
SNU-423细胞(人肝癌细胞)
- 来源:原发性肝细胞癌
- 细胞特征:贴壁细胞 ,上皮细胞样
- 培养基:1640+10% FBS+1% P/S
- 其他:SNU-423细胞系表达B型血抗原和Rh+抗原
SNU-423细胞是一株人肝细胞癌细胞系,由J.-G. Park及其团队于1990年从一名韩国患者的原发性肝细胞癌中提取。患者在接受了脂质醇联合阿霉素的经导管动脉栓塞治疗后,提取了肿瘤组织进行体外培养。SNU-423细胞最初使用添加5%热灭活胎牛血清的ACL-4培养基进行培养,后续在含10%热灭活胎牛血清的RPMI 1640培养基中维持。
SNU-423细胞具有非整倍体特性,模态染色体数为79。原发性肿瘤呈单发结节形态,组织学显示为小梁型结构,而在培养中可观察到多核细胞特征。SNU-423细胞在研究肝癌的生物学特性和药物反应方面具有重要的实验价值,为肝癌的基础研究及潜在治疗方法的开发提供了有力工具。
SNU-423细胞特性特征
抗原表达:B型血抗原、Rh+(Rh阳性)
乙型肝炎病毒(HBV)检测:Southern blot杂交检测显示存在HBV DNA,但HBV基因组RNA未表达。这表明SNU-423细胞可能与HBV感染相关,但并不活跃表达HBV基因组。
SNU-423细胞系广泛用于多种研究领域,包括:肝癌的生物学研究、药物敏感性测试、癌症治疗策略开发
SNU-423细胞参数表
细胞名称 | SNU-423细胞(人肝癌细胞) |
细胞别称 | SNU423; NCI-SNU-423 |
来源 | 韩国患者的原发性肝细胞癌;40岁男性患者,肿瘤为单结节状 |
建立时间 | 1990年由J.-G. Park及其团队建立 |
组织来源 | 肝脏 |
疾病类型 | 原发性肝细胞癌 |
细胞形态 | 上皮细胞样 |
生长特性 | 贴壁生长 |
倍增时间 | 24-48小时;每周2-3次传代 |
培养基 | RPMI-1640 + 10% FBS + 1% PS |
气体条件 | 95%空气;5% CO₂ |
温度条件 | 37℃ |
湿度条件 | 70%-80% |
传代比例 | 1:2 |
冻存条件 | 冻存液:90% FBS,10% DMSO;或使用非程序冻存液 |
质量控制 | 细菌、真菌、支原体、内毒素检测 |
抗原表达 | B型血;Rh+ |
分子特征 | 非整倍体(模态编号=79) |
组织学特征 | 小梁型;原发肿瘤伴有结节周围延伸 |
细胞特性 | 多核细胞 |
用途 | 癌症研究、药物敏感性测试;不可用于治疗或临床应用 |
培养教程
SNU-423人肝癌细胞培养教程
收到SNU423细胞后的处理
收到SNU423细胞后,首先检查培养瓶是否完好,观察是否有漏液或破损现象。如果发现任何异常,应立即拍照并联系供应商。
使用75%酒精擦拭SNU423细胞培养瓶的表面,进行消毒处理。
在显微镜下检查SNU423细胞的形态,确认其是否已贴壁。
将培养瓶静置于37℃培养箱中2-3小时,确保SNU423细胞适应环境。
弃去运输过程中的旧培养基,向培养瓶中加入6mL完全培养基(RPMI-1640培养基,含10%胎牛血清和1%双抗),并轻轻摇动均匀。
SNU423细胞复苏
将冻存的SNU423细胞悬液迅速置于37℃水浴中解冻,解冻过程中轻轻摇动冻存管,确保细胞均匀解冻。
解冻后,将SNU423细胞悬液加入4mL预热的完全培养基中,混合均匀。
以1000 RPM离心4分钟,弃去上清液,加入1-2mL预热的完全培养基后轻轻吹打,使SNU423细胞悬浮。
将SNU423细胞悬液转移至T25培养瓶或10cm培养皿中,加入适量培养基(约8mL),并在37℃、5% CO₂的培养箱中培养。
第二天更换新鲜培养基,并在显微镜下检查SNU423细胞的生长情况。
SNU423细胞传代
当SNU423细胞覆盖培养瓶底面积的80%-90%时,可进行传代。
弃去SNU423细胞的培养上清液,用无钙镁离子的PBS缓冲液清洗1-2次。
向培养瓶中加入1mL 0.25%胰酶-0.53mM EDTA混合溶液,并放置于37℃培养箱中,消化约1-2分钟。
在显微镜下观察,当SNU423细胞开始变圆并脱离培养表面时,轻轻敲击培养瓶边缘帮助细胞脱落,并加入适量完全培养基终止消化。
将SNU423细胞悬液以1000 RPM离心4分钟,弃去上清液,加入1-2mL新鲜完全培养基,轻轻吹打使SNU423细胞均匀悬浮。
按1:2比例分装至新的培养瓶中,并补充8mL完全培养基。
SNU423细胞冻存
当SNU423细胞生长状态良好、密度适中时,可进行冻存操作。首先弃去培养基,用PBS清洗一次。
加入1mL胰酶消化SNU423细胞,当细胞完全脱落后,加入1mL含血清的完全培养基终止消化。
将SNU423细胞悬液以1000 RPM离心4分钟,弃去上清液。
加入1mL完全培养基悬浮SNU423细胞,根据细胞密度加入足量培养基和DMSO(终浓度10%),确保细胞浓度不低于1×10⁶ cells/mL。
将1mL SNU423细胞悬液分装至每支冻存管中,并确保冻存管标记清楚。
将冻存管置于程序降温盒中,缓慢降温至-80℃,2小时后转移至液氮中长期保存。
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STR鉴定及相关
Amelogenin | X,Y |
CSF1PO | 11,12 (ATCC=CRL-2238; KCLB=00423; PubMed=25877200; PubMed=31378681) |
11,12,13 (Cosmic-CLP=909737) | |
D2S1338 | 19,24 |
D3S1358 | 17 (PubMed=25877200) |
17,18 (ATCC=CRL-2238; KCLB=00423) | |
D5S818 | 10 |
D7S820 | 12 |
D8S1179 | 11,16 |
D13S317 | 10,13 |
D16S539 | 9 |
D18S51 | 12,13 |
D19S433 | 14,16.2 |
D21S11 | 30 |
FGA | 21,24 |
Penta D | 9 |
Penta E | 11,12 |
TH01 | 6,9 (ATCC=CRL-2238; Cosmic-CLP=909737) |
9 (KCLB=00423; PubMed=25877200; PubMed=31378681) | |
TPOX | 8 |
vWA | 15 |
参考文献
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