
BT483细胞(人乳腺导管癌细胞)
- 来源:乳腺导管癌
- 细胞特征:贴壁细胞 , 上皮细胞样
- 培养基:RPMI 1640+20%FBS+10ug/ml胰岛素+1%P/S
- 其他:BT483细胞表达雌激素受体和孕激素受体;对雌激素和孕激素反应; 该细胞倍增周期大于140h,生长极缓慢,建议2天换液一次,参考传代周期2-4周,生长过程伴少量细胞凋亡并出现黑点较多的情况,为正常现象。
BT483细胞系是由E.Y. Lasfargues和W.G. Coutinho于1978年建立的,来源于一名23岁正常月经期且有乳腺癌家族史的女性患者。该患者患有浸润性导管乳腺癌,细胞系是从其肿瘤组织中分离并进行体外培养后生成的。BT483细胞系为乳腺癌的研究提供了重要的模型。
BT483细胞的核型分析显示其模态数为72,范围在46到130之间。被广泛应用于乳腺癌的基础研究以及药物筛选。
BT483细胞特性特征
多形性:BT-483细胞具有高度的多形性,表现为细胞核和核仁突出。
上皮特征:通过透射电子显微镜观察,BT-483细胞呈现出典型的上皮细胞特征,包括桥粒、微绒毛、紧密连接和间隙连接。
致瘤性:BT483细胞在裸鼠身上能够形成肿瘤,显示出其致瘤性。
BT-483细胞表达多种同工酶:AK-1,1;ES-D,1-2;G6PD,B;GLO-I,2;Me-2,0;PGM1,2;PGM3,2
BT-483细胞系高度表达孕激素受体,但未检测到α-乳清蛋白的产生。
在药物研究中发现,姜黄素对BT483细胞具有时间和剂量依赖性的抗生长作用,同时CDK4和MMP1 mRNA在细胞内的表达降低。
BT483细胞参数表
细胞名称 | BT483细胞(人乳腺导管癌细胞) |
来源 | 从一名23岁有乳腺癌家族史的正常月经期经产女性患者的浸润性导管肿瘤中分离 |
组织 | 乳腺 |
疾病 | 导管癌 |
细胞类型 | 肿瘤细胞 |
形态学 | 上皮 |
生长方式 | 贴壁生长 |
倍增时间 | >140小时 |
培养基和添加剂 | RPMI-1640 + 20% 胎牛血清 + 1% P/S + 0.01 mg/mL 胰岛素 |
生物安全等级 | BSL-1 |
培养条件 | 95%空气,5%二氧化碳;37℃ |
换液频率 | 每2天换液 |
传代周期 | 每3-4周 |
致瘤性 | 在裸鼠中形成肿瘤 |
同工酶表达 | AK-1 (1), ES-D (1-2), G6PD (B), GLO-I (2), Me-2 (0), PGM1 (2), PGM3 (2) |
抗原表达/受体表达 | 高度表达孕激素受体 |
基因表达特征 | CDK4及MMP1 mRNA表达降低 |
污染检测结果 | 支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性 |
使用限制 | 仅供科研使用 |
培养教程
BT483人乳腺导管癌细胞培养教程
细胞复苏步骤
将 BT483细胞 的冻存管从液氮罐中取出,放置于37℃水浴中快速摇晃解冻,大约1-2分钟。
解冻后,用70%酒精消毒管外部,避免污染。
将解冻的 BT483细胞 悬液转移至离心管,加入5 mL完全培养基。
以1000 RPM离心4分钟,弃去上清液,保留沉淀的 BT483细胞。
用1-2 mL预热至37℃的完全培养基重悬 BT483细胞。
将重悬的 BT483细胞 移至培养瓶或培养皿中,置于培养箱中过夜培养。
细胞传代步骤
当 BT483细胞 密度达到80%-90%时,需进行传代操作。使用倒置显微镜检查 BT483细胞 的生长状态。
冲洗细胞:弃去旧培养基,用不含钙镁的PBS缓冲液轻轻冲洗 BT483细胞 1-2次。
消化细胞:加入0.25%胰蛋白酶-EDTA(0.53 mM EDTA)混合消化液,置于37℃培养箱消化1-2分钟。
观察 BT483细胞 逐渐变圆并从瓶壁上脱落。
终止消化:加入适量完全培养基终止消化,并轻轻敲击培养瓶,以悬浮 BT483细胞。
用6-8 mL完全培养基混匀细胞悬液,在1000 RPM下离心4分钟,弃去上清液。
分瓶:将 BT483细胞 悬液按1:2的比例分装至新的培养瓶中,补加8 mL完全培养基,继续培养。
四、细胞冻存步骤
冻存液配制:准备90%完全培养基和10%DMSO的混合溶液作为BT483细胞的冻存液。
在传代过程中,使用计数板计数 BT483细胞,确保每管冻存的 BT483细胞密度为
1×106 cells/mL。将 BT483细胞 与冻存液充分混合。
装管与标记:每支冻存管中加入1 mL BT483细胞 悬液,标明细胞系名称、日期及浓度。
降温与保存:将冻存管置于程序降温盒中,缓慢降温至-80℃保存24小时,然后转移至液氮罐中长期保存。
相关资料
STR鉴定及相关
Amelogenin | X |
CSF1PO | 9,12 |
D2S1338 | 17,23 |
D3S1358 | 14,17 |
D5S818 | 11 |
D7S820 | 9,10 |
D8S1179 | 15 |
D13S317 | 8,12 |
D16S539 | 11,12 |
D18S51 | 13,15 |
D19S433 | 14,15 |
D21S11 | 30,30.2 |
FGA | 23,26 |
Penta D | 9,11 |
Penta E | 14,20 |
TH01 | 5,9.3 |
TPOX | 8,11 |
vWA | 17 |