skbr3细胞（人乳腺腺癌细胞）

SK-BR-3细胞系于1970年由Trempe G和Old L.J从一名43岁白人a+型女性乳腺癌患者的胸腔积液中分离。该患者曾接受放疗、类固醇、环磷酰胺和5-氟尿嘧啶的治疗。SK-BR-3细胞系过表达HER2/c-erb-2基因产物，是研究HER2阳性乳腺癌的重要模型。

SK-BR-3细胞系是一种具有84条模式染色体的超三倍体人类细胞系，其中34%的细胞具有84条染色体，28%的细胞具有80条染色体，7.3%的细胞具有更高的倍性。skbr3细胞系的染色体组成非常复杂，35%-40%的染色体由结构改变的标记染色体组成。标记物包括 der（1）t（1；21）（p13；q21）、del（2）（q13）和t（7pter-cen--？），这些标记物仅在部分细胞中存在，标记的起源尚不清楚。大多数细胞含有三条正常的X染色体和五条或更多的N7染色体，而正常的N1、N14和N17通常缺失。

skbr3细胞人乳腺腺癌细胞特性特征

• 分子特征：HER2/c-erb-2基因产物过表达，是研究HER2阳性乳腺癌的重要模型

• 亚显微结构特征：包括微丝和桥粒、肝糖原颗粒、大溶酶体、成束的细胞质纤丝

• 致瘤性和转移特征：在裸鼠中可形成分化不良的腺癌；原始转移部位为胸腔积液

• 抗原表达：A型血；Rh+；HLA A11、Bw22（+/-）、B40、B18

• 同工酶：AK-1，1-2；ES-D，1；G6PD，B；GLO-I，2；PGM1，1-2；PGM3，1；

skbr3细胞参数表

skbr3人乳腺腺癌细胞培养教程

复苏过程

• SK-BR-3细胞从冷冻状态复苏较慢，初期附着情况较轻。复苏后，保持细胞静置48小时，以便SK-BR-3细胞充分贴壁，不进行任何操作。

• 如果观察到大量漂浮的SK-BR-3细胞，可以使用台盼蓝检查其活性。

• 对于活细胞，通过轻柔离心（125xg，5-7分钟）进行收集，然后将细胞悬液放回培养容器中。

日常培养

• 传代比例: 对于SK-BR-3细胞，推荐使用1:2至1:4的传代比例。

• 换液频率: 每周2-3次。

• 倍增时间: SK-BR-3细胞的倍增时间约为48-72小时。

• 传代时机: 避免SK-BR-3细胞过度生长，建议在细胞汇合度达到70-80%时进行传代。

传代步骤

• 吸出SK-BR-3细胞的原培养液。

• 加入2 mL PBS轻轻润洗细胞，吸出废弃液体。

• 加入1 mL 0.25%胰蛋白酶溶液（含EDTA），轻轻晃动培养瓶。

• 在37°C孵育2-3分钟，待SK-BR-3细胞脱落。

• 加入等体积的含血清培养基以终止消化。

• 收集细胞悬液，使用1000 rpm离心5分钟。

• 弃上清，用新鲜培养基重悬SK-BR-3细胞。

• 按1:2至1:4的比例将SK-BR-3细胞接种到新培养瓶中。

特殊注意事项

• 细胞生长: SK-BR-3细胞倾向于相互堆积，避免细胞过度生长，确保培养基和传代操作适时进行。

• 漂浮细胞: 在培养过程中，SK-BR-3细胞可能会出现漂浮现象。处理方法包括：

• 使用台盼蓝检查漂浮SK-BR-3细胞的活性。

• 通过轻柔离心收集漂浮的SK-BR-3细胞，保留它们，避免丢弃。

• 在换液或传代时，将漂浮细胞与附着细胞一起放回培养容器中。

• 细胞贴壁: SK-BR-3细胞在复苏后的初期通常以小斑块或细胞群形式附着，漂浮细胞可能较多。给予SK-BR-3细胞充分时间贴壁，避免频繁操作和过度观察。

• 生长促进: 如果SK-BR-3细胞生长缓慢，可以采用半换液方式促进细胞生长。

冻存条件

• 冻存液: 55%基础培养基 + 40%胎牛血清（FBS） + 5%二甲基亚硫酰胺（DMSO）。储存温度: 液氮。

复苏和培养中常见问题处理

• 复苏速度: SK-BR-3细胞从冷冻状态恢复速度较慢，初期附着较轻，可能需要几天时间才完全贴壁。

• 漂浮细胞: 初期可能会有大量漂浮的SK-BR-3细胞，处理时应通过轻柔离心保留这些细胞，并在后续换液或传代过程中将其放回培养容器中。