HCC1187细胞（人乳腺癌细胞）

HCC1187细胞是一种源自乳腺导管腺癌的细胞系，分离自一位41岁白人女性导管癌TNM IIA期3级患者肿瘤组织。HCC1187细胞系的建立始于1994年，并在经过约4.5个月的培养和筛选后成功获得，主要用于乳腺癌相关的基础和临床研究。尤其是在研究肿瘤生物学特性及其对药物的反应机制方面具有重要价值。HCC1187细胞表现出上皮样形态，其生长特性为贴壁与悬浮混合型。

HCC1187细胞特性特征

• 癌基因表达:HER2/neu：阴性、p53：阳性（过表达）；

• 上皮标记物:上皮糖蛋白2（EGP2）：阳性、细胞角蛋白19：阳性、激素受体表达:、孕酮受体（PR）：阴性；

• HCC1187细胞具有多倍性，显示出多个倍性指数，细胞群体内的遗传多样性较为显著。

• 来自同一患者的EB病毒转化的淋巴母细胞系（HCC1187BL）也可用于进一步的对比研究
  

HCC1187细胞参数表

HCC1187人乳腺癌细胞培养教程

HCC1187细胞的复苏

• 将冻存的HCC1187细胞在37°C水浴中快速解冻，直到冻存管中只剩少量冰块为止。此过程应尽量快速完成，以避免细胞长时间暴露于温度变化中。

• 用无菌移液管将解冻后的HCC1187细胞悬液转移至15 mL离心管中，缓慢加入5 mL预温的完全培养基（RPMI-1640培养基，补充10%胎牛血清（FBS）和1%青霉素/链霉素（P/S）），轻轻混匀。

• 在1000 rpm下离心4分钟，弃去上清液。然后加入2 mL完全培养基，用移液枪轻轻吹打HCC1187细胞，使其成为单细胞悬液。

• 将HCC1187细胞悬液接种到一个T25培养瓶中，加入完全培养基至总体积为10 mL。

• 将培养瓶置于37°C、5% CO₂培养箱中孵育。

HCC1187细胞的常规传代

• 由于HCC1187细胞系具有贴壁和悬浮混合型的生长方式，处理时需要同时注意这两类细胞：

• 当HCC1187细胞汇合度达到80-90%时，应进行传代。

• 收集悬浮HCC1187细胞：先收集培养基中的悬浮HCC1187细胞，将其转移到离心管中，1000 rpm离心4分钟，保存细胞颗粒。

• 处理贴壁HCC1187细胞：弃去剩余培养基，用无菌PBS洗涤贴壁HCC1187细胞2次，以去除残留的血清和代谢产物。加入适量的0.25%胰酶-EDTA溶液，置于37°C孵育2-3分钟，直到HCC1187细胞层开始从瓶壁脱落。

• 制备单细胞悬液：加入等量的完全培养基终止消化过程，将胰酶消化后的贴壁HCC1187细胞与之前收集的悬浮细胞混合，用移液枪轻轻吹打使其成为单细胞悬液。

• 根据实验需求，按1:2到1:6的比例将HCC1187细胞悬液重悬在预温的完全培养基中。

• 将重悬后的HCC1187细胞接种到新的培养瓶中，加入足量完全培养基至适当体积，继续在37°C、5% CO₂培养箱中孵育。

• 每2-3天更换一次培养基，确保HCC1187细胞营养供给充足。在换液时注意不要丢失悬浮细胞，需先收集悬浮HCC1187细胞，离心后再与贴壁细胞一同处理。

HCC1187细胞的冻存

• 取处于对数生长期的HCC1187细胞，用胰酶消化并离心，弃去上清液，制备成单细胞悬液。

• 将HCC1187细胞重悬于冻存液中，冻存液的配方为60% RPMI-1640培养基，30%胎牛血清（FBS），10%二甲基亚砜（DMSO），并将HCC1187细胞密度调整为1-2×10⁶ cells/mL。

• 将HCC1187细胞悬液分装到冻存管中，确保每管中含有适量HCC1187细胞悬液。

• 将冻存管放入-80°C冰箱中过夜，以慢速冷冻HCC1187细胞。次日将冻存管转移至液氮罐中，进行长期保存。