HGF-1细胞（人牙龈成纤维细胞）

HGF-1细胞是一种典型成纤维细胞形态的人牙龈成纤维细胞，于1989年从一位28岁白人男性的牙龈组织中分离。HGF1细胞在体外培养时具有合成胶原和弹性纤维的能力，是牙龈结缔组织中的主要细胞类型，对牙周组织的修复和保护起着关键作用。

HGF-1细胞系能够在体外增殖，研究显示在细胞衰老之前，可以经历22次的群体倍增。然而，群体倍增数（PDL）不同于通道数，建议在使用当前批次的细胞前，参考PDL分析证书。在经过冷冻保存后，HGF-1细胞在推荐的培养条件下还能经历4-5次群体倍增。

HGF-1细胞特性特征

• 生长因子刺激：HGF-1细胞对表皮生长因子（EGF）和血小板衍生生长因子（PDGF）敏感。

• 受体表达：HGF-1细胞表面存在缓激肽受体，其表观密度为每细胞22000个，解离常数（Kd）为1.2 nM。这些受体与磷脂酶C和A2以及钙通道效应器的信号通路相互作用，参与细胞信号转导。

• 细胞外基质合成：HGF-1细胞能够合成胶原蛋白和其他细胞外基质成分，这使其在牙周组织的修复和再生中具有重要作用。

• 缓激肽表达：HGF-1细胞能够表达缓激肽，参与调节细胞的生长和功能。

• 生长因子受体：HGF1细胞表面表达多种生长因子受体，能够响应外源性生长因子的刺激，促进细胞DNA合成和增殖。

• 细胞信号通路：HGF-1细胞与多条细胞信号通路相互作用，特别是在与生长因子相关的信号转导过程中，表现出高度的调节能力

HGF-1细胞参数表

HGF-1人牙龈成纤维细胞培养教程

HGF1细胞复苏

• 解冻步骤：

• 从液氮中迅速取出HGF1细胞冻存管，立即放入37℃水浴中，轻轻摇晃冻存管，直至管内冰晶完全融化（通常需要1-2分钟）。

• 使用75%酒精对冻存管外壁进行消毒，以确保无菌操作。

  
  

• 转移HGF1细胞：

• 将解冻后的HGF1细胞悬液转移至装有5 mL完全培养基的离心管中，轻轻混匀HGF1细胞悬液。

• 在1000 RPM下离心5分钟，弃去上清液，以除去DMSO和其他冻存介质。

  
  

• 重悬HGF1细胞：向HGF1细胞沉淀中加入4-6 mL完全培养基，轻轻吹打混匀HGF1细胞，确保均匀分散。

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• HGF1细胞培养：将HGF1细胞悬液转移至T25培养瓶中，并将培养瓶放入37℃、5% CO₂培养箱中培养，确保适宜的生长环境。

HGF1细胞传代

• 传代时机：当HGF1细胞生长至80-90%汇合时，应进行传代，以维持HGF1细胞的最佳状态。

  
  

• 传代步骤：

• 弃去HGF1细胞培养上清液，并用无菌PBS或生理盐水清洗HGF1细胞1-2次，去除残留的培养基成分。

• 加入1-2 mL 0.25%胰酶，使其均匀覆盖整个培养瓶底，室温孵育2-5分钟，观察HGF1细胞脱落情况。当HGF1细胞开始脱落时，立即加入等体积的完全培养基中和胰酶作用。

  
  

• 离心与重悬HGF1细胞：将HGF1细胞悬液转移至离心管中，1000 RPM离心5分钟，弃去上清液。加入适量的完全培养基重悬HGF1细胞，并充分混匀。

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• 转移至新培养瓶：将重悬后的HGF1细胞转移至新T25或T75培养瓶中，根据实验需求调整HGF1细胞密度（通常为1×10^4至1×10^5细胞/mL），并将培养瓶放入37℃、5% CO₂培养箱中继续培养。

注意事项

• 无菌操作：在HGF1细胞复苏、传代等操作过程中，必须严格遵守无菌技术，以防止HGF1细胞污染。

• 定期监控：定期观察HGF1细胞的生长状态，及时传代，避免HGF1细胞过度汇合，影响实验结果。

• HGF1细胞健康：在进行实验之前，确保HGF1细胞处于良好的状态，具有高细胞活力，确保实验的可重复性和可靠性。