
Hs888Lu细胞(人肺成纤维细胞)
- 来源:肺
- 细胞特征:贴壁细胞, 成纤维细胞样
- 培养基:DMEM+10%FBS+1% P/S
- 其他:分泌肺泡隔细胞外基质中重要成分,如III型胶原、弹性蛋白和蛋白多糖
Hs888Lu细胞是一株源自人类肺组织的成纤维细胞系,取材于一名20岁男性肺转移性骨肉瘤患者的正常肺组织。Hs888Lu细胞系属于有限传代细胞(非永生化),具有典型的贴壁生长特性,细胞形态多呈细长梭形。由于其能够合成和分泌肺泡间质的重要细胞外基质成分(如III型胶原、弹性蛋白及蛋白多糖),因此Hs888Lu细胞在肺部损伤修复及纤维化过程研究中具有重要应用价值。
Hs888Lu细胞特性特征
Hs888Lu细胞为成纤维细胞类型,表达典型的成纤维细胞标志物,如Vimentin(波形蛋白)阳性和Fibronectin(纤连蛋白)阳性。
Hs888Lu细胞能表达肺部纤维化及修复相关的蛋白,如胶原蛋白(Collagen)、纤连蛋白(Fibronectin)等,与细胞外基质合成和肺组织修复相关。
Hs888Lu细胞功能涉及肺部疾病过程中细胞增殖、迁移和纤维化的调控。
Hs888Lu细胞倍增时间约为40~72小时,适合体外长期稳定培养。
Hs888Lu细胞参数表
细胞名称 | Hs888Lu细胞(人肺成纤维细胞) |
别名 | Hs888Lu, HS888LU, Hs 888Lu |
来源 | 肺转移性骨肉瘤患者的正常肺组织 |
组织 | 肺 |
种属 | 人 |
性别/年龄 | 男;20岁 |
细胞类型 | 成纤维细胞 |
形态学 | 成纤维细胞样,长梭状,贴壁或悬浮生长 |
生长方式 | 贴壁生长或悬浮生长 |
生物安全等级 | BSL-1 |
倍增时间 | 约40~72小时 |
培养基 | DMEM高糖 + 15% FBS + 1% P/S |
培养条件 | 37℃,5% CO₂,95%空气 |
传代比例 | 1:2至1:4,首次传代建议1:2 |
换液频率 | 每周2-3次 |
冻存条件 | 90% FBS + 10% DMSO |
发货规格 | 活细胞:T25培养瓶1瓶或冻存管1支(约5×10^5细胞/冻存管) |
发货形式 | 活细胞常温运输;冻存管干冰运输 |
胰酶消化 | 0.25%-0.5% 胰酶,37℃,1-5分钟,血清终止作用 |
胶原酶消化 | 用于原代培养,温和,伤害小 |
EDA消化 | 0.02%作用于细胞间质,影响pH,需洗细胞 |
物理法和冷冻法 | 用于某些难消化细胞,减少损伤 |
标志物表达 | Vimentin阳性,Fibronectin阳性 |
基因表达 | 表达胶原蛋白、纤连蛋白等与肺纤维化和修复相关的分子 |
细胞功能 | 参与肺部纤维化、肺损伤修复、细胞增殖和迁移 |
纯度检测 | 免疫荧光染色验证,无病毒、支原体、细菌及真菌污染 |
保藏机构 | ATCC; ECACC; DSMZ等 |
使用限制 | 仅限科研用途 |
培养教程
Hs888Lu人肺成纤维细胞培养教程
Hs888Lu细胞复苏(Thawing)
从液氮罐中取出Hs888Lu细胞冻存管,立即置于37℃水浴中快速摇动解冻,时间控制在2分钟以内,避免细胞过热。
将解冻后的Hs888Lu细胞悬液转移到无菌离心管中,缓慢加入4倍体积的预热完全培养基(如DMEM/F12 + 10% FBS),轻轻混匀。
以1000 rpm离心3分钟,弃去上清液。用1–2 mL完全培养基重悬Hs888Lu细胞,轻轻吹打均匀。
将细胞接种至含适量培养基的培养瓶或培养皿中,放入37℃、5% CO₂培养箱培养。复苏后24小时观察Hs888Lu细胞贴壁情况,若贴壁率超过90%且形态正常,说明复苏成功。
3天后更换新鲜培养基,进入正常培养阶段。
Hs888Lu细胞传代(Subculture)
当Hs888Lu细胞的融合度达到80%–90%时,需进行传代操作。
弃去旧培养基,用PBS冲洗后加入0.25%–0.5%胰酶-EDTA(1–2 mL),37℃消化1–3分钟,随时在显微镜下观察Hs888Lu细胞的脱落情况。
当大部分Hs888Lu细胞收缩变圆但未完全漂浮时,立即加入等体积完全培养基终止消化。
收集Hs888Lu细胞悬液至离心管,1000 rpm离心3分钟,弃去上清,用完全培养基重悬形成单细胞悬液。
按1:2–1:4比例分至新培养瓶,加入新鲜培养基,继续于37℃、5% CO₂条件下培养。
Hs888Lu细胞冻存(Cryopreservation)
当Hs888Lu细胞生长状态良好并达80%融合时,可进行冻存。
消化、收集Hs888Lu细胞,离心弃去培养基。
使用预冷冻存液(90% FBS + 10% DMSO)重悬Hs888Lu细胞,浓度控制在(5–10) × 10⁵ 个/mL。
将悬液分装于冻存管,每管约1 mL,旋紧管盖,置于程序降温盒内,-80℃降温24小时以上。
最终将Hs888Lu细胞冻存管转入液氮罐中长期保存。
注意事项
Hs888Lu细胞在复苏时避免水浴液进入冻存管,以防污染。
全程保持无菌操作,必要时更换手套与口罩。
复苏后的Hs888Lu细胞需避免频繁离心和剧烈吹打,以保护细胞活性。
胰酶消化时间需灵活控制,避免Hs888Lu细胞过度消化受损。
换液应根据Hs888Lu细胞状态调整,一般每3天更换一次,以维持良好生长环境
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STR鉴定及相关
Amelogenin | X,Y |
CSF1PO | 10,11 |
D2S1338 | 19,20 |
D3S1358 | 16,18 |
D5S818 | 13 |
D7S820 | 7,11 |
D8S1179 | 14,16 |
D13S317 | 11,14 |
D16S539 | 8,12 |
D18S51 | 13,16 |
D19S433 | 13,14 |
D21S11 | 28,29 |
FGA | 21,23 |
Penta D | 13 |
Penta E | 13,19 |
TH01 | 9.3,10 |
TPOX | 8,11 |
vWA | 15,18 |
参考文献
- 兔网织红细胞与K-562细胞胞质杂交体(K-RRneo)核基质-中间纤维体系的研究 《实验生物学报》 1993年04期
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