
DMS53细胞(人小细胞肺癌细胞)
- 来源:肺
- 细胞特征:贴壁生长,也可以悬浮生长;, 上皮细胞样
- 培养基:Waymouth's MB 752/1+10%FBS+1%P/S
- 其他:DMS53细胞系也可在悬浮状态下生长,并表达HLA I型和II型抗原
DMS53细胞是一种来源于54岁未接受治疗的白人男性患有小细胞肺癌的细胞系,分离自纵隔活检组织。DMS53细胞表现出典型的上皮样形态,应用于小细胞肺癌的研究,尤其是在探索癌症生物学特性及药物筛选领域。DMS53细胞在早期传代时曾受到牛支原体Acholeplasma laidlawii的污染,但在冷冻保存前通过抗血清和卡那霉素衍生物得以清除。
DMS53细胞特性特征
致瘤性:在皮下移植裸鼠实验中,DMS53细胞展示了显著的致瘤性,当接种107个细胞时,肿瘤在21天内以100%的发生率形成(5只裸鼠中全部发生肿瘤)。
抗原表达:表达Leu 7和My23抗原。表达HLA I类和II类抗原,这使其在免疫反应研究中具有重要意义。
基因表达:表达多种激素和生长因子,包括促肾上腺皮质激素、降钙素、人绒毛膜促性腺激素、胰高血糖素、生长激素、17-β-雌二醇、甲状腺释放激素、催产素、甲状旁腺素和生长抑素样免疫反应性。
表达标记:Bombesin、表皮生长因子(EGF)、转化生长因子β(TGF-β)和乙酰胆碱的表达
DMS53人肺癌细胞参数表
细胞名称 | DMS53细胞(人小细胞肺癌细胞) |
别名 | DMS-53; DMS53; Darmouth Medical School 53 |
来源 | 54岁未治疗白人男性患者肺部活检组织 |
性别 | 男性 |
年龄 | 54岁 |
形态 | 上皮样,贴壁生长;也可以悬浮生长 |
细胞类型 | 小细胞肺癌细胞系 |
致瘤性 | 在裸鼠皮下接种107个细胞后,肿瘤发展率100%(5/5) |
抗原表达 | Leu 7;My23;HLA I类和II类抗原 |
基因表达特征 | 促肾上腺皮质激素、降钙素、人绒毛膜促性腺激素等 |
表达标记 | Bombesin、表皮生长因子(EGF)、转化生长因子β(TGF-β)和乙酰胆碱的表达 |
培养基类型 | Waymouth's MB 752/1 + 10% 胎牛血清(FBS) |
传代比例 | 1:2至1:3 |
传代周期 | 每3-4天一次 |
冻存液配方 | 90% FBS + 10% DMSO |
培养条件 | 温度:37℃;气相:空气95%,二氧化碳5% |
细胞检测 | 支原体、细菌、真菌检测阴性 |
用途限制 | 仅供科研使用,未经许可不得用于其他目的 |
培养教程
DMS53人肺癌细胞培养教程
DMS53细胞复苏步骤
从液氮中取出DMS53细胞的冻存管,立即放入37℃的水浴中,轻轻摇动,确保DMS53细胞迅速解冻(通常1-2分钟内完成)。
解冻后,将1 mL DMS53细胞悬液转移至含4 mL培养基的离心管中(培养基可使用Waymouth's MB 752/1,添加10%胎牛血清[FBS])。
在1000 rpm下离心3-4分钟,去除上清液,保留DMS53细胞。
用1-2 mL新鲜培养基将DMS53细胞重悬,确保细胞分散均匀。
将重悬后的DMS53细胞转移到培养瓶或培养皿中,加入约8 mL新鲜培养基。
将DMS53细胞置于37℃、5% CO₂的培养箱中过夜培养。
次日更换培养基,检查DMS53细胞的贴壁情况及生长状态。
DMS53细胞传代步骤
当DMS53细胞密度达到80%-90%时,可以进行传代操作。
弃去培养基后,用无钙镁的PBS冲洗DMS53细胞1-2次,去除残余培养液。
向培养瓶中加入1 mL胰蛋白酶-EDTA消化液(0.25%胰酶-0.53 mM EDTA),确保DMS53细胞表面被消化液均匀覆盖。
将培养瓶置于37℃培养箱中,观察1-2分钟,直至DMS53细胞变圆、开始脱落时,轻轻敲打瓶壁以加速脱落。
使用新鲜培养基终止消化,轻柔地将DMS53细胞吹打悬浮。
在1000 rpm下离心4分钟,去除上清。
用新鲜培养基重悬DMS53细胞,确保分散均匀。
将DMS53细胞悬液按1:2比例分到新的培养瓶或培养皿中,加入8 mL新鲜培养基。
将DMS53细胞置于37℃培养箱中继续培养,定期检查生长情况。
DMS53细胞冻存步骤
当DMS53细胞生长状态良好、细胞密度适中时,收集细胞进行冻存。
将DMS53细胞与培养液一起转移到无菌离心管中,在1000 rpm下离心4分钟。
弃去上清后,用PBS冲洗DMS53细胞并计数,确保细胞浓度在5×10⁶至1×10⁷/mL之间。
使用无血清冻存液将DMS53细胞悬浮,按细胞密度5×10⁶至1×10⁷/mL的标准配置。
将1 mL DMS53细胞悬液装入冻存管,做好标识。
将冻存管置于程序降温盒中,逐步降低至-80℃,通常在24小时后将DMS53细胞转移至液氮罐中长期保存。
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Amelogenin | X |
CSF1PO | 12 |
D2S1338 | 25 |
D3S1358 | 15 |
D5S818 | 10,11 |
D7S820 | 8,11 |
D8S1179 | 12 |
D13S317 | 10 |
D16S539 | 12,13 |
D18S51 | 15,16 |
D19S433 | 13 |
D21S11 | 33.2 |
FGA | 20 |
Penta D | 10 |
Penta E | 13 |
TH01 | 8,9.3 |
TPOX | 12 |
vWA | 15,17 |