
Panc 05.04细胞(人胰腺癌细胞)
- 来源:胰腺导管腺癌
- 细胞特征:贴壁细胞,上皮细胞样
- 培养基:1640+10% FBS+0.01mg/mL Insulin+1% P/S
- 其他:抗原表达:MHC I类+;MHC II类-;B型血;Rh+
Panc 05.04人胰腺癌上皮细胞系于1995年从一名77岁白人女性胰腺腺癌患者的原发肿瘤中分离,广泛应用于癌症研究,特别是胰腺癌的分子机制和药物筛选。Panc 05.04细胞由ATCC(美国典型培养物保藏中心)提供,标识号为CRL-2557。Panc 05.04细胞表现为上皮样形态,贴壁生长。
Panc 05.04细胞特性特征
K-ras基因在12号密码子处发生GGT->GAT突变,导致天冬氨酸替代甘氨酸、表达K-ras癌基因
抗原表达:MHC I类+;MHC II类- B型血;Rh+
基因表达:细胞角蛋白7;细胞角蛋白18;K-ras+;MHC I类+;MHC II类;B型血;Rh+
Panc 05.04细胞在裸小鼠或SCID小鼠体内具有致瘤性
Panc 05.04细胞铺覆效率为100%
一般保持10代以内以确保遗传稳定性
Panc 05.04细胞参数表
细胞名称 | Panc 05.04细胞(人胰腺癌细胞) |
别称 | Panc-05.04; Panc_05_04; Panc05.04; Panc5.04; Panc5.04; PANC0504; Panc0504; Pa18C;PL-18; PL18 |
组织来源 | 人胰腺 |
疾病特征 | 胰腺导管腺癌 |
细胞形态 | 上皮细胞样,贴壁生长 |
细胞规格 | 1x10^6 cells/T25 或 1mL冻存管 |
细胞代数 | 一般保持在10代以内 |
支原体检测 | 无 |
培养基 | RPMI 1640 + 15% FBS + PS + 0.01 mg/mL重组胰岛素 |
培养条件 | 温度:37℃;气相:95%空气 + 5%二氧化碳 |
冻存条件 | 无血清冻存液,液氮储存 |
铺覆效率 | 100% |
致瘤性 | 在裸小鼠或SCID小鼠体内形成肿瘤 |
癌基因特征 | K-ras+(12号密码子突变,GGT->GAT,导致天冬氨酸替代甘氨酸) |
抗原表达 | MHC I类+;MHC II类-;B型血;Rh+ |
基因表达 | 细胞角蛋白7;细胞角蛋白18;K-ras+;MHC I类+;MHC II类-;B型血;Rh+ |
传代密度 | 细胞密度达80%-90%即可进行传代 |
传代比例 | 首次传代建议1:2 |
注意事项 | 收到细胞后立即观察状态,运输过程中可能有细胞脱落现象,需在二级生物安全台内操作 |
细胞用途 | 仅供科研使用,绝不可作为动物或人类疾病的治疗产品使用 |
培养教程
Panc 05.04人胰腺癌细胞培养教程
细胞接收后的初步处理
状态检查:收到Panc 05.04细胞后,首先检查培养瓶的完整性和培养基的清洁度,确保没有破损、泄漏或污染。如发现问题,请拍照记录并立即联系供应商。
消毒步骤:使用75%酒精消毒Panc 05.04细胞培养瓶的外壁,然后将其转移至超净工作台。
初步培养:将Panc 05.04细胞培养瓶放入37℃的培养箱中静置2-4小时,以便稳定细胞状态。
细胞复苏步骤
将冻存的Panc 05.04细胞悬液(1 mL)迅速解冻于37℃水浴中,同时轻轻摇动冻存管以确保均匀解冻。
向解冻的细胞悬液中加入5 mL完全培养基(RPMI 1640 + 15% FBS + 20 U/mL人重组胰岛素),混合均匀后,在1000 RPM下离心5分钟,弃去上清液。
向细胞沉淀中添加4-6 mL完全培养基,轻轻吹打混合。
将混合后的Panc 05.04细胞悬液转移至培养瓶或6 cm培养皿中,在37℃、5% CO₂的培养箱中培养过夜。
细胞传代操作
当Panc 05.04细胞密度达到80%-90%时,进行传代操作。
首先弃去培养上清液,用无钙镁离子的PBS溶液清洗细胞1-2次。
加入适量的0.25%胰蛋白酶,轻轻摇动培养瓶,待细胞脱离后立即加入培养基中和胰蛋白酶。
将细胞悬液在1000 RPM下离心5分钟,弃去上清液,补加适量的完全培养基。
按照细胞密度和实验需求,将Panc 05.04细胞悬液以1:2的比例接种至新的培养瓶中。
注意事项
细胞监控:定期观察Panc 05.04细胞的形态和生长状态,确保细胞无污染且状态良好。
生物安全措施:所有操作均应在生物安全柜中进行,佩戴适当的个人防护装备。
废弃物处理:所有废液及接触过Panc 05.04细胞的器材应严格按照生物安全规范处理。
细胞冻存:在Panc 05.04细胞状态良好的情况下,使用无血清冻存液将细胞冻存于液氮或-80℃冰箱中,以备后续使用。
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STR鉴定及相关
Amelogenin | X |
CSF1PO | 12,13 |
D2S1338 | 17 |
D3S1358 | 14,16 |
D5S818 | 12,13 |
D7S820 | 9,12 |
D8S1179 | 11,13 |
D13S317 | 10,12 |
D16S539 | 9,11 |
D18S51 | 14 |
D19S433 | 13,15 |
D21S11 | 28,33.2 |
FGA | 19,23 |
Penta D | 7,9 |
Penta E | 5,18 |
TH01 | 6,9.3 |
TPOX | 8,9 |
vWA | 15,20 |