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货号：STM-CL-5292 规格：1×10⁶cells/T25培养瓶或1mL冻存管
A427细胞（人肺癌细胞）
- 来源：肺
- 细胞特征：贴壁细胞 ，上皮细胞样
- 培养基：MEM（含NEAA）＋10% FBS＋1% P/S
A-427细胞系由Giard D.J. 建立，源自一位52岁白人男性肺癌患者的肿瘤组织。A427细胞系表现出上皮细胞样形态和贴壁生长特性，广泛用于肺癌尤其是肺腺癌的研究。
A427细胞参数表
| 细胞名称 | A427细胞（人肺癌细胞） |
| 细胞别称 | A-427; A427；人肺腺癌细胞系 |
| 来源 | 52岁肺癌男性白人患者； |
| 细胞特性 | 上皮细胞样，多角形；贴壁生长 |
| 培养基 | MEM + 10% FBS + 1% 青霉素/链霉素 |
| 培养环境 | 37°C；95% 空气 + 5% CO2；湿度70%-80% |
| 传代/换液 | 比例1:2-1:4；每周2-3次换液 |
| 倍增时间 | 约40-70小时或48-72小时 |
| 生物安全等级 | 1级 |
| 致瘤性 | 在裸鼠中可形成未分化的腺癌样肿瘤 |
| 冻存条件 | 90%血清+10%DMSO；液氮保存 |
培养教程
A427人肺癌细胞培养教程
细胞复苏
将A-427细胞冻存管从液氮中取出，迅速放入37°C水浴中快速解冻。
将解冻的A-427细胞悬液转移到含4 mL预热培养基的15 mL离心管中。
以1000 RPM离心4分钟，弃去上清。
用1 mL新鲜培养基重悬A-427细胞。
将A-427细胞悬液转移到含5 mL培养基的培养瓶中。
次日换液并检查A-427细胞密度。
细胞传代
当A-427细胞密度达80%-90%时进行传代。
弃去旧培养基，用PBS清洗A-427细胞1-2次。
加入适量胰酶，待A-427细胞变圆脱落。
加入2倍体积培养基终止消化。
以1000 RPM离心5分钟，弃去上清。
用新鲜培养基重悬A-427细胞。
按1:2到1:5的比例将A-427细胞分配到新的培养瓶中。
添加新鲜培养基至适当体积。
换液频率
每2-3天换液一次。
细胞冻存
收集处于良好生长状态的A-427细胞。
按上述步骤消化、离心A-427细胞。
用90%血清 + 10% DMSO的冻存液重悬A-427细胞。
将A-427细胞悬液分装到冻存管中，每管细胞数大于1×10^6个。
将冻存管置于程序降温盒中，放入-80°C冰箱至少2小时。
转移到液氮中长期保存。
注意事项
保持操作过程中的无菌环境。
定期检查A-427细胞形态和生长状况。
避免A-427细胞过度生长或密度过高。
定期进行支原体检测，确保A-427细胞未被污染。
传代比例对实验结果的影响
细胞密度和生长速度：
高传代比例（1:4）：A-427细胞密度较低，竞争减少，生长速度较快，但达到实验所需密度可能需要更长时间。
低传代比例（1:2）：A-427细胞密度较高，竞争增加，生长速度较慢，但更快达到实验所需密度。
细胞状态和活力：
高传代比例：低密度下生长，A-427细胞健康度和活力更高，但过于频繁的传代可能导致应激。
低传代比例：高密度下生长，可能导致营养竞争和废物积累，A-427细胞状态不佳，活力下降。
实验一致性：
一致的传代比例对于实验结果的可重复性至关重要。不同的传代比例可能导致A-427细胞生理状态变化，影响实验结果的一致性和可重复性。
温度条件对A-427细胞生长的影响
37°C（标准条件）：
A-427细胞生长最佳，增殖速度快，细胞形态正常，实验结果可靠。
低于37°C：
35°C：A-427细胞生长减慢，代谢活动下降，细胞可能进入休眠状态，长期培养可能导致状态不佳。
32°C：生长显著减慢，A-427细胞周期停滞，活力下降。
高于37°C：
39°C：A-427细胞生长速度加快，但可能导致应激和蛋白质折叠错误，长期培养可能导致细胞死亡。
41°C：A-427细胞生长受到严重抑制，细胞可能发生凋亡或坏死。
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STR鉴定及相关
| Amelogenin | X,Y |
| CSF1PO | 10,12 |
| D2S1338 | 17 |
| D3S1358 | 16 |
| D5S818 | 12 |
| D7S820 | 8,12 |
| D8S1179 | 12,13 |
| D13S317 | 11,12 |
| D16S539 | 11,13 |
| D18S51 | 12 |
| D19S433 | 13,14 |
| D21S11 | 31.2 |
| FGA | 18 |
| Penta D | 13 |
| Penta E | 15,17 |
| TH01 | 9 |
| TPOX | 8,11 |
| vWA | 17 |
参考文献
上一篇：WI-38细胞系（人胚肺细胞）
