
BIU-87细胞(人膀胱癌细胞)
- 来源:膀胱癌
- 细胞特征:贴壁细胞 , 上皮细胞样
- 培养基:1640+10% FBS+1% P/S
- 其他:凝集反应:对ConA、WGA、PSL均有反应
BIU-87细胞系是由俞莉章等研究人员于1989年建立,来源于一位男性膀胱癌患者的膀胱乳头状移行上皮癌。
BIU-87细胞的群体倍增时间为34小时,并能够在软琼脂中生长。BIU-87细胞系主要用于研究膀胱癌的生物学特性和药物抗性,特别是在癌症研究领域。
BIU-87细胞特性特征
克隆形成能力:BIU87细胞能够在软琼脂上生长,克隆形成率为23%。
BIU87细胞以0.2 mL的接种体积,将约5×10^8个细胞注射至裸鼠皮下,表现出明显的进行性肿瘤生长特征。
凝集反应:对ConA、WGA和PSL等有凝集反应,显示出特定的细胞表面特征。
潜在污染:根据EXPASY细胞库的信息,BIU87细胞系可能存在错误识别或污染的情况,似乎被非人细胞污染(PubMed=2616706),使用时需谨慎。
BIU-87细胞参数表
细胞名称 | BIU-87细胞(人膀胱癌细胞) |
别称 | BIU87 |
种属来源 | 人类 |
组织来源 | 膀胱乳头状移行上皮癌 |
建立信息 | 1989年俞莉章等 |
细胞形态 | 上皮细胞样 |
生长特性 | 贴壁生长 |
倍增时间 | 约34小时(22代群体) |
克隆形成率 | 23%(在软琼脂上生长) |
凝集反应 | 对ConA、WGA、PSL均有凝集反应 |
生物安全等级 | 1 |
支原体检测 | 阴性 |
培养基 | RPMI-1640 + 10% FBS + 1% P/S |
推荐传代比例 | 1:2 - 1:3 |
推荐换液频率 | 2 - 3次/周 |
冻存条件 | 冻存液:55%基础培养基 + 40% FBS + 5% DMSO;储存于液氮中 |
培养条件 | 温度:37℃,气相:95%空气 + 5% CO2 |
保藏机构 | KCB; KCB 2006103YJ |
应用领域 | 膀胱癌生物学特性研究、药物抗性研究、细胞增殖与凋亡实验 |
培养教程
BIU-87人膀胱癌细胞培养教程
BIU-87细胞复苏
从液氮罐中取出冻存的BIU-87细胞管,迅速将其置于37℃的水浴中,轻轻摇动,直至BIU-87细胞完全解冻。
准备4 mL预热的RPMI-1640培养基(含10%胎牛血清FBS和1%青霉素/链霉素P/S),以便复苏BIU-87细胞。
将解冻后的BIU-87细胞悬液小心转移到含有4 mL培养基的离心管中,轻轻混匀以减少BIU-87细胞的损伤。
以1000 RPM离心4分钟,弃去上清液。
加入1-2 mL新鲜培养基,轻轻吹打以使BIU-87细胞均匀分散。
将BIU-87细胞悬液转移到培养瓶中,或将其分布在10 cm培养皿中,并添加约8 mL培养基。将BIU-87细胞置于37℃、5% CO2的培养箱中培养过夜。
第二天观察BIU-87细胞状态,若BIU-87细胞密度达到80%-90%,即可进行传代。
BIU-87细胞传代培养
准备不含钙、镁离子的PBS溶液和消化液(0.25%胰蛋白酶与0.53 mM EDTA的混合溶液),以便传代BIU-87细胞。
弃去培养瓶中的BIU-87细胞培养基,用PBS润洗BIU-87细胞1-2次以去除残留的培养基。
向培养瓶中加入1 mL消化液,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,直至BIU-87细胞大部分变圆并开始脱落。
轻轻敲击培养瓶壁,随后加入少量培养基中和胰蛋白酶的作用。
将BIU-87细胞悬液转移至离心管中,以1000 RPM离心4分钟,弃去上清液。
加入1-2 mL新鲜培养基,轻轻吹打混匀BIU-87细胞。
将BIU-87细胞悬液按1:2的比例分配至新的培养瓶中,补加8 mL培养基,继续在37℃、5% CO2环境中培养。
BIU-87细胞冻存
待BIU-87细胞生长良好,达到80%-90%汇合时,可进行BIU-87细胞冻存准备。
弃去培养基,用PBS洗涤BIU-87细胞,加入1 mL胰蛋白酶消化液,待BIU-87细胞变圆脱落后,立即加入含10% FBS的培养基终止消化。
以1000 RPM离心4分钟,弃去上清液。
加入适量的FBS,将BIU-87细胞重悬至适当密度(一般为1×10^6 BIU-87细胞/mL),随后加入DMSO使其终浓度达到10%。
每支冻存管分装1 mL BIU-87细胞悬液,做好标识后,将BIU-87细胞冻存管放入程序降温盒中,置于-80℃冰箱中预冻2小时后转入液氮中长期保存。
研究应用与注意事项
凝集反应的研究:
BIU-87细胞对凝集素ConA、WGA和PSL有反应,这一特性可用于BIU-87细胞特性的鉴定,特别是在膀胱癌的生物学研究中,有助于分析BIU-87细胞的黏附性、迁移能力及侵袭性。
药物筛选与抗性研究:
通过观察BIU-87细胞在药物处理后的凝集反应变化,可以评估药物对BIU-87细胞增殖和生存的影响,进而用于潜在抗癌药物的筛选。
分子机制探索:
研究BIU-87细胞的凝集反应,有助于揭示BIU-87细胞表面糖蛋白与糖脂的相互作用,以及这些分子在肿瘤微环境中的作用。
无菌操作:
在进行所有BIU-87细胞实验操作时,应确保无菌条件,以避免BIU-87细胞污染。
定期检查细胞状态:
经常观察BIU-87细胞生长状况,及时进行BIU-87细胞传代和BIU-87细胞冻存,以保持BIU-87细胞活性和实验一致性。
相关资料
STR鉴定及相关
参考文献
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