
HCC1954细胞系(人乳腺导管癌细胞)
- 来源:乳腺导管癌
- 细胞特征:贴壁细胞 ,上皮细胞样
- 培养基:1640+10% FBS+1% P/S
- 其他:HCC1954细胞在细胞角蛋白19上呈阳性,但对雌激素受体(ER)和孕酮受体(PR)呈阴性,在ELISA检测中显示HER2/neu的过表达
HCC1954细胞是一种上皮细胞系,源自一名61岁亚洲女性的原发性IIA期3级浸润性导管癌,该患者在确诊时未发生淋巴结转移。HCC1954细胞系于1995年建立,经过约4个月的培养而成。HCC1954细胞表现出上皮细胞的典型形态,广泛用于乳腺癌研究和药物筛选。
HCC1954细胞系特性特征
癌症基因:her2/neu+(过表达)
基因表达:上皮糖蛋白2(EGP2);细胞角蛋白19
表达标记:雌激素受体,未表达;孕酮受体,未表达
HCC1954细胞系参数表
细胞名称 | HCC1954细胞系(人乳腺导管癌细胞) |
细胞别称 | HCC-1954; Hamon Cancer Center 1954 |
来源 | 61岁亚洲女性,原发性IIA期3级浸润性导管癌,无淋巴结转移。细胞系于1995年10月30日建立,经过约4个月的培养。 |
细胞形态 | 上皮细胞样,贴壁生长 |
生物安全等级 | 1 |
培养基 | RPMI-1640 + 10% FBS + 1% P/S |
培养条件 | 37℃,5% CO₂,饱和湿度 |
培养基体积 | T25瓶:10-12 mL;10 cm皿:12-15 mL |
换液周期 | 每2-3天更换培养基 |
传代比例 | 1:2 - 1:4(视细胞生长速度及密度而定) |
冻存液配方 | 冻存液:55%基础培养基+40% FBS+5% DMSO 温度:液氮 |
冻存规格 | 200-300万细胞/mL,1 mL每管 |
细胞用途 | 仅供科研使用 |
细胞特性 | 对上皮糖蛋白2和细胞角蛋白19呈阳性,雌激素受体和孕酮受体未表达,HER2/neu过表达 |
培养教程
HCC1954人乳腺导管癌细胞培养教程
HCC1954细胞的接收与处理
用75%酒精对HCC1954细胞培养瓶的外表面进行消毒。
将HCC1954细胞的T25培养瓶置于37℃培养箱中静置2-3小时,以帮助HCC1954细胞恢复正常生长状态。
使用显微镜(4X或5X)观察HCC1954细胞的状态,并记录HCC1954细胞的形态和培养瓶外观,拍摄10×和20×显微镜下的图片各2-3张。
在运输过程中,HCC1954细胞可能因振动而部分脱落。检查HCC1954细胞密度,如果密度低于60%,应将培养基弃去,并加入新鲜的完全培养基(6-8 mL),继续培养以促进HCC1954细胞生长。
HCC1954细胞换液与传代
每2-3天更换一次HCC1954细胞培养基,以确保HCC1954细胞获得足够的营养。
吸去旧培养基。
加入3-4 mL的PBS轻轻冲洗HCC1954细胞。
加入适量0.25%胰蛋白酶消化HCC1954细胞,通常需2-5分钟,观察HCC1954细胞变圆。
加入新鲜的完全培养基终止消化,并轻轻吹打混匀HCC1954细胞悬液。
以1000 RPM离心3-5分钟,弃去上清液。
用完全培养基重悬HCC1954细胞,并将其转移至新培养瓶中,继续在37℃培养箱中过夜培养。
HCC1954细胞传代比例一般为1:2至1:4,具体比例取决于HCC1954细胞生长的速度和密度。
HCC1954细胞冻存
使用92%胎牛血清(FBS)和8%DMSO配制HCC1954细胞冻存液。
通过消化和离心步骤收集HCC1954细胞沉淀。
将HCC1954细胞沉淀用冻存液重悬。
将HCC1954细胞悬液分装至冻存管中,先在-80℃过夜冻存,随后转移至液氮中长期保存。
HCC1954细胞复苏
从液氮中取出HCC1954细胞冻存管,并迅速放入37℃水浴中,轻轻摇晃直至HCC1954细胞完全解冻。
加入9 mL完全培养基,轻轻混匀HCC1954细胞。
以1000 RPM离心3-5分钟,弃去上清液。
用新鲜的完全培养基重悬HCC1954细胞,并将其转移至培养瓶中,在37℃下继续培养。
注意事项
运输时使用的HCC1954细胞培养基不应继续用于HCC1954细胞培养,应更换为新鲜配制的完全培养基。
HCC1954细胞培养过程中需严格遵守无菌操作规范,避免HCC1954细胞交叉污染。
相关资料
STR鉴定及相关
Amelogenin | X |
CSF1PO | 12 |
D2S1338 | 17 |
D3S1358 | 16 |
D5S818 | 13 |
D6S1043 | 12 |
D7S820 | 10,12 |
D8S1179 | 14,15 |
D12S391 | 19,21 |
D13S317 | 11 |
D16S539 | 10 |
D18S51 | 16 |
D19S433 | 14 |
D21S11 | 29 |
FGA | 25 |
Penta D | 15 |
Penta E | 12 |
TH01 | 8 |
TPOX | 8,9 |
vWA | 16,18 |