HCC38细胞（人乳腺导管癌细胞系）

HCC38细胞系是从50岁白人女性（患者有平滑肌肉瘤的病史）乳腺导管癌组织中分离，其母亲死于乳腺癌。HCC38细胞系于1992年4月27日启动，历时32个月建立。HCC38细胞肿瘤分类为TMN IIB期，3级，具有3/28淋巴结转移。

HCC38细胞的模态染色体数为75，范围在65至79之间，具有22%的多倍体率。在3p12处存在纯合缺失。在多数中期中检测到至少45条不同的衍生染色体，包括两个大的中心标记，其长度约为正常a组染色体的1.5倍。这些染色体异常包括：del(1)(q24)、del(1)(p22)、del(1)(p13)、add(1)(p12)、del(2)(p16)、add(3)(q10)、del(3)(q13)、del(4)(q13)、del(5)(q23q33)、der(7)(pter’q11)、del(7)(p?)、add(12)(q24)、add(14)(p11)、add(17)(p12)、der(18)、der(X)。HCC38细胞是一个超三倍体的人类细胞系，均匀染色区和双着丝粒染色体被观察到，每对染色体至少有一次重排。QM染色未见正常的X染色体，Y染色体缺失，染色体2、6、11、13、16和20的正常拷贝。

HCC38细胞系特性

• 上皮细胞特异性标志物: EGP2（上皮糖蛋白2）阳性，CK19阳性

• 受体表达: 雌激素受体（ER）阴性，孕激素受体（PR）阴性

• 形态: 上皮细胞样，贴壁生长

• HCC38细胞对Her2-neu的表达呈阴性，但对p53的表达呈阳性

• HCC38细胞对上皮细胞特异性标记物上皮糖蛋白2[EGP2]和细胞角蛋白19呈阳性，对雌激素受体（ER）和孕激素受体（PR）的表达呈阴性。

HCC38细胞系参数表

HCC38细胞人乳腺导管癌细胞系培养

HCC38细胞复苏

• 将含有1mL HCC38细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入到含4-6mL完全培养基的离心管中混合均匀。

• 在1000RPM条件下离心3-5min，弃去上清液，完全培养基重悬细胞。

• 然后将细胞悬液加入含6-8ml完全培养基的培养瓶（或皿）中37℃培养过夜。

• 第二天显微镜下观察HCC38细胞生长情况和细胞密度。

HCC38细胞传代

• 如果HCC38细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。

• 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。

• 加入0.25％（w/v）胰蛋白酶-0.53mMEDTA于培养瓶中（T25瓶1-2mL，T75瓶2-3mL），置于37℃培养箱中消化1-2分钟（难消化的HCC38细胞可以适当延长消化时间），然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加入3-4ml含10%FBS的培养基来终止消化。

• 轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心3-5min，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。

• 将细胞悬液按1：2的比例分到新T25瓶中，添加6-8ml按照说明书要求配置的新的完全培养基以保持HCC38细胞的生长活力，后续传代根据实际情况按1:2~1:5的比例进行。

HCC38细胞冻存

• 将待冻存的HCC38细胞用胰蛋白酶消化成单细胞悬液，并以每毫升含100万个细胞的密度重悬在冻存液（90%FBS+10%DMSO）中。

• 将细胞悬液分装至1.8ml冻存管中，每管0.5-1ml。

• 将冻存管置于装有酒精的程序降温盒中，于-80℃冰箱中过夜降温。

• 次日，将冻存管置于液氮中保存。