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H3396细胞(人乳腺癌细胞系)货号:STM-CL-5390 规格:1×10⁶cells/T25培养瓶或1mL冻存管

H3396细胞(人乳腺癌细胞系) (暂不提供)

  • 来源:乳腺癌
  • 细胞特征:贴壁细胞 , 上皮细胞样
  • 培养基:DMEM+10% FBS+1% P/S
  • 其他:H3396细胞系展示了典型的肿瘤细胞特性,例如快速增殖和不受正常细胞生长调控的能力
Tags: 乳腺癌细胞    
价格:¥ 1,400.00
提供STR鉴定报告

H3396细胞系是从一名患有晚期乳腺癌的女性患者的胸腔积液中分离。H3396细胞由美国国立卫生研究院国家癌症研究所的科学家们创建,为研究乳腺癌的生物学特性及药物反应提供了重要的实验模型。

H3396细胞参数表

细胞名称H3396细胞(人乳腺癌细胞系)
细胞别称3396
来源乳腺癌女性患者胸腔积液
细胞形态上皮细胞样
细胞类型肿瘤细胞
生长特性贴壁细胞
生物安全等级1
致瘤性
培养基DMEM + 10% FBS + 1% P/S
培养环境37℃,5% CO2,饱和湿度
换液周期每2-3天换液
培养基体积T25瓶:10-12ml;10cm皿:12-15ml
传代比例1:2 - 1:4(视细胞生长速度及密度而定)
冻存液配方92% FBS + 8% DMSO 或 92% 完全培养基 + 8% DMSO
注意事项胰酶消化时间需严格控制,避免产生气泡影响细胞状态。
基因表达可能表达雌激素受体(ER)、人表皮生长因子受体2(HER2)
蛋白质特征可能分泌多种细胞因子和生长因子
细胞信号通路参与细胞增殖、凋亡及肿瘤微环境的形成
基因组特征可能存在特定的突变或基因组不稳定性
污染物检测阴性
应用领域药物筛选、机制研究、生物标志物研究
细胞特性快速增殖,不受正常生长调控,适合用于各种生物医学研究

培养教程

H3396人乳腺癌细胞系培养教程

H3396细胞的传代

  • 传代频率:H3396细胞需每2-3天换液一次,根据细胞的生长密度和状态来决定传代时间。

  • 去除旧培养基:用吸管将H3396细胞培养瓶中的旧培养基彻底吸尽。

  • PBS冲洗:加入3-4 ml无钙镁PBS,轻轻摇动培养瓶以润洗H3396细胞,持续10-20秒后吸走PBS。

  • 胰酶消化:加入1 ml胰酶覆盖H3396细胞层,轻轻摇匀胰酶,使其均匀接触H3396细胞。

  • 消化监控:将培养瓶置于37℃培养箱内消化,观察H3396细胞间隙逐渐增大,但细胞未完全脱落时停止消化。

  • 终止消化:加入2-3 ml完全培养基(含10% FBS)中和胰酶,轻轻混匀H3396细胞悬液。

  • 细胞收集:将H3396细胞悬液转移到离心管中,以900 rpm离心3-5分钟,去除上清液。

  • 重悬H3396细胞:用新鲜的完全培养基重悬H3396细胞,轻轻吹打使其均匀分布。

  • 补充培养基:将重悬后的H3396细胞转移到新的培养瓶中,补足培养基后,置于培养箱中继续培养。

H3396细胞的冻存与复苏

冻存步骤

  • 细胞收集:按传代步骤收集H3396细胞,并进行离心,去除上清液。

  • 重悬H3396细胞:用冻存液(92% FBS + 8% DMSO)重悬H3396细胞,控制细胞浓度为200-300万/ml。

  • 分装:将H3396细胞悬液分装到冻存管中,并做好标签标记。

  • 程序降温:将冻存管置于程序降温盒中,先在4℃下放置30分钟。

  • 低温保存:随后将H3396细胞冻存管转移至-80℃冰箱中过夜,最终储存在液氮中以长期保存。

复苏步骤

  • 快速解冻:将冻存的H3396细胞冻存管迅速置于37℃水浴中解冻,确保细胞完全融化。

  • 重悬H3396细胞:将解冻的H3396细胞加入预热的完全培养基中,轻轻混匀。

  • 离心:以900 rpm离心3-5分钟,去除上清。

  • 重悬与培养:用新鲜培养基重悬H3396细胞后,转移至培养瓶中,置于培养箱中继续培养。

H3396细胞培养中的注意事项

  • 胰酶消化时间:不同品牌的胰酶活性差异较大,因此需密切监控消化时间,以防止H3396细胞过度消化导致损伤。

  • 操作轻柔:在消化和重悬H3396细胞过程中,操作需轻柔,防止机械损伤对细胞造成不良影响。

  • 污染预防:操作过程中应严格遵守无菌操作规程,确保H3396细胞培养物不受污染。

  • 细胞状态监测:定期检查H3396细胞的形态和生长情况,确保细胞处于健康状态。

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