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货号：STM-CL-5451 规格：1×10⁶cells/T25培养瓶或1mL冻存管
SNU475细胞（人肝癌细胞）
- 来源：肝癌
- 细胞特征：上皮细胞样，贴壁细胞
- 培养基：1640+10% FBS+1% P/S
- 其他：抗原表达：AB型血；Rh+
SNU-475细胞系于1990年从一位韩国患者的原发性肝细胞癌中提取，患者在细胞毒性治疗前提供了肿瘤组织样本。最初，这些细胞在含有5%热灭活胎牛血清的ACL-4培养基中培养，随后转移至补充10%热灭活胎牛血清的RPMI 1640培养基中进行长期培养。SNU-475细胞系在肝癌研究中具有重要的实验价值。
SNU475细胞特性特征
SNU-475细胞系为非整倍体，其模态编号为61。
SNU475细胞抗原表达为AB型血,Rh阳性。
原发肿瘤为巨大生长型,组织学类型主要为致密型和小梁型。
培养的SNU475细胞呈现多核表型。
SNU-475细胞系已验证为乙型肝炎病毒（HBV）DNA阳性，但未检测到HBV基因组RNA的表达。
SNU475细胞参数表
| 细胞名称 | SNU475细胞（人肝癌细胞） |
| 细胞别称 | SNU475; NCI-SNU-475 |
| 来源 | 1990年韩国肝癌患者的原发性肝细胞癌 |
| 细胞类型 | 人肝癌贴壁细胞系 |
| 细胞形态 | 上皮样 |
| 生长特性 | 贴壁生长 |
| 血型抗原 | AB型,Rh阳性 |
| 肿瘤类型 | 巨大生长型,致密型和小梁型 |
| 细胞特征 | 多核 |
| 病毒感染 | HBV DNA阳性, RNA阴性 |
| 常规培养基 | RPMI 1640,含10%胎牛血清 |
| 培养条件 | 37°C, 5% CO2 |
| 传代方法 | 胰酶-EDTA消化 |
| 传代比例 | 1:02 |
| 冻存密度 | 5×10^6~1×10^7 cells/mL |
| 冻存液 | 无血清冻存液 |
| 冻存方法 | -80°C 24h后转液氮 |
| 细胞活力 | 高 |
| 异质性 | 较高 |
| 应用领域 | 肝癌研究、药物筛选 |
| 保藏机构 | ATCC |
培养教程
SNU475人肝癌细胞培养教程
SNU475细胞复苏
将冷冻的SNU475细胞悬液冻存管在37℃水浴中迅速摇动解冻，避免过度加热导致SNU475细胞损伤。
解冻后，立即将SNU475细胞悬液转移至含有4 mL RPMI-1640培养基（补充10%胎牛血清）的离心管中，混合均匀。
以1000 rpm的速度离心3分钟，去除上清液以除去冷冻保护剂，确保SNU475细胞的活性。
用1-2 mL培养基重新悬浮SNU475细胞，轻轻吹打使细胞分散均匀。
将SNU475细胞悬液转移至培养瓶或10 cm培养皿中，加入适量的培养基（约8 mL），放置在37℃、5% CO2培养箱中培养过夜。
第二天更换新鲜培养基，并检查SNU475细胞的密度和状态。
SNU475细胞传代
当SNU475细胞覆盖面积达到80%-90%时，进行传代操作。
弃去培养基，用不含钙镁离子的PBS溶液洗涤SNU475细胞1-2次，以去除残留的血清和培养基成分。
加入1 mL消化液（0.25%胰蛋白酶和0.53 mM EDTA的混合溶液），确保消化液完全覆盖SNU475细胞单层。
弃去消化液，将培养瓶放入37℃培养箱中消化约1分钟。
观察SNU475细胞，待大部分细胞变圆并开始脱落时，轻轻敲打培养瓶，立即加入少量培养基终止消化。
加入6-8 mL培养基，将SNU475细胞悬液转移至无菌离心管中，1000 rpm离心4分钟，去除上清液。
将SNU475细胞按1:2的比例分配到新的培养瓶或培养皿中，加入8 mL新鲜培养基，继续在培养箱中培养。
SNU475细胞冻存
在SNU475细胞状态良好时，收集细胞并转移至无菌离心管中，1000 rpm离心4分钟，去除上清液。
用PBS溶液清洗SNU475细胞一次，去除残余的培养基，随后进行细胞计数。
按SNU475细胞计数加入无血清细胞冻存液，使细胞密度达到5×10^6至1×10^7/mL，混合均匀。
将1 mL SNU475细胞悬液分装至冻存管中，并做好标识。
将SNU475细胞冻存管先放置于-80℃冰箱中预冻24小时，然后转入液氮罐中长期储存。
注意事项
操作过程中应严格保持无菌条件，防止污染SNU475细胞。
定期监测SNU475细胞的生长情况，确保细胞处于良好状态。
在传代过程中，避免过度消化SNU475细胞，以免影响细胞的活力和生长能力。
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STR鉴定及相关
| Amelogenin | X,Y |
| CSF1PO | 11,12 |
| D2S1338 | 17,23 |
| D3S1358 | 14 |
| D5S818 | 10,13 |
| D7S820 | 7 (PubMed=25877200) |
| 7,12 (ATCC=CRL-2236; Cosmic-CLP=909739; KCLB=00475; PubMed=31378681) | |
| D8S1179 | 13,14 |
| D13S317 | 8,11 |
| D16S539 | 12 |
| D18S51 | 13 |
| D19S433 | 14.2 |
| D21S11 | 28,30 |
| FGA | 23 |
| Penta D | 9,12 |
| Penta E | 5,16 |
| TH01 | 7,9 |
| TPOX | 8,9 |
| vWA | 14 |
参考文献
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