HCC1806细胞系（人乳腺鳞状癌细胞系）

HCC1806细胞系是从一位60岁的非洲裔女性患者的乳腺鳞状细胞癌（ASCC）中分离，患者被诊断为TNM IIB期2级肿瘤，病情无淋巴结转移，于1995年成功建立，历时10个月。HCC1806细胞系表现出贴壁生长的特性，属于上皮样细胞系。

HCC1806细胞的染色体数目模式为75，范围在65至79之间，且多倍体率为22%。HCC1806细胞系的基因特征显示其为Her2/neu阴性和p53阴性。HCC1806细胞系是3p14.2位点FHIT基因缺失的纯合细胞。由于其特有的分子和细胞特性，这一细胞系被广泛用于乳腺癌的生物医学研究，特别是肿瘤发生机制、新药筛选以及治疗方法的开发中。

HCC1806细胞系特性特征

• 癌症基因：HER2/neu阴性；p53阴性
  

• FHIT基因：在3p14.2处存在缺失，属于纯合细胞。

• 上皮标记物：上皮糖蛋白2（EGP2）：阳性；细胞角蛋白19：阳性
  

• 激素受体：雌激素受体（ER）：阴性；孕激素受体（PR）：阴性

HCC1806细胞系参数表

HCC1806人乳腺鳞状癌细胞系培养教程

HCC1806细胞复苏

• 从液氮中取出保存的HCC1806细胞冻存管，迅速将其置于37℃的水浴中进行解冻。解冻过程中轻轻摇晃冻存管，以加速HCC1806细胞的解冻均匀。
  

• 解冻后的HCC1806细胞立即加入4 mL预热至37℃的RPMI-1640培养基中，培养基中含有10%胎牛血清（FBS）和1%青霉素/链霉素（P/S），轻轻混合均匀。
  

• 在1000 rpm下离心3分钟，移除上清液，以去除DMSO等冷冻保护剂，确保HCC1806细胞的健康。
  

• 将沉淀的HCC1806细胞重悬于1-2 mL新鲜培养基中，轻轻吹打混匀HCC1806细胞。
  

• 将重悬的HCC1806细胞转移至含有适量培养基的培养瓶或培养皿中（如10 cm培养皿，加入约8 mL培养基），放置于37℃、5% CO₂培养箱中过夜培养。
  

• 第二天检查HCC1806细胞的贴壁情况和密度，及时更换新鲜培养基以去除解冻过程中产生的代谢产物。
  

HCC1806细胞传代

• 当HCC1806细胞密度达到80%-90%时，进行HCC1806细胞的传代操作。
  

• 弃去培养上清，用预热的无钙镁离子的PBS洗涤HCC1806细胞1-2次，以去除残留的血清成分。
  

• 加入1 mL含0.25%胰蛋白酶和0.53 mM EDTA的消化液，确保其均匀覆盖HCC1806细胞层。迅速弃去多余的消化液，将培养瓶置于37℃培养箱中消化1分钟左右，直到HCC1806细胞大部分变圆并轻微脱落。
  

• 轻敲培养瓶以促进HCC1806细胞脱落，随后加入少量含有FBS的培养基终止消化反应。
  

• 将HCC1806细胞悬液转移至无菌离心管中，加入6-8 mL新鲜培养基，混匀后在1000 rpm下离心4分钟，弃去上清液。
  

• 用1-2 mL新鲜培养基重悬HCC1806细胞，并轻轻吹打混匀HCC1806细胞。
  

• 按1:2至1:4的比例将HCC1806细胞悬液分装至新的培养瓶或培养皿中，加入8 mL培养基，置于37℃、5% CO₂培养箱中继续培养。
  

注意事项

• 始终保持无菌操作，避免HCC1806细胞培养过程中发生污染。

• 定期检查HCC1806细胞形态和生长状态，确保HCC1806细胞处于健康生长状态。

• 根据实验需求，适时调整培养基成分，以保证HCC1806细胞获得充足的营养供给。