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货号：STM-CL-5216 规格：1×10⁶cells/T25培养瓶或1mL冻存管
MCF10A细胞株（人正常乳腺上皮细胞）
- 来源：乳腺；乳房
- 细胞特征：贴壁细胞，上皮细胞样
- 培养基：生长培养基：DMEM/F12＋5% HS＋20ng/ml EGF＋0.5μg/ml Hydrocortisone＋10μg/mL Insulin＋1% NEAA＋1% P/S
- 其他：表达乳腺特异性抗原，如与MFA乳腺和MC-5单克隆抗体的阳性反应。
MCF 10A人乳腺正常上皮细胞系源自1984年从一位白人女性乳腺组织中分离得到。
通过电子显微镜观察，MCF10A细胞株展示出典型的管腔导管细胞形态，MCF10A细胞株还表达通过与MFA-breast和MC-5单克隆抗体的阳性反应检测到的乳腺特异性抗原。
MCF10A细胞株特性
MCF10A细胞株来源于1984年从一名患有纤维囊性乳房的36岁白人女性的乳腺中分离得到，由密歇根癌症基金会保存。
MCF 10A细胞系在免疫抑制小鼠非致瘤，在在半固体培养基中致瘤。
MCF10A细胞株对上皮唾液酸粘蛋白、细胞角蛋白和乳脂肪球抗原呈阳性。
MCF10A细胞株在胶原中表现出三维生长，并在融合培养物中形成圆顶。
对胰岛素、糖皮质激素、霍乱肠毒素和表皮生长因子（EGF）有反应。
表达乳腺特异性抗原，如与MFA乳腺和MC-5单克隆抗体的阳性反应。
培养基中的钙含量对细胞形态有显著影响。
MCF10A细胞株参数表
| 细胞名称 | MCF10A细胞株（人正常乳腺上皮细胞） |
| 细胞别称 | MCF 10A; MCF.10A; MCF10A; MCF10a; MCF-10 Attached; Michigan Cancer Foundation-10A |
| 来源 | 乳腺；上皮细胞；自发永生；女性；36岁 |
| 疾病特征 | 纤维性囊肿病 |
| 细胞形态 | 上皮细胞样 |
| 细胞类型 | 正常细胞 |
| 生长特性 | 贴壁 |
| 生物安全等级 | 1 |
| 致瘤性 | 否（在免疫抑制小鼠中）；是（在半固体培养基中） |
| 培养基 | DMEM/F12＋5% HS＋20ng/ml EGF＋0.5μg/ml Hydrocortisone＋10μg/mL Insulin＋1% NEAA＋1% P/S |
| 培养环境 | 气相：空气，95%；CO2，5%；温度：37℃ |
| 传代比例 | 1:2-1:4 |
| 换液频率 | 2-3次/周 |
| 冻存条件 | 冻存液：60% 基础培养基+30%FBS+10%DMSO；温度：液氮 |
| 细胞特性 | MCF10A细胞株对上皮唾液酸粘蛋白、细胞角蛋白和乳脂肪球抗原阳性。通过电子显微镜观察，显示出管腔导管细胞的特征，而不是肌上皮细胞的特征。培养基中的钙含量对细胞的形态有很大影响。 |
| 响应因子 | MCF10A细胞株对胰岛素、糖皮质激素、霍乱肠毒素和表皮生长因子（EGF）有反应。 |
| 三维生长特性 | MCF10A细胞株在胶原蛋白中表现出三维生长，并在融合培养物中形成圆顶。 |
| 终末分化 | 到目前为止，MCF10A细胞株还没有表现出终末分化或衰老的迹象。 |
| 雌激素受体表达 | 阴性 |
| 保藏机构 | ATCC; CRL-10317 |
| 同工酶 | AK-1，1；S-D，1；G6PD，B；GLO-I，1-2；PGM1, 1-2；PGM3，1 |
| 质量检测 | 细菌、真菌、支原体检测均为阴性 |
| 培养要点 | 该细胞较难消化，注意延长消化时间，消化到细胞收缩变圆，轻拍培养瓶侧边，细胞可以滑落方可终止消化。 |
| 细胞简介 | MCF 10A细胞于1984年从患有纤维囊性乳房的36岁白人女性的乳腺中分离出来，来源于群体中的粘附细胞。 |
培养教程
MCF10A人正常乳腺上皮细胞培养教程
复苏细胞
将含 1mL MCF10A 细胞悬液的冻存管迅速在 37℃ 水浴中解冻，加入 4mL 预热的培养基，并进行适当的离心和混合处理。
将所有悬浮细胞转移至 T25 培养瓶中，加入足够的培养基以支持细胞的进一步生长。
细胞传代
当 MCF10A 细胞密度达到 80%-90% 时，可进行传代操作。
使用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞，加入适量的 0.25% Trypsin 进行消化，并在必要时加入大豆胰蛋白酶抑制剂终止消化。
细胞冻存
在细胞生长状态良好的情况下，可进行细胞冻存，以备后续实验使用。
注意事项
消化时间长：MCF10A 细胞消化时间较长，通常需5分钟或更久，具体时间受胰酶浓度、效价和消化条件影响。初次消化时需调整最佳消化时间。
对培养基要求高：MCF10A 细胞对培养基要求严格，必须含有胰岛素、氢化可的松、表皮生长因子和非必须氨基酸等关键成分，以保证细胞的正常生长和功能。
相关资料
STR鉴定及相关
| Amelogenin | X |
| CSF1PO | 10,12 |
| D2S1338 | 21,26 |
| D3S1358 | 14,18 |
| D5S818 | 10,13 |
| D7S820 | 10,11 |
| D8S1179 | 14,16 |
| D13S317 | 8,9 |
| D16S539 | 11,12 |
| D18S51 | 18,19 |
| D19S433 | 13,15 |
| D21S11 | 28,30 |
| FGA | 22,24 |
| PentaD | 10,12 |
| PentaE | 13,14 |
| TH01 | 8,9.3 |
| TPOX | 9,11 |
| vWA | 15,17 |
参考文献
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