
MDA-kb2细胞(人乳腺癌细胞系)
- 来源:乳腺
- 细胞特征:贴壁细胞,上皮细胞样
- 培养基:生长培养基:DMEM+10% FBS+1% P/S
- 其他:通过转染MMTV荧光素酶neo报告基因构建
MDA-kb2细胞是源自于乳腺癌细胞系MDA-MB-453,最初是通过稳定转染小鼠乳腺病毒(MMTV)荧光素酶neo报告基因构建的。MDA-kb2细胞的原始来源是从一位48岁的白人女性乳腺癌患者的乳房样本中分离出来,特别适用于研究人类雄激素受体(AR)和糖皮质激素受体(GR)的内分泌活性。
MDA-kb2细胞系对雄激素受体激动剂如二氢睾酮以及糖皮质激素受体激动剂如地塞米松、皮质酮和醛固酮的响应稳定且可靠,在长达80多次传代的时间内保持其反应性。
MDA-kb2细胞特性
MDA-kb2细胞用于研究人类雄激素受体(AR)和糖皮质激素受体(GR)的内分泌活性
基因表达:萤光素酶,在MMTV启动子的控制下表达,含有AR和GR的反应元件
表达标记:AR和GR,阳性
实验应用:通过MMTV启动子激活萤光素酶报告子,用于评估雄激素受体和糖皮质激素受体介导的化合物活性
反应性稳定性:在80多次传代中保持稳定
构建方式:通过转染MMTV荧光素酶neo报告基因构建
MDA-kb2细胞参数表
中文名称 | MDA-kb2细胞(人乳腺癌细胞系) |
别称 | MDA-kb2;人正常乳腺细胞;MDAKB2;MDA kb2;mda; |
组织来源 | 乳腺 |
细胞类型 | 肿瘤细胞 |
肿瘤类型 | 乳腺癌细胞 |
细胞形态 | 上皮细胞样 |
生长特性 | 贴壁细胞 |
培养环境 | 空气95%,CO2 5%,37℃ |
冻存条件 | 55%基础培养基 + 40% FBS + 5% DMSO,液氮; 或 90% FBS + 10% DMSO,液氮 |
完全培养基 | DMEM (PM 150210) + 10% FBS (164210-50) + 1% P/S (PB 180120) |
推荐培养基 | Leibovitz's L-15培养基 + 10% FBS + 1%双抗 |
传代比例(密度) | 1:2-1:5 |
换液频次 | 2-3次/周 |
细胞背景描述 | 来源于乳腺癌细胞系MDA-MB-453,通过稳定转染小鼠乳腺肿瘤病毒(MMTV)荧光素酶neo报告基因构建 |
倍增时间 | 32-40小时 |
生物安全等级 | 1 |
基因表达 | luciferase; The cell line expresses firefly luciferase under control of the MMTV promoter that contains response elements for both glucocorticoid receptors (GR) and androgen receptors (AR) |
细胞保藏中心 | ATCC; CRL-2713 |
细胞代数 | 10代以内 |
支原体检测 | 无 |
产品用途 | 仅限于科学研究 |
培养教程
MDA-kb2人乳腺癌细胞培养教程
解冻细胞
将MDA-kb2细胞的冻存管放入37°C水浴中快速解冻,轻轻摇匀,避免剧烈震动。
立即将解冻的细胞悬液转移到15ml离心管中,缓慢加入4ml预热的完整培养基(如DMEM/F-12)并轻轻混合。
在1000rpm条件下离心4分钟以沉淀细胞,去除上清液。
润洗细胞:将细胞沉淀用预热的PBS润洗一次,去除PBS。
初次培养
将沉淀后的MDA-kb2细胞悬液转移至25cm²或75cm²的组织培养瓶中,每个瓶子中加入适量的预热完整培养基(通常为8ml至15ml)。
将培养瓶放入37°C、5% CO₂的细胞培养箱中培养过夜。第二天可更换培养基,并观察细胞密度和状态。
细胞传代
当MDA-kb2细胞达到80%-90%的密度时进行传代。
弃去旧的培养基,用无钙、镁的PBS润洗细胞1-2次,去除PBS。
加入足够量的0.25% Trypsin-EDTA溶液,置于37°C培养箱中消化1-2分钟,直至大部分细胞从培养瓶表面脱落。
加入预热的培养基终止消化,轻轻敲击培养瓶帮助细胞分离。
将消化后的细胞悬液加入等量的预热培养基中,轻轻混合后离心4分钟(1000rpm),去除上清液。
补充1-2ml预热的培养基,将细胞悬液按1:2至1:5的比例分到新的培养瓶中。
相关资料
STR鉴定及相关
Amelogenin | X |
CSF1PO | 10,12 |
D2S1338 | 23,24 |
D3S1358 | 15 |
D5S818 | 11 |
D7S820 | 10 |
D8S1179 | 10,12 |
D13S317 | 12 |
D16S539 | 9 |
D18S51 | 15,20 |
D19S433 | 13,14 |
D21S11 | 29,31 |
FGA | 18,23 |
Penta D | 9,10 |
Penta E | 11 |
TH01 | 6 |
TPOX | 10 |
vWA | 17,18 |
参考文献
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