
ECV304细胞(人膀胱癌细胞)
- 来源:膀胱癌
- 细胞特征:贴壁细胞,上皮细胞样
- 培养基:RPMI-1640+10% FBS+1% P/S
- 其他:ECV304细胞的特性与膀胱癌细胞(如T24细胞)相似
ECV304细胞系来源于人脐静脉内皮细胞(HUVEC)自发转化而来,通过深入的基因组分析,发现ECV304细胞系与T24膀胱癌细胞系在基因上高度一致,证实被膀胱癌细胞污染。ECV304细胞被重新归类为膀胱癌细胞系,而不是内皮细胞系。ECV304细胞最早源自一名82岁男性患者的膀胱癌组织,广泛用于膀胱癌的相关研究中。
ECV304细胞(人膀胱癌细胞)参数表
细胞名称 | ECV304细胞(人膀胱癌细胞) |
别称 | ECV 304; ECV304; ECV; E304; T24(ECV304) |
细胞类型 | 人膀胱癌细胞系(污染自人脐静脉内皮细胞) |
细胞形态 | 上皮细胞样,贴壁生长 |
来源 | 一名82岁男性患者的膀胱癌组织 |
基因特征 | 与T24膀胱癌细胞系基因相同 |
培养基成分 | DMEM(高糖) + 10% 胎牛血清 + 1% 青霉素-链霉素 |
培养条件 | 37℃,5% CO₂ |
细胞密度 | 1×10^6 细胞/T25培养瓶 |
支原体检测 | 阴性 |
细胞生长状况 | 生长良好,形态正常 |
运输条件 | 冰袋避光发货 |
注意事项 | 使用时应注意无菌操作,避免污染 |
冻融注意 | 冻融后可能有少量絮状物析出,但不影响正常使用 |
应用领域 | 膀胱癌研究、药物筛选、细胞生物学研究 |
细胞特性 | 表达肿瘤相关抗原和生长因子受体 |
培养教程
ECV304人膀胱癌细胞培养教程
细胞复苏步骤
细胞解冻: 从液氮罐中取出冻存的ECV304细胞管,并立即置于37℃的水浴中迅速解冻,直至细胞悬液完全融化。
细胞转移: 使用无菌移液管,将融化后的细胞悬液缓慢移入含有10 ml预热培养基的15 ml离心管中。
细胞离心: 以200×g的速度离心5分钟,弃去上清液。
细胞重悬: 使用5 ml新鲜培养基重悬细胞,然后将细胞悬液接种到T25培养瓶中,并加入足够的培养基,使总体积达到10 ml。
细胞培养: 将培养瓶置于37℃、5% CO₂的培养箱中进行培养。
细胞传代步骤
细胞汇合状态: 当细胞贴壁生长至80-90%汇合时,弃去旧的培养基,用PBS溶液冲洗细胞1-2次。
消化细胞: 加入2-3 ml 0.25%胰酶-EDTA溶液,并在37℃孵育2-3分钟,直至细胞脱落。
终止消化: 加入5 ml培养基终止消化反应,并轻轻吹打以使细胞悬浮均匀。
细胞离心: 以200×g的速度离心5分钟,弃去上清液。
细胞重悬与传代: 用5 ml新鲜培养基重悬细胞,并按1:3或1:4的比例接种到新的培养瓶中。根据细胞密度,加入适量培养基。
细胞培养: 将培养瓶置于37℃、5% CO₂的培养箱中继续培养。
细胞培养周期与注意事项
培养周期: ECV304细胞的培养周期通常为2-3天,具体周期取决于细胞的生长状态和密度。在细胞生长至80-90%汇合时,应进行传代。复苏后的细胞通常需要约24小时的适应期,之后进入正常的生长阶段。
传代频率: 细胞状态应每2-3天检查一次,确保在达到适宜的汇合度时及时传代。
生长条件: ECV304细胞在适宜的培养条件下生长迅速,形态稳定,表现出良好的细胞分裂与增殖速度。
培养基更换: 培养基应每2-3天更换一次,以保证细胞的生长环境清洁。
无菌操作: 传代和培养过程需严格遵循无菌操作规范,避免细胞污染。
细胞冻存: 使用含10% DMSO的冻存液进行细胞冻存,以确保细胞的长期保存。
相关资料
STR鉴定及相关
Amelogenin | X |
CSF1PO | 12 |
D2S1338 | 20,23 |
D3S1358 | 16 |
D5S818 | 10 |
D7S820 | 10,11 |
D8S1179 | 10,14 (DSMZ=ACC-310) |
14 (CLS=300452; PubMed=11416159) | |
D13S317 | 12 |
D16S539 | 9 |
D18S51 | 16,18 |
D19S433 | 13,14 |
D21S11 | 29 |
FGA | 17,22 |
Penta D | 11,15 |
Penta E | 7,10 |
TH01 | 6 |
TPOX | 8,11 |
vWA | 17 |
参考文献
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