
NCI-H2452人间皮瘤细胞
- 来源:间皮瘤患者肺组织;
- 细胞特征:贴壁细胞 , 上皮细胞样
- 培养基:生长培养基:RPMI-1640+10% FBS+1% P/S
- 其他:角蛋白免疫过氧化物酶染色呈阳性
NCI-H2452人间皮瘤细胞是一种从男性间皮瘤患者肺部分离出的具有上皮形态的细胞系,由美国国家癌症研究所(NCI)于1990年11月从一位男性非吸烟间皮瘤患者的肺部组织中分离建立。
NCI-H2452细胞呈现上皮样细胞以贴壁方式生长,具有角蛋白表达等典型间皮细胞特征,可能携带如CDKN2A/ARF缺失、NF2突变等间皮瘤相关基因改变。
NCI-H2452人间皮瘤细胞分子特征与基因特征
分子特征:角蛋白免疫过氧化物酶染色呈阳性,表明该细胞表达角蛋白,这是间皮细胞的一个典型特征。
基因特征:可能携带间皮瘤相关的基因突变或异常表达,如CDKN2A/ARF缺失、NF2突变等。
NCI-H2452人间皮瘤细胞参数表
细胞名称 | NCI-H2452人间皮瘤细胞 |
细胞别称 | NCI-H2452 [H2452]; H2452; H-2452; NCIH2452 |
细胞类型/形态 | 人间皮瘤细胞; 上皮细胞样; 贴壁生长 |
来源 | 胸膜间皮瘤; 男性; 成年; 非吸烟者; 肺 |
建立时间/收录机构 | 1990年11月; ATCC |
生物安全等级 | 1级 |
培养基/添加物 | RPMI 1640; 10% FBS; 1% P/S (青霉素/链霉素) |
培养条件 | 37℃; 5% CO2; 饱和湿度 |
换液周期 | 2-3天 |
培养基体积 | T25瓶:10-12ml;10cm皿:12-15ml |
传代比例 | 1:2-1:4 |
消化条件 | 胰酶; 37℃; 严格控制时间(细胞贴壁较弱) |
离心条件 | 900rpm, 3-5min |
冻存液配方 | 92% FBS + 8% DMSO 或 92% 完全培养基 + 8% DMSO |
冻存密度/体积 | 200-300万/ml; 1ml/管 |
程序降温 | 4℃静置5-10min → -20℃静置2h → -80℃过夜 → 液氮 |
细胞鉴定/染色 | STR鉴定正确; 角蛋白免疫过氧化物酶染色阳性 |
应用 | 可用于3D细胞培养 |
培养特点 | 培养时可能出现黑点; 细胞贴壁较弱 |
操作建议 | 严格控制消化时间; 吹打细胞时轻柔,避免产生过多气泡 |
质量控制 | 冻存后及时复苏一管检查活性 |
培养教程
NCI-H2452人间皮瘤细胞培养教程
NCI-H2452细胞复苏
解冻: 从液氮中取出冻存管,迅速置于37℃水浴中解冻。
转移: 将NCI-H2452细胞悬液转移到含有预热完全培养基的离心管中。
离心: 以900rpm离心3-5分钟。
重悬: 弃去上清,用完全培养基重悬NCI-H2452细胞。
培养: 将NCI-H2452细胞悬液转移到培养瓶中,置于培养箱中培养。
日常培养
换液周期: 每2-3天更换一次培养基。
培养基体积: T25瓶使用10-12ml,10cm培养皿使用12-15ml。
观察: 定期观察NCI-H2452细胞的生长状态,注意可能出现的黑点。
NCI-H2452细胞传代
达到密度: 当NCI-H2452细胞密度达到80-90%时进行传代。
洗涤: 弃去旧培养基,用PBS轻轻冲洗NCI-H2452细胞1-2次。
消化: 加入适量胰酶,37℃消化(NCI-H2452细胞贴壁较弱,需严格控制消化时间)。
观察: 每隔2-3分钟观察一次NCI-H2452细胞状态,当细胞间隙变大、细胞趋于圆形但未完全脱落时,立即终止消化。
终止消化: 加入等体积完全培养基终止消化。
离心: 以900rpm离心3-5分钟。
重悬: 弃去上清,用新鲜完全培养基重悬NCI-H2452细胞。
接种: 按1:2到1:4的比例将NCI-H2452细胞接种到新的培养瓶中。
注意事项
操作: 操作时轻柔吹打NCI-H2452细胞,避免产生过多气泡。
观察: 定期观察NCI-H2452细胞形态和生长状态,保持无菌操作以预防污染。
消化时间: 严格控制NCI-H2452细胞的消化时间,避免过度消化。
NCI-H2452细胞冻存
冻存液: 使用92% FBS + 8% DMSO或92% 完全培养基 + 8% DMSO作为冻存液。
细胞密度: 调整至200-300万/ml。
分装: 每管分装1ml NCI-H2452细胞悬液。
程序降温:4℃静置5-10分钟;-20℃静置2小时;-80℃过夜;转入液氮长期保存
培养中的常见问题
黑点: 培养时NCI-H2452细胞可能出现黑点较多的情况。
贴壁较弱: NCI-H2452细胞贴壁较弱,容易脱落。
相关资料
STR鉴定及相关
Amelogenin | X,Y |
CSF1PO | 11,12 |
D2S1338 | 20 |
D3S1358 | 17 |
D5S818 | 11,12 |
D6S1043 | 11,12 |
D7S820 | 9,11 |
D8S1179 | 10 |
D12S391 | 17.3,21 |
D13S317 | 12 |
D16S539 | 11,13 |
D18S51 | 15 |
D19S433 | 13 |
D21S11 | 28,32.2 |
FGA | 23 |
Penta D | 9 |
Penta E | 12,15 |
TH01 | 6,9.3 |
TPOX | 8,11 |
vWA | 17,18 |
