
SK-NEP-1细胞(人肾母细胞瘤细胞)
- 来源:肾,肋膜渗出液
- 细胞特征:悬浮细胞, 圆形
- 培养基:McCoy’s 5A+15% FBS+1% P/S
- 其他:抗原表达:血型:A型;Rh因子:阳性(Rh+)
SK-NEP-1细胞系源自一位25岁白人女性的肾组织,取自肾母细胞瘤和胸膜渗出液。sknep1细胞系常用于研究尤文氏肉瘤,能在裸小鼠体内能够形成类似肾母细胞瘤的小细胞肿瘤。
形态与结构:SK-NEP-1细胞呈上皮样,圆形,具有少量微绒毛、连接复合体,以及发育良好的高尔基体和光滑内质网。细胞还含有脂滴,但无病毒颗粒。
SK-NEP-1细胞特性特征
染色体特征:(P12)低倍体至高倍体(+A1、+A2、+C、+D、+E、+F、+G),异常包括肢端部碎片、继发性收缩和大的亚着丝粒标记
抗原表达:血型:A型;Rh因子:阳性(Rh+)
同工酶表达:AK-1,1;ES-D,1;G6PD,B;GLO-I,2;Me-2,2;PGM1,1-2;PGM3,1
致瘤性:在裸小鼠身上形成与肾母细胞瘤一致的小细胞肿瘤
转移性:可在胸腔积液中发现转移性肿瘤细胞
SK-NEP-1细胞参数表
细胞名称 | SK-NEP-1细胞(人肾母细胞瘤细胞) |
细胞名称 | SK-NEP-1, SKNEP-1, SKNEP1, SKNEP |
物种 | 人 |
来源 | 肾脏、肋膜渗出液 |
患者信息 | 25岁;白人女性 |
细胞类型 | 肾母细胞瘤细胞 |
形态 | 上皮细胞样 |
生长特性 | 悬浮成团生长 |
培养基 | McCoy’s 5A+15% FBS+1% P/S |
培养条件 | 37°C, 5% CO2 |
传代比例 | 1:02 |
传代周期 | 3天 |
超微结构 | 微绒毛:细胞表面有少许微绒毛;连接复合物:存在;高尔基体:形态完整;内质网:多为光滑型; 脂滴:细胞内含有;病毒颗粒:无; |
抗原表达 | A型血;Rh+ |
同工酶 | AK-1,1; ES-D,1; G6PD,B; GLO-I,2; Me-2,2; PGM1,1-2; PGM3,1 |
致瘤性 | 在裸小鼠上形成小细胞肿瘤 |
转移性 | 可在胸腔积液中发现 |
污染检测 | 支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性 |
规格 | 5×100000cells/瓶 |
安全等级 | BSL-1 |
培养教程
SK-NEP-1人肾母细胞瘤细胞培养教程
传代步骤
观察SKNEP1细胞达到合适密度后,弃去培养基。
使用PBS轻轻冲洗SKNEP1细胞以去除残留血清。
加入适量的胰蛋白酶-EDTA溶液,在37°C孵育2-3分钟。
轻轻拍打培养瓶,帮助SKNEP1细胞脱落。
加入含血清的培养基终止胰蛋白酶消化作用。
以1:2或1:3的比例将SKNEP1细胞悬液转移至新的培养瓶中。
冻存和复苏
冻存步骤
收集SKNEP1细胞并离心。
使用90%培养基和10% DMSO的冻存液,缓慢降温至-80°C。
随后转移至液氮中长期保存。
复苏步骤
从液氮中取出SKNEP1细胞并快速解冻。
缓慢加入预热的培养基,以减缓温度骤变对SKNEP1细胞的冲击。
离心去除DMSO,重悬SKNEP1细胞并接种于新的培养瓶中。
常见问题及解决方案
细胞生长缓慢或停滞:检查SKNEP1细胞培养基成分是否充足,温度和CO2浓度是否稳定。
细胞形态异常:检查SKNEP1细胞是否有污染,或细胞传代是否过度。
培养基污染:遵循严格的无菌操作,定期更换SKNEP1细胞培养基。
细胞贴壁不良:可能需要优化SKNEP1细胞培养基或重置培养条件。
传代后存活率低:可能需要调整胰酶消化时间和复苏速度。
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STR鉴定及相关
Amelogenin | X |
CSF1PO | 10 |
D2S1338 | 19,20 |
D3S1358 | 14,15 |
D5S818 | 13 |
D7S820 | 8,10 |
D8S1179 | 12 |
D13S317 | 11 |
D16S539 | 11 |
D18S51 | 15,17 |
D19S433 | 12,14 |
D21S11 | 29,31 |
FGA | 24 |
Penta D | 11,12 |
Penta E | 7,18 |
TH01 | 8,9.3 |
TPOX | 8,11 |
vWA | 15,19 |
参考文献
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