
HFF细胞(人包皮成纤维细胞) (暂不提供)
- 来源:包皮
- 细胞特征:贴壁细胞 , 成纤维细胞样
- 培养基:DMEM+10% FBS+1% P/S
- 其他:在皮肤再生和修复等方面的研究中,HFF细胞被用作构建皮肤组织的基础细胞
HFF细胞(人包皮成纤维细胞)来源于出生不超过1个月的男性婴儿包皮组织,是一种有限细胞系,广泛应用于生物医学研究。HFF细胞系通过从包皮组织中分离并培养成纤维细胞而建立,保留了成纤维细胞的典型特征。HFF细胞在基础生物学研究、药物筛选、细胞生物学实验以及组织工程等领域有广泛应用,特别是在皮肤再生和修复研究中具有重要的应用价值。HFF细胞系还常用于支持胚胎干细胞的生长和维持其未分化状态。
HFF人包皮成纤维细胞参数表
细胞名称 | HFF细胞(人包皮成纤维细胞) |
细胞来源 | 出生1月内男性婴儿的包皮组织 |
细胞类型 | 成纤维细胞 |
细胞性质 | 有限细胞系 |
细胞形态 | 成纤维细胞样,贴壁生长 |
细胞直径 | 10-20微米 |
细胞纯度 | ≥98% |
培养基 | DMEM+10% FBS+1% P/S |
培养条件 | 气相:空气,95%;CO2,5% 温度:37℃ |
传代比例 | 1:2-1:4 |
传代频率 | 细胞密度达80%-90%时进行传代 |
换液频率 | 每2-3天一次 |
冻存液 | 冻存液:55%基础培养基+40% FBS+5% DMSO 温度:液氮 |
生长特性 | 贴壁生长 |
细胞代数 | 通常在10代以内使用 |
支原体检测 | 阴性 |
主要标志物 | 细胞外基质成分(胶原蛋白、纤维连接蛋白) |
基因表达特征 | 表达成纤维细胞特征基因(COL1A1、FAP等) |
研究方向 | 基础生物学、干细胞研究、药物筛选、组织工程 |
特殊应用 | 皮肤再生和修复研究 |
培养教程
HFF人包皮成纤维细胞培养教程
HFF细胞复苏
配制适当的培养基,推荐使用DMEM(高糖型)添加15%胎牛血清(FBS)和抗生素(如青霉素-链霉素),以支持HFF细胞的生长。
取出冻存的HFF细胞,将冻存管快速放入37°C水浴中解冻,时间控制在1-2分钟内,轻轻摇晃冻存管以加速HFF细胞的解冻。
解冻后,立即将HFF细胞悬液(约1 mL)转移至含有4 mL培养基的无菌离心管中,轻轻混匀。
在1000 rpm下离心3分钟,弃去上清液,保留HFF细胞沉淀。
将HFF细胞沉淀重悬于1-2 mL新鲜培养基中,轻轻吹打使HFF细胞分散。
将HFF细胞悬液转移至培养瓶或10 cm培养皿中,加入适量培养基(如8 mL),并在37°C、5% CO2培养箱中培养过夜。
第二天换液,去除残余的DMSO和死细胞,同时检查HFF细胞的贴壁情况和生长状态。
随后根据HFF细胞的密度和状态定期更换培养基。
HFF细胞传代
当HFF细胞的汇合度达到80%-90%时,可进行传代操作。
先用不含钙、镁离子的PBS缓冲液轻轻冲洗HFF细胞1-2次,去除残留的培养基和细胞碎片。
加入适量消化液(如0.25%胰蛋白酶-EDTA溶液),确保消化液覆盖HFF细胞表面。
在显微镜下观察消化情况,当HFF细胞开始变圆并轻微脱落时,轻敲培养瓶壁,迅速加入含有FBS的培养基终止消化。
消化后的HFF细胞悬液转移至无菌离心管中,1000 rpm离心4分钟,弃去上清液。
将HFF细胞重悬于1-2 mL培养基中,轻轻吹打均匀后,按1:2的比例分装至新的培养皿或瓶中,继续在37°C、5% CO2条件下培养。
HFF细胞冻存
收集并处理达到传代标准的HFF细胞,将细胞悬液转移至无菌离心管中,1000 rpm离心4分钟,弃去上清液。
用PBS清洗HFF细胞一次,离心后弃去PBS,并进行HFF细胞计数。
根据HFF细胞计数结果,加入无血清冻存液,使HFF细胞浓度达到5×10^6至1×10^7个/mL,轻轻混匀。
将HFF细胞悬液分装至冻存管中,标记好日期和HFF细胞信息。
将冻存管放入-80°C冰箱中进行初步冻存,24小时后将冻存管转移至液氮罐中进行长期保存。
注意事项
所有操作应在无菌条件下进行,以避免HFF细胞污染。
定期观察HFF细胞的生长状态,及时更换培养基,以确保HFF细胞的活力。
传代时应控制HFF细胞的传代比例和时间,避免HFF细胞过度传代导致性状变化。
相关资料
STR鉴定及相关
Amelogenin | X,Y |
CSF1PO | 10,12 |
D2S1338 | 22 |
D3S1358 | 15,16 |
D5S818 | 9,15 |
D7S820 | 8,11 |
D8S1179 | 12,16 |
D13S317 | 8,12 |
D16S539 | 11,13 |
D18S51 | 13,15 |
D19S433 | 13,14 |
D21S11 | 29,31 |
FGA | 22 |
TH01 | 7,9 |
TPOX | 9,11 |
vWA | 17,19 |
参考文献
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