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货号：STM-CL-5232 规格：1×10⁶cells/T25培养瓶或1mL冻存管
MKN-45细胞（人胃癌细胞）
- 来源：胃癌，肝转移
- 细胞特征：贴壁细胞 , 圆形/上皮细胞样
- 培养基：生长培养基：RPMI-1640＋10% FBS＋1% P/S
- 其他：MKN-45细胞表达野生型p53蛋白、c-met原癌基因扩增、E-钙粘蛋白(E-cadherin)启动子存在突变
MKN-45细胞系由Hojo H于1976年建立，源自日本一名62岁患有低分化胃腺癌女性患者的肝转移灶。该细胞系曾感染支原体，并通过MC-210处理成功消除。
MKN-45细胞在扫描电镜下显示为相当扁平的形态，细胞表面覆盖有大量微绒毛，细胞边缘存在长线状的细胞质突起，相邻细胞通过桥粒相连接。在光学显微镜下，MKN-45细胞呈圆形，表现为半贴壁半悬浮生长，有时会松散堆积。细胞排列不规则，生长中的细胞边缘不太清晰。
MKN-45细胞特性、基因表达等
分子特征:表达野生型p53蛋白、c-met原癌基因扩增、E-钙粘蛋白(E-cadherin)启动子存在突变
基因特征:p16CDKN2A/MTS1/INK4A基因纯合缺失、p15INK4B/MTS2基因纯合缺失
MKN-45细胞表现出正常及化生的胃粘膜表型、保持一定的分化能力
染色体数目为67~71
MKN-45细胞扫描电镜显示细胞表面有大量微绒毛、细胞边缘有长线状的细胞质突起、相邻细胞通过桥粒连接
MKN-45细胞为半贴壁半悬浮生长、生长过程中容易成团
MKN-45细胞适用于裸鼠荷瘤实验,可形成侵袭性生长的皮下肿瘤
MKN-45细胞参数表
| 细胞名称 | MKN-45细胞（人胃癌细胞） |
| 简称 | Human gastric cancer cell line ； MKN-45 |
| 组织来源 | 胃；腺癌细胞；低分化胃腺癌肝转移灶 |
| 建立信息 | 1976年由Hojo H建立，非ATCC细胞系 |
| 患者信息 | 62岁日本女性 |
| 细胞形态 | 圆形，上皮细胞样 / 细胞大小约15-20μm / 核质比约1:2 |
| 生长特性 | 半贴壁半悬浮 |
| 细胞表面/连接 | 大量微绒毛，长线状细胞质突起 / 相邻细胞通过桥粒连接 |
| 染色体数目/倍性 | 67~71 / 非整倍体 |
| 基因状态 | p53野生型，p16和p15缺失，c-met扩增，E-cadherin启动子突变 |
| 微卫星不稳定性 | MSI-L（低度微卫星不稳定） |
| 培养基 | RPMI-1640 / 10% FBS / 1% P/S |
| 培养环境 | 37°C，5% CO2，95%湿度，pH 7.2-7.4 |
| 传代/换液 | 比例1:3-1:4 / 2-3次/周 |
| 消化方法 | 0.25% 胰蛋白酶-EDTA，2-3分钟 |
| 倍增时间 | 约30-60小时 |
| 培养容器 | T25, T75, 6孔板, 96孔板等 |
| 冻存液/温度 | 55%基础培养基+40%FBS+5%DMSO / -196°C |
| 复苏方法 | 37°C水浴，快速解冻 |
| 鉴定/检测 | STR已通过，支原体/细菌/真菌/HIV-1/HBV/HCV阴性 |
| 体外实验 | 药物筛选，信号通路研究，基因功能研究，3D培养 |
| 体内实验 | 裸鼠荷瘤模型，可形成侵袭性生长的皮下肿瘤 |
| 上皮标记 | E-cadherin, EpCAM, CK8, CK18 |
| 胃癌标记 | CEA, CA19-9, MUC1 |
| 其他标记 | c-Met (高表达), VEGF, HER2 (低表达) |
| 药物敏感性 | 5-FU和顺铂中度敏感，紫杉醇低敏，多西他赛中敏 |
| 主要通路状态 | PI3K/AKT活化，MAPK部分活化，Wnt/β-catenin正常 |
| 代谢特征 | 葡萄糖消耗高；乳酸产生高；谷氨酰胺依赖性中； |
| 侵袭转移能力 | 体外迁移中等，侵袭强 ； 体内裸鼠肺转移能力中等 |
| 表面标记 | CD44阳性，CD133部分阳性 |
| 成球能力 | 成球能力中等 |
| γ射线敏感性 | 中度敏感 (D0: 约2Gy) |
| 培养注意点 | 易成团，消化需控制，用预处理培养皿，80-90%汇合度传代 |
| 血清批次效应 | 可能敏感，建议批次验证 |
| 安全等级 | BSL-2 |
| 专利状态 | 无相关专利限制 |
| 原始文献 | Hojo H. (1977). Niigata Igakkai Zasshi. 91:737-763. |
培养教程
MKN-45人胃癌细胞培养教程
细胞复苏
从液氮中快速取出冻存管，迅速放入37°C水浴中解冻。解冻后，将细胞悬液转移到预热的RPMI-1640培养基中。通过轻柔离心去除上清，用新鲜培养基重新悬浮细胞，并将其转移至培养瓶或培养皿中，放入预调好的培养箱中培养。
日常培养与传代
每2-3天更换一次培养基，观察细胞生长情况。当细胞密度达到80%-90%时，使用PBS轻轻冲洗细胞，加入适量0.25%胰蛋白酶-EDTA溶液进行消化。观察细胞在显微镜下变圆并开始脱落时，加入含血清的完全培养基终止消化。通过轻柔吹打使细胞充分脱落并分散，将其按照1:2或1:3的比例接种到新的培养瓶中。
特别注意事项与常见问题解决
生长特性： MKN-45细胞呈半贴壁半悬浮生长，易于形成细胞团簇，需要在传代过程中特别注意分散细胞。
消化时间控制： 消化时间通常控制在3-5分钟，以避免过度消化或不充分消化的问题。
轻柔操作： 操作过程中要轻柔，特别是在吹打过程中，避免过度吹打导致细胞碎片产生。
培养环境维护： 定期检查并校准培养箱的温度、CO2浓度和湿度，保持细胞的稳定生长环境。
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| Penta D | 10 |
| Penta E | 10 |
| TH01 | 7 |
| TPOX | 8 |
| vWA | 19 |
参考文献
- Accumulation of free complex-type N-glycans in MKN-7 and MKN-45 stomach cancer cells PMID: 18399796 DOI: 10.1042/BJ20071562
- 摘要：... free N-glycans were accumulated in the st...
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