NCI-H292细胞系【人肺癌细胞(淋巴结转移)】

NCI-H292细胞系源自肺粘液表皮样癌（也称为肺粘液上皮样癌）的淋巴结转移，最初从一名32岁的黑人女性患者的淋巴结转移部位分离。
NCI-H292细胞具有上皮细胞样的形态，呈贴壁生长，并在亚显微结构上保留了粘膜上皮细胞的特征。NCI-H292细胞对乙型肝炎病毒（HBV）具有易感性，能够支持HBV的生长。

NCI-H292细胞是一个染色体计数接近二倍体的人类细胞系。模式染色体数目为47，出现在36%的细胞中。倍体计数较高的细胞率为3.9%。大多数细胞共有12个标记。其中包括del（1）（q32.1）、der（5）t（5；13）（p15.33；q11）、i（5p）、der⑴t（1；？）（p34.3；？）和der（6）t（6；7）（p25.3；q21.2）。所有标记物均以单拷贝形式存在于每个细胞中。正常的N1和N6缺失。有两条正常的X染色体。未发现其他异常。

NCI-H292细胞系具有以下分子、表达和基因特征：

• 分子特征：保留了粘膜上皮细胞的特性，在亚显微结构上表现出这一特点；表现出多种鳞状上皮分化标记；

• 表达特征：角蛋白（Keratin）表达阳性、波形蛋白（Vimentin）表达阳性、黏液洋红（Mucicarmine）染色呈阳性、神经丝三联蛋白（Neurofilament triplet protein）表达阴性；

• 与HLA特异性的人同种异体抗血清的反应性：（A1；A3；A10；A19；B12；B17；B22；和B40交叉反应基团）
  

• 基因特征：左旋多巴脱羧酶（L-DOPA decarboxylase）表达阴性；对乙型肝炎病毒（HBV）具有高度感染性，可用于研究HBV相关基因在病毒性肝炎和肝癌发生中的作用；

• NCI-H292细胞能够在裸小鼠体内形成肿瘤
  

NCI-H292细胞系参数表

NCI-H292人肺癌细胞系培养教程

NCI-H292细胞复苏操作

• 将水浴锅预热至37°C。

• 快速解冻NCI-H292细胞，约1-2分钟。

• 将细胞悬液转移到含15ml预热完全培养基的50ml离心管中。

• 以1000rpm离心5分钟，弃去上清液。

• 用5ml完全培养基重悬NCI-H292细胞。

• 将细胞悬液转移到T25培养瓶中。

• 置于37°C、5% CO2培养箱中培养。

NCI-H292细胞换液

• 频率： 每2-3天换液一次。

• 方法： 吸出旧培养基，加入预热的新鲜完全培养基。

NCI-H292细胞传代

• 时机： 当NCI-H292细胞密度达到80-90%时进行传代。

• 比例： 1:2 至 1:4。

• 步骤：

• a. 吸出培养基，用PBS洗涤NCI-H292细胞1-2次。

• b. 加入适量0.25%胰蛋白酶-EDTA溶液，37°C消化3-5分钟。

• c. 显微镜下观察NCI-H292细胞变圆并开始脱落。

• d. 加入含血清的完全培养基终止消化。

• e. 以1000rpm离心5分钟，弃去上清液。

• f. 用新鲜完全培养基重悬NCI-H292细胞。

• g. 按所需比例将NCI-H292细胞接种到新的培养瓶中。

注意事项

• 操作过程中保持NCI-H292细胞无菌条件。

• 使用前将培养基、PBS等预热至37°C。

• 避免NCI-H292细胞过度消化。

• 定期检查NCI-H292细胞培养是否有污染。

• 建议使用低代数NCI-H292细胞（<20代）。

NCI-H292细胞冻存

• 密度： 1-5 x 10^6 cells/ml。

• 冻存介质： 90% 完全培养基 + 10% DMSO。

• 冻存方法： 缓慢降温后转入-80°C冰箱或液氮中长期保存。

NCI-H292细胞安全注意事项

• 生物安全等级： BSL-2，需要在生物安全柜中操作。

• 个人防护： 操作时需穿戴实验服、手套等个人防护装备。

• 废弃物处理： NCI-H292细胞培养废液和接触过NCI-H292细胞的耗材需要进行灭菌处理后再丢弃。

• 避免接触： 操作过程中避免直接接触NCI-H292细胞或培养液，防止意外感染。

• 无菌操作： 严格遵守无菌操作规程，避免污染。

• 细胞来源： 注意NCI-H292细胞来源于人体肿瘤组织，可能携带未知病原体。

• 细胞鉴定： 定期进行STR鉴定，确保NCI-H292细胞系纯度。

• 记录保存： 详细记录NCI-H292细胞培养过程和处理方法。

• 仅用于研究： NCI-H292细胞仅限于科学实验研究使用，不得用于其他目的。