SPC-A1细胞（人肺腺癌细胞）

SPC-A1细胞系是一种常用于研究肺癌发病机制及抗肿瘤药物效果的细胞株。SPC-A1细胞系来源于人类肺腺癌，具有典型的上皮细胞形态，并以贴壁方式生长。

SPC-A1细胞特性

• SPCA1细胞中葡萄糖调节蛋白78（GRP78）的表达量较高，在多种肺癌细胞株中（如A549、H3255和SPCA1），SPCA1细胞的GRP78表达量最高

• 长期缺氧条件下，SPCA1细胞中缺氧诱导因子-1α（HIF-1α）的表达增加；谷胱甘肽转移酶π（GST-π）在长期缺氧条件下表达增加

• SPCA1细胞中存在具有癌症干细胞特征的细胞亚群
  

• 长期缺氧可增加SPCA1细胞对阿霉素的耐药性，但对丝裂霉素的敏感性没有显著影响
  

• 下调GRP78表达可增加SPCA1细胞对吉西他滨的敏感性

SPC-A1细胞参数表

SPC-A1人肺腺癌细胞培养教程

SPC-A1细胞复苏

• 将冻存的SPC-A1细胞管在37℃水浴中快速解冻。

• 加入4 mL 预热的完全培养基，轻轻混匀。

• 以1000 RPM离心4分钟，弃上清。

• 用1-2 mL 新鲜培养基重悬SPC-A1细胞。

• 将细胞悬液转移到培养瓶或培养皿中，并加入适量培养基。

• 将培养瓶置于37℃、5% CO2培养箱中培养过夜。

日常培养

• 每2-3天更换一次SPC-A1细胞的培养基。

• 当SPC-A1细胞密度达到80%-90%时，进行传代。

传代步骤

• 吸出旧培养液。

• 用2 mL PBS轻轻冲洗SPC-A1细胞。

• 加入1 mL 0.25% 胰蛋白酶溶液（含EDTA）。

• 将细胞置于37℃培养箱中消化，直至SPC-A1细胞变圆并出现间隙。

• 加入3 mL 含血清的培养基终止消化。

• 轻轻吹打使SPC-A1细胞脱壁并形成单细胞悬液。

• 以1200 RPM离心3分钟，弃上清。

• 用新鲜培养基重悬SPC-A1细胞。

• 按1:2至1:4的比例接种到新培养瓶中。

传代频率

• 每周2次，根据SPC-A1细胞的生长情况调整。

SPC-A1细胞冻存

• 使用55% 基础培养基 + 40% FBS + 5% DMSO的冻存液。

• 将SPC-A1细胞悬液分装到冻存管中。

• 缓慢降温后转移到液氮中长期保存。

注意事项

• 进行无菌操作，避免SPC-A1细胞污染。

• 定期检查SPC-A1细胞的形态和生长状况。

• 避免细胞过度生长或密度过高。

• 在使用前进行支原体检测，确保SPC-A1细胞未被污染。

细胞污染检测方法

• 形态学观察：使用显微镜观察SPC-A1细胞形态。正常SPC-A1细胞应呈现典型的上皮细胞样形态。如发现形态异常或不明颗粒，可能存在污染。

• 支原体检测：定期进行SPC-A1细胞的支原体检测。正常SPC-A1细胞应为支原体阴性。可采用PCR、ELISA或荧光染色等方法。

• STR分析：进行短串联重复序列（STR）分析，比对SPC-A1细胞的基因指纹。SPC-A1细胞有特定的STR谱型，与已知谱型不符可能表明交叉污染。

• 生长特性观察：监测SPC-A1细胞的生长速度和传代频率。生长速度的突然变化可能指示污染。

• 培养基颜色变化：观察培养基颜色变化。异常变化（如变浑浊或变黄）可能表示SPC-A1细胞污染，如细菌或真菌污染。

• HeLa细胞污染检测：由于SPC-A1细胞可能被HeLa细胞污染，可进行HeLa细胞标记物检测。可以使用PCR或免疫组化方法检测HeLa特异性标记物。

• 微生物培养：取少量SPC-A1细胞培养上清液进行细菌和真菌培养，以检测是否有微生物生长。

• 定期质量控制：建立定期的SPC-A1细胞质量控制程序，包括形态学检查、生长曲线分析和基因表达谱分析等。