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货号：STM-CL-5137 规格：1×10⁶cells/T25培养瓶或1mL冻存管
Du4475细胞（人乳腺上皮细胞）
- 来源：乳腺；乳房
- 细胞特征：悬浮细胞，多细胞聚集， 圆形，上皮细胞样
- 培养基：生长培养基：RPMI-1640＋10% FBS＋1% P/S
- 其他：Du4475细胞表达乳脂肪球成分，呈三阴性
DU4475人乳腺上皮细胞源自一名62岁女性的未分化癌的局部转移性皮肤结节，该患者在乳腺低分化导管癌根治术后7年发展。
DU4475细胞模态数为93，范围在85至95之间。DU4475细胞是非整倍体人类女性细胞，染色体计数在四倍体范围内。正常染色体N16和N21的代表性最低，每个核型没有到两个拷贝，而染色体N7的代表性往往过高，每个核型有四到五个拷贝，但大多数剩余的正常染色体有两到四个拷贝。共发现22条标记染色体，包括iso（1q）、del（1）（q32）、der（1）t（1；？）（p36；？）、del（3）（q24）、der（3）t（3；？）。其中8个与A.J.Langlois等人在报告中描述的内容相同。
Du4475细胞特性
Du4475细胞表达乳脂肪球成分，呈三阴性。
Du4475细胞为非整倍体，染色体计数在四倍体范围内，常见染色体N16和N21的拷贝数低于两个，而染色体N7的拷贝数高达四到五个。
发现22条标记染色体，包括iso（1q）、del（1）（q32）、der（1）t（1；？）（p36；？）、del（3）（q24）、der 3）t（3；？）等。
Du4475细胞是致瘤的，在裸鼠体内具有转移能力。
透射电镜观察显示细胞具有大量桥粒和叉指微绒毛。
Du4475细胞生长形态为漂浮的簇，不能通过染料排除测试来准确测定生存能力。
Du4475细胞形成的肿瘤组织学上与原发癌相似。
同工酶：AK-1，1；S-D，1；G6PD，B；GLO-I，2；Me-2，2；PGM1, 1-2；PGM3，1
Du4475细胞参数表
| 细胞名称 | DU4475细胞 (人乳腺上皮细胞) |
| 别称 | Du4475; DU-4475; Du-4475; DU 4475; Du 4475; Duke University 4475 |
| 种属 | 人 |
| 组织来源 | 乳腺；乳房 |
| 细胞类型 | 肿瘤细胞 |
| 肿瘤类型 | 乳腺癌细胞 |
| 供体信息 | 女性，62岁 |
| 来源描述 | 从一名62岁女性的未分化癌的局部转移性皮肤结节建立，该患者在乳腺低分化导管癌根治术 后7年发展。文献中描述了细胞在无胸腺裸鼠中容易生长，并产生肿瘤。 |
| 生长特性 | 悬浮细胞，多细胞聚集 |
| 细胞形态 | 圆形，上皮细胞样 |
| 培养环境 | 空气，95%；CO₂，5%；37℃ |
| 完全培养基 | RPMI-1640 (PM150110) + 10% FBS (164210-50) + 1% P/S (PB180120) |
| 冻存条件 | 55% 基础培养基 + 40% FBS + 5% DMSO，液氮保存 |
| 传代比例 | 1:2-1:3 |
| 换液频次 | 2-3次/周 |
| 倍增时间 | 80-100小时 |
| 生物安全等级 | 1 |
| 致瘤性 | 是，在裸鼠中致瘤 |
| 同工酶 | AK-1, 1; S-D, 1; G6PD, B; GLO-I, 2; Me-2, 2; PGM1, 1-2; PGM3, 1 |
| 细胞模态数 | 93；范围85至95 |
| 染色体特性 | 非整倍体，染色体计数在四倍体范围内，常见染色体N16和N21的拷贝数低于两个， 而染色体N7的拷贝数高达四到五个。 |
| 标记染色体 | 22条，包括iso（1q）、del（1）（q32）、der（1）t（1；？）（p36；？） 、del（3）（q24）、der（3）t（3；？）等。 |
| 电镜观察特征 | 透射电镜观察到大量桥粒和叉指微绒毛。 |
| 生长形态 | 漂浮的簇，不能通过染料排除测试来准确测定生存能力。 |
| 肿瘤组织学特征 | 形成的肿瘤其组织学与原发癌相似。 |
| 保藏机构 | ATCC; HTB-123 |
| 备注 | 该细胞为悬浮细胞，请注意离心收集细胞悬液，请勿直接倒掉细胞培养液。 |
培养教程
Du4475人乳腺上皮细胞培养
细胞复苏步骤
解冻: 收到细胞后应尽快进行复苏。如果需要继续储存Du4475细胞，应存放在液氮蒸汽相中，而不是-70°C。储存在-70°C会导致细胞活性下降。将冻存管在37°C的水浴中轻轻摇动解冻。为减少污染的可能性，请保持O形圈和盖子不接触水。解冻应迅速（约2分钟）。
消毒: 一旦细胞解冻，将冻存管从水浴中取出，并通过浸入或喷洒70%乙醇进行消毒。从此时起的所有操作应在严格的无菌条件下进行。
离心: 将冻存管内容物转移到含有9.0 mL完全培养基的离心管中，以约125 x g离心5至7分钟。
重悬细胞: 用推荐的完全培养基重悬细胞沉淀（见具体批次信息以获取推荐的培养稀释比例），并分装到25 cm²或75 cm²的培养瓶中。在细胞恢复期间，避免培养基过度碱性。建议在加入冻存管内容物之前，将含有完全培养基的培养容器置于培养箱中至少15分钟，以使培养基达到正常pH值（7.0至7.6）。
培养: 在37°C适宜的培养箱中培养。推荐使用5% CO₂的空气环境进行培养。
传代步骤
维持培养: 可以通过补充新鲜培养基或更换培养基来维持Du4475细胞培养。新培养物应以2 x 10⁵细胞/mL建立，并维持在10⁵至10⁶细胞/mL之间。
培养基更换: 每周更换2至3次培养基。
相关资料
STR鉴定及相关
| Amelogenin | X |
| CSF1PO | 9,12 |
| D2S1338 | 20,25 |
| D3S1358 | 14,16 |
| D5S818 | 6,11 (DSMZ=ACC-427) |
| 11 (ATCC=HTB-123; CCRID=1101HUM-PUMC000342; CLS=300371; Cosmic-CLP=906844; PubMed=25877200) | |
| D6S1043 | 11 |
| D7S820 | 9,10 |
| D8S1179 | 10,13 |
| D12S391 | 18.3,25 |
| D13S317 | 11,14 |
| D16S539 | 11,12 |
| D18S51 | 14,16 |
| D19S433 | 14 |
| D21S11 | 29,31.2 |
| FGA | 22,25 |
| Penta D | 13,14 |
| Penta E | 7,13 |
| TH01 | 6,8 |
| TPOX | 8 |
| vWA | 17 |
参考文献
上一篇：BT549细胞（人乳腺癌细胞）
