货号：STM-CL-5265 规格：1×10⁶cells/T25培养瓶或1mL冻存管

nci-h460细胞（人大细胞肺癌细胞）

来源：肺；转移灶：肋膜渗出癌；大细胞肺癌
细胞特征：贴壁细胞 , 上皮细胞样
培养基：生长培养基：RPMI-1640＋10% FBS＋1% P/S
其他：NCI-H460细胞表达的p53 mRNA水平与正常肺细胞相当，且未显示出DNA结构异常

Tags：肺癌细胞

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NCI-H460细胞系是1982年由A.F. Gazdar从一位男性大细胞肺癌患者的胸腔积液（胸水）中分离，来源于肺癌的转移灶，而非原发肿瘤。

NCI-H460细胞是亚三倍体，通常显示模态染色体数为57条，偶尔会出现58条。其染色体组成复杂，包括多种标记染色体，如der(9)t(1;9)(q21;p24)、der(7)t(9)(p11;p22)、t(10q14q)、der(16)t(7;16)(q11.23;q22)，以及一个小环和其他两条标记染色体。高倍性频率为1.7%。NCI-H460细胞具有正常的X和Y染色体拷贝，但9号、7号和16号染色体每个细胞只有一个拷贝。

NCI-H460细胞具有以下分子、表达和基因特征

p53表达：NCI-H460细胞表达的p53 mRNA水平与正常肺细胞相当，且未显示出DNA结构异常。
蛋白表达：角蛋白和波形蛋白纤维染色呈阳性；神经丝三联体蛋白染色呈阴性
同工酶：表现出AK-1, 1; ES-D, 1; G6PD, B; GLO-I, 1-2; Me-2, 1; PGM1, 1; PGM3, 1的模式
NCI-H460细胞在裸小鼠身上表现出明显的致瘤性

nci-h460细胞参数表

细胞名称	nci-h460细胞（人大细胞肺癌细胞）
细胞别称	NCI-H460; NCI.H460; H460; H-460; NCIH460; NCI-HUT-460; NCI-460
组织来源	人肺；转移灶：肋膜渗出癌；大细胞肺癌
细胞类型	肿瘤细胞
建系信息	1982年由A.F. Gazdar建立
生长形态	贴壁细胞；上皮细胞样
培养条件	37°C, 5% CO2, 95% 空气
推荐培养基	90% RPMI-1640 + 10% FBS
传代比例	1:3-1:4
换液频率	2-3次/周
倍增时间	约23-60小时
染色体	通常57条，偶尔58条（亚三倍体）；复杂核型，包括多种标记染色体
蛋白表达	p53表达与正常肺细胞相当；角蛋白和波形蛋白纤维阳性；神经丝三联体蛋白阴性
生物安全等级	BSL-1
致瘤性	在裸鼠中有致瘤性
冻存条件	55% 基础培养基 + 40% FBS + 5% DMSO，液氮保存
支原体检测	阴性
同工酶模式	AK-1, 1; ES-D, 1; G6PD, B; GLO-I, 1-2; Me-2, 1; PGM1, 1; PGM3, 1
保藏机构	ATCC; HTB-177 / DSMZ; ACC-737
研究领域	肺癌研究、药物筛选、信号通路研究、p53相关研究

培养教程

nci-h460人大细胞肺癌细胞培养教程

细胞复苏

从液氮中取出冻存NCI-H460细胞后，快速在37°C水浴中解冻（1-2分钟）。
离心并弃上清，用预热的完全培养基重悬细胞，并转移到培养瓶中培养。

细胞传代

建议传代比例为1:3-1:4，当NCI-H460细胞融合度达到80-90%时进行传代。
使用PBS轻洗细胞后，加入适量胰蛋白酶-EDTA消化液，37°C消化2-3分钟，终止消化后再次离心并用新鲜完全培养基重悬细胞。

换液频率

推荐每周2-3次换液，首次换液时保留一半原培养液，加入一半新鲜培养液。

细胞冻存

冻存液配方：55%基础培养基 + 40% FBS + 5% DMSO
细胞密度：约5 x 10^5 cells/ml
分装细胞悬液到冻存管中，过夜置于-80°C，次日转移至液氮中长期保存。

注意事项

NCI-H460细胞为贴壁生长，呈上皮细胞样形态，其倍增时间约为23-60小时，根据实际情况调整传代时间。
定期进行支原体检测，确保NCI-H460细胞无污染。
使用STR鉴定方法确认NCI-H460细胞身份。

STR鉴定及相关

Amelogenin	X,Y
CSF1PO	11,12
D1S1656	11,14.3
D2S441	11,11.3
D2S1338	17,25
D3S1358	15,18
D5S818	9,10
D7S820	9,12
D8S1179	12
D10S1248	13
D12S391	21
D13S317	13
D16S539	9
D18S51	13,15
D19S433	14
D21S11	30
D22S1045	17
DYS391	11
FGA	21,23
Penta D	11,13
Penta E	5
TH01	9.3
TPOX	8
vWA	17