
H3396细胞(人乳腺癌细胞系) (暂不提供)
- 来源:乳腺癌
- 细胞特征:贴壁细胞 , 上皮细胞样
- 培养基:DMEM+10% FBS+1% P/S
- 其他:H3396细胞系展示了典型的肿瘤细胞特性,例如快速增殖和不受正常细胞生长调控的能力
H3396细胞系是从一名患有晚期乳腺癌的女性患者的胸腔积液中分离。H3396细胞由美国国立卫生研究院国家癌症研究所的科学家们创建,为研究乳腺癌的生物学特性及药物反应提供了重要的实验模型。
H3396细胞参数表
细胞名称 | H3396细胞(人乳腺癌细胞系) |
细胞别称 | 3396 |
来源 | 乳腺癌女性患者胸腔积液 |
细胞形态 | 上皮细胞样 |
细胞类型 | 肿瘤细胞 |
生长特性 | 贴壁细胞 |
生物安全等级 | 1 |
致瘤性 | 是 |
培养基 | DMEM + 10% FBS + 1% P/S |
培养环境 | 37℃,5% CO2,饱和湿度 |
换液周期 | 每2-3天换液 |
培养基体积 | T25瓶:10-12ml;10cm皿:12-15ml |
传代比例 | 1:2 - 1:4(视细胞生长速度及密度而定) |
冻存液配方 | 92% FBS + 8% DMSO 或 92% 完全培养基 + 8% DMSO |
注意事项 | 胰酶消化时间需严格控制,避免产生气泡影响细胞状态。 |
基因表达 | 可能表达雌激素受体(ER)、人表皮生长因子受体2(HER2) |
蛋白质特征 | 可能分泌多种细胞因子和生长因子 |
细胞信号通路 | 参与细胞增殖、凋亡及肿瘤微环境的形成 |
基因组特征 | 可能存在特定的突变或基因组不稳定性 |
污染物检测 | 阴性 |
应用领域 | 药物筛选、机制研究、生物标志物研究 |
细胞特性 | 快速增殖,不受正常生长调控,适合用于各种生物医学研究 |
培养教程
H3396人乳腺癌细胞系培养教程
H3396细胞的传代
传代频率:H3396细胞需每2-3天换液一次,根据细胞的生长密度和状态来决定传代时间。
去除旧培养基:用吸管将H3396细胞培养瓶中的旧培养基彻底吸尽。
PBS冲洗:加入3-4 ml无钙镁PBS,轻轻摇动培养瓶以润洗H3396细胞,持续10-20秒后吸走PBS。
胰酶消化:加入1 ml胰酶覆盖H3396细胞层,轻轻摇匀胰酶,使其均匀接触H3396细胞。
消化监控:将培养瓶置于37℃培养箱内消化,观察H3396细胞间隙逐渐增大,但细胞未完全脱落时停止消化。
终止消化:加入2-3 ml完全培养基(含10% FBS)中和胰酶,轻轻混匀H3396细胞悬液。
细胞收集:将H3396细胞悬液转移到离心管中,以900 rpm离心3-5分钟,去除上清液。
重悬H3396细胞:用新鲜的完全培养基重悬H3396细胞,轻轻吹打使其均匀分布。
补充培养基:将重悬后的H3396细胞转移到新的培养瓶中,补足培养基后,置于培养箱中继续培养。
H3396细胞的冻存与复苏
冻存步骤
细胞收集:按传代步骤收集H3396细胞,并进行离心,去除上清液。
重悬H3396细胞:用冻存液(92% FBS + 8% DMSO)重悬H3396细胞,控制细胞浓度为200-300万/ml。
分装:将H3396细胞悬液分装到冻存管中,并做好标签标记。
程序降温:将冻存管置于程序降温盒中,先在4℃下放置30分钟。
低温保存:随后将H3396细胞冻存管转移至-80℃冰箱中过夜,最终储存在液氮中以长期保存。
复苏步骤
快速解冻:将冻存的H3396细胞冻存管迅速置于37℃水浴中解冻,确保细胞完全融化。
重悬H3396细胞:将解冻的H3396细胞加入预热的完全培养基中,轻轻混匀。
离心:以900 rpm离心3-5分钟,去除上清。
重悬与培养:用新鲜培养基重悬H3396细胞后,转移至培养瓶中,置于培养箱中继续培养。
H3396细胞培养中的注意事项
胰酶消化时间:不同品牌的胰酶活性差异较大,因此需密切监控消化时间,以防止H3396细胞过度消化导致损伤。
操作轻柔:在消化和重悬H3396细胞过程中,操作需轻柔,防止机械损伤对细胞造成不良影响。
污染预防:操作过程中应严格遵守无菌操作规程,确保H3396细胞培养物不受污染。
细胞状态监测:定期检查H3396细胞的形态和生长情况,确保细胞处于健康状态。
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