
M14细胞系(人黑色素瘤细胞系) (暂不提供)
- 来源:无色素性黑色素瘤;右臀部;皮下
- 细胞特征:贴壁细胞 , 上皮细胞样
- 培养基:DMEM+10% FBS+1% P/S
- 其他:M14细胞通常表达黑色素细胞特有的标志物,如黑色素合成酶(Tyrosinase)和MITF(微小黑色素细胞转录因子)
M14人黑色素瘤细胞系是从一名33岁男性患者的无色素性黑色素瘤中分离建立的,该肿瘤位于患者右臀皮下。M14细胞株的建立来自于手术切除的皮肤肿瘤组织,在黑色素瘤研究中具有重要价值,特别是在药物筛选和肿瘤生物学特性研究方面。
M14细胞系参数表
细胞名称 | M14细胞系(人黑色素瘤细胞系) |
细胞来源 | M14-MEL; UCLA-SO-M14; UCLASOM14; UCLA-SO-14; Melanoma14; M-14 |
种属来源 | 人 |
年龄/性别 | 33岁/男性 |
组织来源 | 皮肤(右臀皮下的无色素性黑色素瘤) |
细胞形态 | 上皮细胞样 |
生长特性 | 贴壁生长 |
细胞代数 | 10代以内 |
倍增时间 | ~26.3小时 |
培养基 | 90% DMEM + 10% FBS + PS |
培养条件 | 95%空气 + 5% CO2;温度:37°C |
传代密度 | 80%-90%时进行传代 |
传代比例 | 首次传代建议1:2 |
冻存条件 | 冻存液:55%基础培养基+40% FBS+5% DMSO 温度:液氮 |
支原体检测 | 阴性 |
病原体检测 | HIV、乙型肝炎、丙型肝炎均为阴性 |
运输方式 | 复苏发货或干冰冷冻发货 |
安全性 | 需在二级生物安全台内操作 |
特别说明 | 仅供科学研究之用 |
培养操作 | 细胞收货后需立即转入液氮冻存或直接复苏 |
培养教程
M14人黑色素瘤细胞系培养教程
M14细胞的复苏
迅速将冻存管放入37°C水浴中,轻轻摇晃,直至M14细胞完全融化(约1-2分钟)。
将融化的M14细胞转移至含有10毫升预热培养基的离心管中。
以1000 rpm离心5分钟,去除冻存液。
将沉淀的M14细胞用5毫升预热培养基重悬,轻轻吹打均匀。
将重悬的M14细胞转移至培养瓶中,最终体积为10-15毫升。
M14细胞的传代
当M14细胞生长至80%-90%汇合时进行传代。
用PBS(磷酸盐缓冲液)洗涤M14细胞以去除培养基。
加入0.25%胰酶消化液,37°C孵育2-5分钟,观察M14细胞脱落情况。
加入等体积的培养基中和胰酶。
以1000 rpm离心5分钟,去除消化液。
用适量培养基重悬M14细胞,接种至新的培养瓶中。
M14细胞的冻存
使用含有10% DMSO(冷冻保护剂)的培养基。
将M14细胞离心后重悬于冻存液中,细胞浓度为1 x 10^6 cells/ml。
将M14细胞分装至冻存管中,逐渐降温至-80°C,随后转移至液氮中储存。
M14细胞培养速度对实验结果的影响
M14细胞的增殖速率:
M14细胞的倍增时间约为26.3小时,这意味着在适宜的培养条件下,细胞数量会迅速增加。快速增殖的M14细胞能够在短时间内提供足够的细胞量用于实验,尤其是在药物筛选和毒性测试中。
实验一致性:
M14细胞的生长状态和密度会影响实验的结果。例如,细胞过度拥挤可能导致细胞间相互作用的改变,从而影响药物的作用效果。因此,保持适当的细胞密度(通常在80%-90%汇合时传代)是确保实验一致性的关键。
M14细胞活性:
M14细胞培养速度过快或过慢都可能导致细胞活性下降。细胞在不适宜的条件下生长(如温度、pH值、营养物质不足等)会导致M14细胞代谢异常,进而影响实验结果的解读。
信号通路的变化:
不同的生长速率可能导致M14细胞内信号通路的激活或抑制。例如,快速增殖的M14细胞可能会激活某些与生长相关的信号通路,而这些变化可能会影响药物反应或基因表达的结果。
相关资料
STR鉴定及相关
Amelogenin | X |
CSF1PO | 11 |
D1S1656 | 11,12 |
D2S441 | 11,14 |
D2S1338 | 19,24 |
D3S1358 | 14,16 |
D5S818 | 11,12 |
D7S820 | 8,10 |
D8S1179 | 13 |
D10S1248 | 14 |
D12S391 | 18,19 |
D13S317 | 12 |
D16S539 | 9,13 |
D18S51 | 13,17 |
D19S433 | 14,15 |
D21S11 | 30 |
D22S1045 | 15 |
FGA | 21 |
SE33 | 15,22 |
TH01 | 6,7 |
TPOX | 8,11 |
vWA | 16,18 |