
MDA-MB-157细胞(人乳腺癌细胞)
- 来源:乳腺癌
- 细胞特征:贴壁细胞 , 上皮细胞样
- 培养基:Leibovitz's L-15+10%FBS+1%双抗
- 其他:MDA-MB-157细胞系表达WNT7B癌基因,具有一定的肿瘤形成能力
MDA-MB-157细胞是一种上皮样乳腺癌细胞系,源自一名44岁患有乳腺髓样癌的黑人女性的胸腔积液。mda-mb-157细胞系最早由R. Cailleau于1976年建立,主要用于癌症研究,特别是在乳腺癌和免疫肿瘤学领域中具有重要应用。
mda-mb-157细胞的模态数在52至54之间,染色体数范围为52至69。其核型分析显示大部分细胞具有三条正常的X染色体,而未发现正常的N1、N5、N13、N14、N15、N16、N19和N22染色体。细胞中存在17条标记染色体,包括t(10q14q)和其他复杂重排。
MDA-MB-157人乳腺癌细胞特性特征
致瘤性:mda-mb-157细胞在裸小鼠和免疫抑制的BALB/c小鼠中能够形成肿瘤,表明其具有致瘤性。
抗原表达:mda-mb-157细胞表达B型血抗原和Rh-。
同工酶特征:mda-mb-157细胞系表现出特定的同工酶活性,包括AK-1 (1)、ES-D (1)、G6PD (B)、GLO-I (1-2)、Me-2 (1)、PGM1 (1)、PGM3 (1)。
癌基因表达:MDA-MB-157细胞系表达WNT7B癌基因,这与肿瘤的发生和发展相关。
细胞结构特征:在细胞之间的边界处观察到细胞桥粒、微绒毛和张力丝等结构,这些特征表明细胞的上皮样特性和细胞间的相互作用
MDA-MB-157细胞参数表
细胞名称 | MDA-MB-157细胞(人乳腺癌细胞) |
别称 | MDA-MB157; MDAMB157; MDA-157; MDA157; MB 157; MB157; MD Anderson-MetastaticBreast-157 |
细胞系编号 | ATCC HTB-24 |
来源 | 一名44岁黑人女性的乳腺髓样癌转移性胸腔积液 |
细胞类型 | 上皮样细胞 |
生长特性 | 贴壁生长 |
致瘤性 | 在裸小鼠和免疫抑制的BALB/c小鼠中形成肿瘤 |
抗原表达 | B型血,Rh- |
同工酶特征 | AK-1 (1),ES-D (1),G6PD (B),GLO-I (1-2),Me-2 (1),PGM1 (1),PGM3 (1) |
癌基因表达 | WNT7B |
细胞形态 | 上皮样,边界处有细胞桥粒、微绒毛和张力丝 |
细胞活力 | 高活力,代数低 |
培养基 | DMEM(Dulbecco's Modified Eagle Medium) + 20% 胎牛血清 (FBS) |
传代方法 | 1:2至1:3传代,每周换液2-3次 |
冻存液配方 | 基础培养基 + 5% DMSO + 10% FBS |
生长环境 | 37℃,0% CO₂ |
传代频率 | 每3-4天传代一次 |
倍增时间 | 2.8 days (PubMed=9671407); 66.98 hours (JWGray panel) |
细胞冻存条件 | -80℃短期冻存或液氮长期冻存 |
细胞分化能力 | 具有一定的分化潜能,适用于多种实验研究 |
应用领域 | 乳腺癌研究、药物筛选、肿瘤微环境研究 |
培养教程
MDA-MB-157人乳腺癌细胞培养教程
MDA-MB-157细胞的传代方法
弃去旧培养基:小心吸出MDA-MB-157细胞的旧培养基,避免干扰细胞状态。
PBS洗涤:用无钙镁的PBS缓冲液洗涤MDA-MB-157细胞层两次,以去除残留的培养基。
消化细胞:加入0.25%胰蛋白酶-EDTA溶液,置于37°C培养箱内消化2-3分钟,观察MDA-MB-157细胞开始脱落。
促进细胞脱落:轻拍培养瓶侧壁,确保MDA-MB-157细胞完全脱落。
终止消化:加入含有10% FBS的DMEM培养基终止消化反应,防止损伤MDA-MB-157细胞。
离心细胞:将MDA-MB-157细胞悬液转移到离心管中,1000 rpm离心5分钟,收集MDA-MB-157细胞沉淀。
重悬细胞:弃去上清液,MDA-MB-157细胞沉淀用新鲜培养基重悬。
接种:按照1:3的比例接种MDA-MB-157细胞到新培养瓶中,加入适量培养基。
培养:将接种后的MDA-MB-157细胞培养瓶置于37°C,5% CO2的培养箱中继续培养。
MDA-MB-157细胞的冻存方法
细胞收集:按上述传代步骤消化并收集MDA-MB-157细胞。
重悬细胞:离心后,用冻存液(90% FBS + 10% DMSO)重悬MDA-MB-157细胞,调整浓度至1×10^6 cells/mL。
分装冻存:将MDA-MB-157细胞悬液分装到冻存管中。
初步冻存:将冻存管放置于-80°C冰箱中过夜,确保MDA-MB-157细胞逐步适应低温。
长期保存:次日将MDA-MB-157细胞转移至液氮罐中进行长期保存。
MDA-MB-157细胞的复苏方法
快速融化:从液氮罐中取出MDA-MB-157细胞冻存管,迅速放入37°C水浴中轻轻晃动,直到MDA-MB-157细胞悬液完全融化。
离心去除DMSO:将融化后的MDA-MB-157细胞悬液转移至离心管中,加入10 mL预温的培养基,1000 rpm离心5分钟,去除上清。
重悬和培养:用新鲜培养基重悬MDA-MB-157细胞,并将其接种到培养瓶中。
复苏后培养:置于37°C,5% CO2培养箱中继续培养MDA-MB-157细胞,次日换液以去除残余的DMSO。
注意事项
无菌操作:在整个操作过程中,需严格保持无菌条件,以防止MDA-MB-157细胞污染。
消化时间:应适时观察MDA-MB-157细胞的消化情况,避免过长的消化时间以防止细胞损伤。
接种密度:传代时要注意调整MDA-MB-157细胞的接种密度,避免细胞过度稀疏或过密。
DMSO浓度:冻存MDA-MB-157细胞时DMSO浓度应严格控制在10%,以减少其对细胞的毒性影响。
快速稀释DMSO:MDA-MB-157细胞复苏后,需迅速稀释培养基中的DMSO,以减少对细胞的潜在损伤。
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STR鉴定及相关
Amelogenin | X |
CSF1PO | 10 |
D2S1338 | 25 |
D3S1358 | 16 |
D5S818 | 12 |
D7S820 | 10,11 |
D8S1179 | 12,14 |
D13S317 | 11 (AddexBio=C0006020/4986; ATCC=CRL-7721; CCRID=1101HUM-PUMC000077; Cosmic-CLP=925338; ECACC=92020422; PubMed=20679594; PubMed=25877200; PubMed=28889351) |
11,12 (ATCC=HTB-24) | |
D16S539 | 11 |
D18S51 | 13,16 (ATCC=CRL-7721; ATCC=HTB-24) |
16 (CCRID=1101HUM-PUMC000077; PubMed=25877200) | |
D19S433 | 13,14.2 (ATCC=CRL-7721; ATCC=HTB-24) |
14.2 (CCRID=1101HUM-PUMC000077) | |
D21S11 | 31,31.2 |
FGA | 22,23 (ATCC=CRL-7721) |
23 (ATCC=HTB-24; CCRID=1101HUM-PUMC000077; PubMed=25877200) | |
Penta D | 3.2,9 |
Penta E | 11 |
TH01 | 7,8 |
TPOX | 9,11 (AddexBio=C0006020/4986; ATCC=CRL-7721; ATCC=HTB-24; ECACC=92020422; PubMed=20679594; PubMed=25877200; PubMed=28889351) |
11 (CCRID=1101HUM-PUMC000077; Cosmic-CLP=925338) | |
vWA | 15 |