
ncih441细胞(人肺腺癌细胞)
- 来源:肺部乳头状腺癌患者心包液;
- 细胞特征:贴壁细胞 , 上皮细胞样
- 培养基:生长培养基:RPMI-1640+10% FBS+1% P/S
- 其他:细胞系可用于ISO 17025认证实验室的测试和校准,并在检测验证或实施过程中建立灵敏度、线性和特异性
NCI-H441是源自男性肺部乳头状腺癌患者的细胞系,由A.F. Gazdar、M. Brower和D. Carney等人于1982年建立。ncih441细胞系是从患者的心包液中分离获得的。
NCI-H441是一种超二倍体人类细胞系。其模式染色体数为52,但具有53个染色体计数的细胞也以高频率出现。所有细胞共有14条以上的标记染色体,某些细胞还有额外的染色体变异。具有较高倍性的细胞比例为4.9%。NCI-H441细胞携带KRAS基因突变(p.G12V c.35G>T)。
NCI-H441细胞能在半固体琼脂糖中形成克隆。
NCI-H441细胞具有以下特性和特征
分子特征:表达肺泡表面活性蛋白A(SP-A)的mRNA和蛋白质;细胞质中存在多层体和类似于clara细胞颗粒的结构;能够表达肺表面活性蛋白B(SP-B);
生长特征:呈上皮细胞样形态,主要以贴壁方式生长;在有血清培养基中倍增时间为58小时,在无血清培养基中倍增时间为99-138小时;能在半固体琼脂糖中形成克隆;
功能特征:作为人类II型肺泡细胞模型,可用于研究氧化应激和炎症反应;可作为转染宿主表达肺表面活性蛋白(SP-B)
应用特征:广泛用于研究人类肺腺癌中中间丝蛋白表达模式的变化;在ISO 17025认证实验室中用于测试和校准;作为ISO 17034认证流程生产的认证参考物质。
NCI-H441细胞参数表
细胞名称 | ncih441细胞(人肺腺癌细胞) |
细胞别称 | NCI-H441;H441; H-441; NCI-H441-4; NCI-441; NCIH441 |
细胞类型 | 人肺腺癌细胞 |
来源 | 肺乳头状腺癌患者的心包液 |
患者性别 | 男性 |
建立信息 | 1982年由A.F. Gazdar, M. Brower, D. Carney 等建立 |
细胞库编号 | ATCC: HTB-174, CRM-HTB-174; BCRC: 60455 |
细胞形态 / 大小 | 上皮细胞样 / 约15-20μm(待确认) |
生长方式 | 主要贴壁生长,部分细胞呈圆形浮动或松散附着 |
细胞质特征 | 含多层体和类似clara细胞颗粒的结构 |
倍增时间 | 有血清:58小时;无血清:99-138小时 |
克隆形成能力 | 能在半固体琼脂中形成克隆 |
培养基 | RPMI-1640 + 10%胎牛血清 + 1%双抗(青霉素/链霉素) |
培养环境 | 37°C, 5% CO2, 70-80%湿度 |
传代信息 | 比例1:2到1:4,每3-4天传代 |
最佳接种密度 | 2-4 x 10^4 cells/cm^2 |
培养瓶类型 | T-25, T-75, T-150 |
表面活性蛋白 | 表达SP-A的mRNA和蛋白质,可表达SP-B(作为转染宿主) |
迁移能力 | 中等(相对于其他肺癌细胞系) |
侵袭能力 | 低到中等(相对于其他肺癌细胞系) |
药物敏感性 | 对顺铂、紫杉醇等常见化疗药物的IC50值(待补充) |
转染方法 | 脂质体转染、电穿孔等 |
冻存液 / 温度 | 90%血清,10% DMSO / -80°C(短期),液氮(长期) |
复苏后存活率 | >80%(待确认) |
研究用途 | 肺癌研究、药物筛选、基因功能分析 |
特殊应用 | 人类II型肺泡细胞模型,研究氧化应激和炎症反应 |
认证用途 | ISO 17025认证实验室测试和校准;ISO 17034认证参考物质 |
污染检测 | 支原体检测阴性 |
pH耐受范围 | 7.0-7.4(最佳) |
温度敏感性 | 37°C最佳,32-39°C可存活 |
抗氧化应激能力 | 中等(相对于正常肺上皮细胞) |
同工酶 | AK-1,1;ES-D,1;G6PD,B;GLO-I,2;Me-2,1;PGM1,1;PGM3,1 |
培养教程
ncih441人肺腺癌细胞培养教程
NCI-H441细胞解冻
准备完整无菌的培养基。
从-80°C冰箱取出细胞,立即放入37°C水浴中缓慢解冻。
转移解冻后的NCI-H441细胞到预先准备好的培养基中。
细胞种植
解冻后进行洗涤,去除有害物质。
进行细胞计数,以确定NCI-H441细胞的存活率和数量。
平均分配细胞到培养瓶中,确保每个瓶子中NCI-H441细胞数量相近。
添加足够的培养基,通常为6-8mL(对于T25瓶)。
细胞传代
当NCI-H441细胞密度达到70%-80%时进行传代。
首次传代建议T25培养瓶1:2传代。
正常传代比例为1:2到1:4,每3-4天传代一次。
细胞冻存
冻存液配方:90%血清,10% DMSO。
将NCI-H441细胞悬浮在冻存液中,缓慢降温并最终保存在-80°C(短期)或液氮(长期)中。
细胞生长特性
在有血清培养基中,NCI-H441细胞的倍增时间约为58小时。
在无血清培养基中,倍增时间延长至99-138小时。
能在半固体琼脂糖中形成克隆结构。
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STR鉴定及相关
Amelogenin | X,Y |
CSF1PO | 11,12 |
D2S441 | 14 |
D2S1338 | 17,19 |
D3S1358 | 18 |
D5S818 | 11,12 |
D6S1043 | 17 |
D7S820 | 10 |
D8S1179 | 8,14 |
D12S391 | 19.3 |
D13S317 | 9 |
D16S539 | 9,13 |
D18S51 | 18,19 |
D19S433 | 14 |
D21S11 | 32.2 |
FGA | 24,25 |
Penta D | 10,12 |
Penta E | 12 |
TH01 | 9.3 |
TPOX | 8,10 |
vWA | 17 |
参考文献
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