MDA-MB-175-VII细胞（人乳腺导管癌细胞）

MDA-MB-175VII是从一名56岁黑人女性的胸腔积液中分离出的人乳腺导管癌细胞系，于1973年首次分离。MDA-175上皮样细胞被广泛用于癌症研究。

MDA-175细胞的核型为84，染色体计数在82到89之间，属非整倍体雌性（XX/XX/XXXX），染色体数目从超四倍体至近四倍体。所有正常染色体至少有一个拷贝，大多数染色体每个核型有三到四个拷贝。标记染色体包括del(1)p35)、der(7)t(1;7)(q11;q32)、未知、t(2q;?)和未知等位染色体。N1染色体q臂的改变与M.J.Siciliano等人于1979年在《癌症研究》中报道的结果一致，癌症研究39:99191979。

MDA-MB-175-VII细胞特性特征

• MDA-175细胞生长速度较快，但相对其他细胞系可能较慢
  

• 倾向于扎堆生长，堆与堆之间有空间、贴壁速度快、难以消化

• MDA-175细胞具有转移性，源自胸腔积液
  

• 同工酶表达：AK-1,1; ES-D,1; G6PD,B; GLO-I,1-2; PGM1,2; PGM3,1-2
  

• 致瘤性：在裸鼠皮下接种10^7个细胞后，21天内100%（5/5）发展为肿瘤
  

MDA-MB-175-VII细胞参数表

MDA-MB-175-VII人乳腺导管癌细胞培养教程

注意事项

• 推荐使用Leibovitz's L-15培养基，该培养基不需CO2。

• 若无无CO2培养箱，可使用DMEM培养基，并通入5% CO2。

• 专用培养基默认Leibovitz's L-15配置，如需DMEM配方，请联系销售备注更改。

• MDA175细胞生长慢，难消化。

培养教程

• 培养基选择：推荐使用Leibovitz's L-15培养基，添加10% FBS和10 µg/ml胰岛素；如果使用DMEM培养基，则需5% CO2环境。

• 培养条件：温度：37°C；气相：无CO2（使用Leibovitz's L-15培养基时）。

• 传代方法：传代比例：1:2 至 1:6

• 频率：每周换液2-3次。

• 消化方法：使用0.25%胰蛋白酶或胰蛋白酶/EDTA溶液。

• 消化时间：1-3分钟。

培养步骤

• 确保所有器材和试剂无菌。

• 预热培养基和胰蛋白酶溶液至37°C。

  
  

• 消化细胞：

• 弃去旧培养基。

• 用PBS轻轻冲洗MDA175细胞1-2次。

• 加入适量预热的胰蛋白酶溶液。

• 置于37°C孵育1-3分钟，观察MDA175细胞脱落情况。

  
  

• c. 收集细胞：

• 加入等体积完全培养基终止消化。

• 轻轻吹打细胞，使其完全脱落。

• 将MDA175细胞悬液转移至离心管中。

  
  

• d. 离心和重悬：

• 1000rpm离心5分钟。

• 弃上清，用新鲜完全培养基重悬MDA175细胞。

  
  

• e. 接种：

• 按1:2至1:6的比例将MDA175细胞接种到新的培养瓶中。

• 加入适量完全培养基。

• 轻轻摇晃培养瓶，使MDA175细胞均匀分布。

  
  

• f. 培养：

• 将培养瓶置于37°C培养箱中。

• 每天观察MDA175细胞生长状况。

注意事项

• MDA175细胞生长较快，传代时应留少量细胞以保持良好状态。

• MDA175细胞倾向于扎堆生长，堆与堆之间有空间。

• 贴壁速度快，观察时需要注意。

冻存方法

• 使用无血清细胞冻存液进行冻存。

复苏操作

• 快速解冻MDA175细胞。

• 每10分钟观察一次，直到部分MDA175细胞贴壁。

• 轻轻倒出培养基，用3ml新培养基轻轻洗一次。

• 加入完全培养基继续培养。

• 观察MDA175细胞生长情况和形态，必要时重复此过程（称为"二传"）。