
AC16细胞(人心肌细胞)
- 来源:心肌;心室;杂交细胞
- 细胞特征:贴壁细胞 , 成纤维细胞、上皮细胞样
- 培养基:DMEM+10% FBS+1% P/S
- 其他:AC16细胞能够表达心脏特异性标记物,如: β-肌球蛋白重链(βMHC) 连接蛋白43(CX-43)
AC16细胞系是通过将成年人心室心肌组织的原代细胞与SV40转化的尿苷营养缺陷型人成纤维细胞融合得到。为了确保细胞系的纯度,融合后的细胞在无尿苷培养基中培养,以去除未融合的成纤维细胞,并对存活的融合细胞进行亚克隆筛选。AC16细胞在培养过程中,可以通过调控培养条件和抑制SV40大T抗原的表达,来调控其增殖和分化。
AC16细胞特性
基因表达:AC16细胞能够表达心脏特异性标记物,包括β-肌球蛋白重链(βMHC)和连接蛋白43(CX-43)。
SV40大T抗原:细胞含有SV40大T抗原(T-Ag),与永生化相关。沉默SV40 T-Ag的表达可调控AC16细胞的增殖和分化。
线粒体DNA:AC16细胞系不含线粒体DNA。
AC16细胞参数表
细胞名称 | AC16细胞(人心肌细胞) |
细胞别称 | AC-16; |
来源 | 成人心室心肌组织的原代细胞与SV40转化的人成纤维细胞融合 |
细胞形态 | 成纤维细胞、上皮细胞样 |
细胞类型 | 杂交细胞 |
生长特性 | 贴壁细胞 |
收录 | ATCC |
生物安全等级 | 2 |
致瘤性 | 否 |
培养基 | DMEM + 10% FBS + 1% P/S |
培养环境 | 37°C,5% CO₂,饱和湿度 |
换液周期 | 每2-3天更换一次 |
传代比例 | 1:2-1:4(根据细胞生长速度及密度决定) |
冻存液配方 | 92% FBS + 8% DMSO |
冻存规格 | 200-300万/ml,1ml每管 |
SV40大T抗原 | 存在,影响细胞的永生化 |
心脏特异性标记物 | β-肌球蛋白重链(βMHC)、连接蛋白43(CX-43) |
线粒体DNA | 不含 |
研究用途 | 心脏正常发育及病理状态下的基因表达和功能研究 |
适用领域 | 心脏生物学、药物筛选、疾病模型研究 |
培养教程
AC16人心肌细胞培养教程
传代步骤
传代比例:根据AC16细胞的生长状态和密度,建议以1:2至1:4的比例进行传代。
吸除原有的AC16细胞培养基。
用3-4 ml的常温PBS轻轻冲洗细胞层10-20秒,然后吸走PBS。
加入1 ml胰酶,轻轻晃动培养瓶,使胰酶均匀覆盖AC16细胞层。
将培养瓶放入37°C培养箱,监控AC16细胞的消化进度。当细胞间隙变大但尚未完全脱落时,加入2-3 ml完全培养基终止消化。
将细胞悬液轻轻混匀,900 rpm离心3-5分钟,弃去上清。
重新悬浮AC16细胞于新鲜培养基中,然后均匀分配至新的培养瓶中。
补足培养基后,将培养瓶放回培养箱中继续培养。
细胞冻存
冻存细胞密度:200-300万AC16细胞/ml,每管1 ml。
消化AC16细胞并离心后,弃去上清,加入预先配制好的冻存液,轻轻重悬细胞。
将AC16细胞悬液迅速移入标记好的冻存管中。
将冻存管放入程序降温盒中,置于-80°C冰箱过夜,第二天转移至液氮罐中长期保存。
如果没有程序降温盒,可以将冻存管先放入泡沫盒中,在4°C环境下静置5-10分钟后,再放入-80°C冰箱。
注意事项
胰酶消化AC16细胞的时间因细胞状态而异,需密切观察并严格控制消化时间。
在吹打AC16细胞时要轻柔,避免产生气泡,防止影响细胞状态和活性。
相关资料
STR鉴定及相关
参考文献
上一篇:没有了
下一篇:没有了