
NCI-N87细胞(人胃癌细胞)
- 来源:胃;肝转移灶
- 细胞特征:贴壁细胞,上皮细胞样
- 培养基:RPMI-1640+10% FBS+1% P/S
- 其他:NCI-N87细胞系为myc阳性和erb-B2阳性,表面表达癌胚抗原(CEA)和TAG 72,但为左旋多巴脱羧酶(DDC)阴性。
NCI-N87是一种人胃癌细胞系,表现出上皮样形态,于1976年从一名男性胃癌患者的胃中(肝转移灶)分离。NCI-N87细胞系为近二倍体,64%的受检细胞中存在双微体(DM)。据报道,NCI-N87细胞的镀覆效率为4.3%。
NCI-N87细胞具有以下特性和特征
分子特征
表达表面糖蛋白癌胚抗原(CEA)和TAG 72
缺乏左旋多巴胺脱羧酶(DDC)活性
血管活性的肠肽(VIP)受体活性极低
缺乏胃泌激素受体
表达蕈毒碱胆碱受体
基因表达特征
不表达N-myc、L-myc、c-cis、IGF-2或胃泌激素释放肽基因
c-myc和c-erb-B2 RNA表达水平与其它细胞株相当
其他特征
生长特性:上皮细胞样、贴壁生长、倍增时间:约48-80小时
受体表达:表达乙酰胆碱受体,特别是蕈毒碱型受体
致瘤性:NCI-N87细胞在裸鼠中可形成肿瘤
NCI-N87细胞参数表
细胞名称 | NCI-N87细胞(人胃癌细胞) |
细胞 别称 | NCI-N87 [N87] ; NCI-N87 |
细胞类型 | 人 (Homo sapiens) ; 肿瘤细胞 ; 胃癌细胞 |
组织来源 | 男性胃癌,肝转移 |
形态生长特性 | 上皮细胞样; 贴壁生长 |
培养基 | RPMI-1640 + 10% FBS + 1% P/S |
培养条件 | 37°C,5% CO2 |
培养参数 | 推荐传代比例 1:2-1:3;推荐换液频率 2~3次/周;倍增时间 ~48-80小时 |
冻存条件 | 冻存液:55% 基础培养基 + 40% FBS + 5% DMSO,液氮保存 |
细胞解冻温度 | 37°C水浴,快速解冻 |
生物安全等级 | 1 |
致瘤性 | 在无胸腺裸鼠中可形成肿瘤 |
转移性 | 具有肝脏转移性 |
植板率 | 4.30% |
受体表达 | 表达蕈毒碱胆碱受体 |
分子标记 | 表达表面糖蛋白癌胚抗原(CEA)和TAG 72 |
酶活性 | 缺乏左旋多巴胺脱羧酶(DDC)活性 |
VIP受体活性 | 极低 |
胃泌素受体 | 缺乏 |
基因表达 | 阳性表达 c-myc, c-erb-B2;阴性表达 N-myc, L-myc, c-cis, IGF-2, 胃泌素释放肽 |
未扩增或重排基因 | N-myc, L-myc, myb, EGF受体基因 |
保藏机构 / 建系时间 | ATCC; CRL-5822 / 1976年 |
应用领域 | 胃癌研究,药物筛选,信号通路研究 |
培养教程
NCI-N87人胃癌细胞培养教程
NCI-N87细胞复苏步骤
在37°C水浴中预热完全培养基30分钟,以备NCI-N87细胞使用。
将冻存的NCI-N87细胞从液氮中取出,放入-80°C冰箱数分钟以过渡。
在37°C水浴中快速解冻NCI-N87细胞,时间约1-2分钟。
将解冻的NCI-N87细胞悬液转移到含有5 mL预热完全培养基的15 mL离心管中。
以1000 rpm离心5分钟,弃去上清。
用1 mL完全培养基重悬NCI-N87细胞。
将NCI-N87细胞悬液转移到培养瓶中,并补充适量的完全培养基。
将NCI-N87细胞置于37°C,5% CO2培养箱中培养。
NCI-N87细胞传代
传代比例:1:2至1:4
传代周期:5-7天
贴壁时间:由于NCI-N87细胞贴壁较慢,建议在复苏或传代后让细胞贴壁48小时再进行后续实验操作。
NCI-N87细胞换液频率
每周换液2-3次,以避免NCI-N87细胞过密生长和培养基pH值变化。
定期观察培养基颜色,如果变黄则表明pH值降低,需要及时更换培养基。
NCI-N87细胞培养的特殊注意事项
培养NCI-N87细胞时可能会有漂浮细胞和碎片,属正常现象。
换液时可轻轻吸除上层漂浮细胞和碎片,但避免完全去除,以免影响贴壁的NCI-N87细胞。
传代时可使用PBS轻轻冲洗NCI-N87细胞表面以去除大部分漂浮物。
NCI-N87细胞贴壁较慢,传代后需要足够时间贴壁。
可能观察到较大的"囊泡",这是NCI-N87细胞的特征之一。
NCI-N87细胞冻存
冻存液配方:95%完全培养液 + 5% DMSO
保存条件:建议使用液氮进行长期保存NCI-N87细胞。
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STR鉴定及相关
Amelogenin | X,Y |
CSF1PO | 8,12 |
D1S1656 | 16 |
D2S441 | 11,12 |
D2S1338 | 23,24 |
D3S1358 | 14 |
D5S818 | 12,13 |
D6S1043 | 12 |
D7S820 | 10,11 |
D8S1179 | 14,15 |
D10S1248 | 13 |
D12S391 | 16,21 |
D13S317 | 8,11 |
D16S539 | 9,13 |
D18S51 | 17 |
D19S433 | 14,14.2 |
D21S11 | 30 |
D22S1045 | 14,15 |
DYS391 | 10 |
FGA | 20,21 |
Penta D | 12 |
Penta E | 5 |
TH01 | 7,9 (PubMed=27102572) |
9 (AddexBio=C0023002/4674; ATCC=CRL-5822; CCRID; Cosmic-CLP=908461; Technion Genomics Center BCF; PubMed=25877200) | |
TPOX | 9,11 |
vWA | 15,16 |
参考文献
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