HCC1395细胞（人乳腺癌细胞）

HCC1395是一种源自43岁白人女性浸润性导管癌的上皮细胞系，患者患有TNM I期、3级的乳腺导管癌。HCC1395细胞系最早由AF Gazdar和AK Virmani于1994年12月14日成功建立，耗时14个月。HCC1395细胞系可用于广泛的癌症研究。

HCC1395细胞系具备多倍体特征，并展示出BRCA1 5382C突变的纯合状态。同一患者的淋巴母细胞系（HCC1395BL）则为杂合。HCC1395细胞携带与乳腺癌相关的TP53基因获得性突变和PTEN基因的纯合缺失，显示出与肿瘤发生和进展密切相关的遗传特征。此外，该患者有家族性癌症史，患者母亲曾患乳腺癌，进一步表明遗传因素在该病例中的重要性。HCC1395细胞的遗传和表型特征使其成为研究乳腺癌发病机制、遗传易感性以及潜在治疗靶点的重要模型。

HCC1395细胞特性特征

• 癌症基因：HER2/neu：阴性；p53：阳性（具有获得性突变）
  

• 基因表达：表达上皮糖蛋白2（EGP2）；表达细胞角蛋白19；雌激素受体（ER）：阴性；孕酮受体（PR）：阴性

• TP53基因：HCC1395细胞表现出获得性突变，并且具有野生型等位基因缺失。
  

• PTEN基因：HCC1395细胞表现出纯合缺失。

• 肿瘤分期与分级：HCC1395细胞系对应的肿瘤被分类为TNM I期，3级，显示出较高的恶性程度。根据病理分析，34个淋巴结转移中无一个。
  

• 细胞形态与特征：HCC1395细胞系表现为分化不良，并有空泡化现象

HCC1395细胞参数表

HCC1395人乳腺癌细胞培养教程

HCC1395细胞离心法复苏

• 将HCC1395细胞冻存管放入37℃水浴中快速解冻，解冻时间不应超过2分钟。
  

• 取出冻存管，用酒精擦拭消毒后带入生物安全柜。

• 将解冻后的HCC1395细胞悬液转移至15ml离心管中，1000 RPM离心5分钟。
  

• 小心去除上清液，加入适量完全培养基轻轻重悬HCC1395细胞。

• 将重悬后的HCC1395细胞转移至T25培养瓶，补充培养基至8ml左右。
  

• 轻轻摇晃培养瓶使HCC1395细胞分布均匀，放入37℃、5% CO₂培养箱中培养。

不离心法复苏

• 按照离心法同样将HCC1395细胞冻存管在37℃水浴中快速解冻。
  

• 解冻后消毒冻存管，带入生物安全柜。

• 将解冻后的HCC1395细胞悬液直接转移至T25培养瓶中，轻轻摇晃均匀。
  

• 接种后，16小时内不更换培养基。16小时后，更换培养基以去除DMSO和其他代谢废物，继续在37℃、5% CO₂培养箱中培养。

HCC1395细胞传代

• HCC1395细胞通常在80%-90%融合时进行传代，传代比例为1:2至1:4。

• 预热的完全培养基
  

• 弃去HCC1395细胞培养瓶中的培养基，加入2-3ml DPBS轻柔洗涤细胞，以去除残留的血清。
  

• 加入1ml胰酶溶液，放置于室温或37℃培养箱中，直至HCC1395细胞开始从瓶壁脱落（约2-3分钟）。
  

• 观察HCC1395细胞是否完全脱落，若脱落不足可轻轻敲击培养瓶，加速细胞脱落。

• 加入3-4ml完全培养基终止胰酶作用，轻轻吹打混匀悬浮HCC1395细胞。
  

• 将HCC1395细胞悬液转移至离心管中，1000 RPM离心5分钟，弃去上清。
  

• 加入适量完全培养基重悬HCC1395细胞。

• 将重悬后的HCC1395细胞按比例分装至新的T25培养瓶，补充完全培养基至8ml，轻轻摇晃均匀。
  

• 放入37℃、5% CO₂培养箱中继续培养，定期检查HCC1395细胞状态。

HCC1395细胞冻存

• 按传代步骤进行消化处理，收集脱落的HCC1395细胞。
  

• 将收集的HCC1395细胞用冻存液重悬，确保细胞悬液均匀混合。
  

• 将HCC1395细胞悬液分装至冻存管，每管约1ml。
  

• 将冻存管先置于-80℃冰箱中预冻24小时，再转移至液氮罐中长期保存。