
MDA-MB-415 人乳腺癌细胞
- 来源:胸腔积液
- 细胞特征:贴壁细胞 , 上皮细胞样
- 培养基:生长培养基:DMEM+10μg/mL Insulin+16μg/mL Glutathione+15% FBS+1% P/S
- 其他:MDA-MB-415细胞不易受胰蛋白酶作用的影响。
MDA-MB-415细胞来源于一位患有乳腺腺癌的成年女性的转移性部位,表现出乳腺上皮细胞的特征。
MDA-MB-415细胞的模态数为73,范围在65到76之间,具有超三倍体的染色体数目,2S组分占0.8%。共有10个标记物在所有细胞中均存在(包括del(2)、t(6;?)、t(6;)、t[2;12]、t(14;?)及单个或成对的M6、M7、M8、M9、M10),另外4个标记物(M13、M15、M16和t(13,21))在部分细胞中出现。X染色体通常为四体,4号染色体则为四体或五体(P35)。在QM染色制剂中未检测到Y染色体。
MDA-MB-415细胞源于一位来自巴拉圭的38岁女性患者,尽管她被归类为高加索人,但细胞表现出G6PD A型表型,暗示可能具有混合血统。
MDA-MB-415人乳腺癌细胞特性
MDA-MB-415细胞雌激素受体阳性(ER+)和HER2阴性,适用于研究激素反应性乳腺癌。
MDA-MB-415细胞表达O型血抗原、基因表达包括釉原蛋白(X染色体)(AMELEX)。
同工酶表型为AK-1, 1;ES-D, 2;G6PD, A;GLO-I, 1-2;Me-2, 2;PGM1, 1;PGM3, 1。
MDA-MB-415细胞患者来自巴拉圭,可能具有混合血统,细胞表现出G6PD A型表型。
MDA-MB-415细胞外形为扁平、铺展的上皮斑块、电子显微镜下可见桥粒、广泛的微管和微丝。
MDA-MB-415细胞不易受胰蛋白酶作用的影响。
MDA-MB-415细胞表达WNT7B癌基因[PubMed:816808]。
MDA-MB-415细胞是非致瘤的,(在免疫抑制小鼠中)
MDA-MB-415人乳腺癌细胞参数表
细胞系名称 | MDA-MB-415人乳腺癌细胞 |
细胞别称 | MDA-MB-415; MDA-MB 415; MDA 415; MDAnderson-Metastatic Breast-415 |
来源 | 乳腺腺癌;胸腔积液转移 |
供体年龄 | 女性,38岁 |
细胞类型 | 肿瘤细胞 |
肿瘤类型 | 乳腺癌细胞 |
细胞形态 | 上皮细胞样 |
生长特性 | 贴壁细胞 |
物种 | 人 |
生物安全等级 | 1 |
抗原表达 | Blood Type O |
基因表达 | amelogenin (X chromosome)(AMELEX); WNT7B癌基因 |
致瘤性 | No, in immunosuppressed mice. Yes, in semisolid medium. |
培养基 | DMEM (PM 150210) + 10μg/mL Insulin + 10μg/mL Glutathione + 15% FBS (164210-50) + 1% P/S(PB 180120); Leibovitz's L-15 + 10μg/mL Insulin + 10μg/mL Glutathione + 15% FBS + 1% P/S |
培养环境 | 37°C;空气,95%;CO₂,5%;饱和湿度; |
换液频次 | 2~3次/周 |
传代比例 | 1:2-1:3 |
传代频率 | 每3-4天传代一次,当细胞密度达到80-90%时进行传代 |
消化方法 | 0.25% 胰蛋白酶-EDTA;不容易用胰酶消化,消化时间2~3分钟 |
细胞计数方法 | 台盼蓝拒染法 |
冻存液 | 55% 基础培养基 + 40% FBS + 5% DMSO |
冻存温度 | -80°C过夜后转液氮中长期保存 |
生长曲线 | 指数生长期约为24-48小时 |
药物敏感性 | 对化疗药物如阿霉素敏感 |
研究用途 | 肿瘤研究,药理学研究,转移机制研究 |
药物筛选 | 用于抗癌药物筛选 |
基因表达研究 | 研究乳腺癌相关基因的表达和调控 |
注意事项 | 使用Leibovitz's L-15培养基时,不可通入二氧化碳,会产生细胞毒性; 如没有无二氧化碳的培养箱,可使用DMEM替代Leibovitz's L-15 |
细胞保藏中心 | ATCC; HTB-128 |
培养教程
MDA-MB-415人乳腺癌细胞培养教程
细胞冻存
将含有1mL MDA-MB-415细胞悬液的冻存管在-80℃冰箱过夜。
转移至液氮保存,并标注详细信息。
细胞复苏
将冻存管快速置于37℃水浴中,直至细胞融化至微小冰块。
立即离心,弃去上清液。
加入适量预热的完全培养基,轻柔重悬细胞。
将细胞悬液按需均匀铺于新的培养瓶中,放入37℃恒温细胞培养箱中过夜培养。
细胞传代
当细胞生长达到80%~90%密度时,进行传代培养。
使用0.25%(w/v)胰蛋白酶-0.53mM EDTA消化细胞,注意消化时间和观察细胞脱落情况。
加入新鲜的完全培养基终止消化,离心收集细胞。
按1:2比例将细胞重新接种至新的培养瓶中,继续培养。
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STR鉴定及相关
Amelogenin | X |
CSF1PO | 10,12 |
D2S1338 | 19,24 |
D3S1358 | 17 |
D5S818 | 11,13 |
D7S820 | 9,10 |
D8S1179 | 8,12 |
D13S317 | 11,13 |
D16S539 | 13 |
D18S51 | 13 |
D19S433 | 13,13.2 |
D21S11 | 27,28 |
FGA | 22 |
Penta D | 9,10 |
Penta E | 7,16 |
TH01 | 7,9.3 |
TPOX | 8 |
vWA | 17 |