TCCSUP膀胱癌细胞

TCCSUP是一种源自67岁女性IV级移行细胞癌患者的膀胱组织的细胞系。TCCSUP细胞系显示上皮样形态，并以贴壁方式生长，广泛应用于癌症研究。TCCSUP细胞系具有亚四倍体的染色体特征，其中包括第12和35代标记染色体。

TCCSUP膀胱癌细胞特性特征

• 超微结构：存在微绒毛、含有脂质体、未观察到桥粒

• 抗原表达：HLA-2, 3, 7, 12

• 同工酶表达：AK-1，1-2；ES-D，1；G6PD，B；GLO-I，1-2；Me-2，1；PGM1，2；PGM3，1

• 转移潜能：原始患者后来发现骨髓转移，能具有较高的转移潜能。
  

• 临床相关性：患者在切除肿瘤前有4个月的血尿病史，与膀胱癌的典型临床表现一致。

TCCSUP膀胱癌细胞参数表

TCCSUP膀胱癌细胞培养教程

收货处理

• 观察TCCSUP细胞的状态，确认细胞健康。
  

• 用75%酒精消毒容器表面。

• 将T25瓶放置于37°C培养箱中2-4小时，稳定细胞状态。

• 收到TCCSUP细胞后，立即将其转入液氮冻存或进行复苏处理。

TCCSUP细胞复苏

• 预热水浴锅至37°C。
  

• 准备好新鲜培养基和培养器皿。

• 从液氮中取出冻存管，并立即放入37°C水浴中迅速融化（约1-2分钟）。
  

• 用75%酒精消毒冻存管外表面。

• 在无菌条件下，将TCCSUP细胞悬液转移至含10ml预热培养基的离心管中。

• 以1000rpm离心5分钟，弃去上清。

• 重新悬浮细胞于新鲜培养基中，转移至培养器皿中。

TCCSUP细胞传代培养

• 传代密度: TCCSUP细胞密度达到80%-90%时进行传代。

• 传代比例: 通常建议1:2传代（例如，一个T25瓶的TCCSUP细胞分至两个T25瓶或两个6cm培养皿）。

• 弃去培养上清，并用不含钙镁的PBS洗涤细胞。
  

• 加入适量的胰蛋白酶消化液，置于37°C培养箱中消化1-2分钟。

• 轻轻敲打培养瓶，帮助细胞脱落。

• 加入培养基终止消化，轻轻吹打以确保TCCSUP细胞完全悬浮。

• 将细胞悬液按1:2比例分装至新的培养器皿中，并加入新鲜培养基。

TCCSUP细胞冻存步骤

• 准备工作:配制冻存液：基础培养基 + 5% DMSO + 20% FBS

• 细胞达到适当密度后，按传代步骤收集TCCSUP细胞。
  

• 以1000rpm离心5分钟，弃去上清。

• 将细胞重新悬浮于冻存液中，分装至冻存管中。

• 将冻存管置于程序降温盒中，放置于-80°C冰箱中过夜。

• 次日，将冻存管转移至液氮中进行长期保存。

注意事项

• 无菌操作: 在整个培养、传代和冻存过程中，严格遵守无菌操作规程，防止TCCSUP细胞污染。

• 细胞观察: 定期观察TCCSUP细胞的形态和生长状态，及时更换培养基和进行传代。

• 安全注意: TCCSUP细胞仅用于科学研究，不得用于临床治疗或动物实验。

TCCSUP细胞在培养过程中需监测的参数

• 细胞形态: 定期检查TCCSUP细胞是否保持上皮样形态，确保无异常变化。

• 细胞密度: 监测TCCSUP细胞密度，确保在80%-90%时进行传代。

• 培养基颜色和pH: 观察培养基颜色变化，及时更换培养基，保持pH值在7.2-7.4范围内。

• 细胞增殖情况: 记录TCCSUP细胞倍增时间，确保细胞增殖速率正常。

• 污染检测: 定期进行支原体和细菌检测，确保TCCSUP细胞培养环境无污染。

• 温度和气体环境: 确保培养箱内温度维持在37°C，气体环境为95%空气和5% CO₂。

• 细胞活力: 使用台盼蓝染色法或其他细胞活力检测方法，定期评估TCCSUP细胞活力。