货号：STM-CL-5137 规格：1×10⁶cells/T25培养瓶或1mL冻存管

Du4475细胞（人乳腺上皮细胞）

来源：乳腺；乳房
细胞特征：悬浮细胞，多细胞聚集，圆形，上皮细胞样
培养基：生长培养基：RPMI-1640＋10% FBS＋1% P/S
其他：Du4475细胞表达乳脂肪球成分，呈三阴性

Tags：乳腺上皮细胞

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DU4475人乳腺上皮细胞源自一名62岁女性的未分化癌的局部转移性皮肤结节，该患者在乳腺低分化导管癌根治术后7年发展。

DU4475细胞模态数为93，范围在85至95之间。DU4475细胞是非整倍体人类女性细胞，染色体计数在四倍体范围内。正常染色体N16和N21的代表性最低，每个核型没有到两个拷贝，而染色体N7的代表性往往过高，每个核型有四到五个拷贝，但大多数剩余的正常染色体有两到四个拷贝。共发现22条标记染色体，包括iso（1q）、del（1）（q32）、der（1）t（1；？）（p36；？）、del（3）（q24）、der（3）t（3；？）。其中8个与A.J.Langlois等人在报告中描述的内容相同。

Du4475细胞特性

Du4475细胞表达乳脂肪球成分，呈三阴性。
Du4475细胞为非整倍体，染色体计数在四倍体范围内，常见染色体N16和N21的拷贝数低于两个，而染色体N7的拷贝数高达四到五个。
发现22条标记染色体，包括iso（1q）、del（1）（q32）、der（1）t（1；？）（p36；？）、del（3）（q24）、der 3）t（3；？）等。
Du4475细胞是致瘤的，在裸鼠体内具有转移能力。
透射电镜观察显示细胞具有大量桥粒和叉指微绒毛。
Du4475细胞生长形态为漂浮的簇，不能通过染料排除测试来准确测定生存能力。
Du4475细胞形成的肿瘤组织学上与原发癌相似。
同工酶：AK-1，1；S-D，1；G6PD，B；GLO-I，2；Me-2，2；PGM1, 1-2；PGM3，1

Du4475细胞参数表

细胞名称	DU4475细胞 (人乳腺上皮细胞)
别称	Du4475; DU-4475; Du-4475; DU 4475; Du 4475; Duke University 4475
种属	人
组织来源	乳腺；乳房
细胞类型	肿瘤细胞
肿瘤类型	乳腺癌细胞
供体信息	女性，62岁
来源描述	从一名62岁女性的未分化癌的局部转移性皮肤结节建立，该患者在乳腺低分化导管癌根治术后7年发展。文献中描述了细胞在无胸腺裸鼠中容易生长，并产生肿瘤。
生长特性	悬浮细胞，多细胞聚集
细胞形态	圆形，上皮细胞样
培养环境	空气，95%；CO₂，5%；37℃
完全培养基	RPMI-1640 (PM150110) + 10% FBS (164210-50) + 1% P/S (PB180120)
冻存条件	55% 基础培养基 + 40% FBS + 5% DMSO，液氮保存
传代比例	1:2-1:3
换液频次	2-3次/周
倍增时间	80-100小时
生物安全等级	1
致瘤性	是，在裸鼠中致瘤
同工酶	AK-1, 1; S-D, 1; G6PD, B; GLO-I, 2; Me-2, 2; PGM1, 1-2; PGM3, 1
细胞模态数	93；范围85至95
染色体特性	非整倍体，染色体计数在四倍体范围内，常见染色体N16和N21的拷贝数低于两个，而染色体N7的拷贝数高达四到五个。
标记染色体	22条，包括iso（1q）、del（1）（q32）、der（1）t（1；？）（p36；？）、del（3）（q24）、der（3）t（3；？）等。
电镜观察特征	透射电镜观察到大量桥粒和叉指微绒毛。
生长形态	漂浮的簇，不能通过染料排除测试来准确测定生存能力。
肿瘤组织学特征	形成的肿瘤其组织学与原发癌相似。
保藏机构	ATCC; HTB-123
备注	该细胞为悬浮细胞，请注意离心收集细胞悬液，请勿直接倒掉细胞培养液。

培养教程

Du4475人乳腺上皮细胞培养

细胞复苏步骤

解冻: 收到细胞后应尽快进行复苏。如果需要继续储存Du4475细胞，应存放在液氮蒸汽相中，而不是-70°C。储存在-70°C会导致细胞活性下降。将冻存管在37°C的水浴中轻轻摇动解冻。为减少污染的可能性，请保持O形圈和盖子不接触水。解冻应迅速（约2分钟）。
消毒: 一旦细胞解冻，将冻存管从水浴中取出，并通过浸入或喷洒70%乙醇进行消毒。从此时起的所有操作应在严格的无菌条件下进行。
离心: 将冻存管内容物转移到含有9.0 mL完全培养基的离心管中，以约125 x g离心5至7分钟。
重悬细胞: 用推荐的完全培养基重悬细胞沉淀（见具体批次信息以获取推荐的培养稀释比例），并分装到25 cm²或75 cm²的培养瓶中。在细胞恢复期间，避免培养基过度碱性。建议在加入冻存管内容物之前，将含有完全培养基的培养容器置于培养箱中至少15分钟，以使培养基达到正常pH值（7.0至7.6）。
培养: 在37°C适宜的培养箱中培养。推荐使用5% CO₂的空气环境进行培养。

传代步骤

维持培养: 可以通过补充新鲜培养基或更换培养基来维持Du4475细胞培养。新培养物应以2 x 10⁵细胞/mL建立，并维持在10⁵至10⁶细胞/mL之间。
培养基更换: 每周更换2至3次培养基。

STR鉴定及相关

Amelogenin	X
CSF1PO	9,12
D2S1338	20,25
D3S1358	14,16
D5S818	6,11 (DSMZ=ACC-427)
D5S818	11 (ATCC=HTB-123; CCRID=1101HUM-PUMC000342; CLS=300371; Cosmic-CLP=906844; PubMed=25877200)
D6S1043	11
D7S820	9,10
D8S1179	10,13
D12S391	18.3,25
D13S317	11,14
D16S539	11,12
D18S51	14,16
D19S433	14
D21S11	29,31.2
FGA	22,25
Penta D	13,14
Penta E	7,13
TH01	6,8
TPOX	8
vWA	17