，立即将HPTF细胞悬液转移到含有4-6 mL预温完全培养基的离心管中，充分混合。
以1000 RPM离心3-5分钟，弃去上清液。
用新鲜的完全培养基重悬HPTF细胞，并轻轻混匀。
将重悬后的HPTF细胞悬液接种到T25培养瓶中，根据瓶型添加10-12 mL的培养基。
将培养瓶置于37℃、5% CO₂、湿度70%-80%的培养箱中培养。
HPTF细胞传代
观察HPTF细胞的融合度，当融合度达到70%-80%时，准备进行传代。
预先准备好新的培养瓶和新鲜的培养基。
吸去旧的培养基。
用3-4 mL室温PBS轻轻冲洗HPTF细胞，以去除残留培养基。
加入1 mL胰蛋白酶，轻轻摇晃培养瓶使胰酶均匀覆盖HPTF细胞。
将培养瓶放入37℃培养箱中消化，观察HPTF细胞的变化。当细胞开始脱落时，立即终止消化。
加入2-3 mL完全培养基终止胰酶作用，混匀后在1000 RPM下离心3-5分钟，弃去上清液。
使用新鲜培养基重悬HPTF细胞，并根据需要将其均匀分配至新的培养瓶中。
根据HPTF细胞的生长速度和密度，通常采用1:2至1:4的传代比例。
HPTF细胞冻存
消化并离心后，将HPTF细胞沉淀重悬于冻存液中。
将细胞悬液分装至标记好的冻存管中。
将冻存管放入程序降温盒中，逐步降温至-80℃，随后转移至液氮罐中长期保存。
注意事项
培养基应避免长时间暴露在常温环境，以防止HPTF细胞的污染。
胰蛋白酶处理时间应控制得当，避免过度消化导致HPTF细胞损伤。
在HPTF细胞运输过程中，应避免剧烈振动，确保细胞的完整性。
定期检查HPTF细胞的生长状态，确保无污染，并观察细胞形态和增殖情况。
