UM-UC-3细胞（人膀胱移行细胞癌细胞）

UM-UC-3细胞系是源自一名男性膀胱移行细胞癌患者的膀胱组织，UMUC3细胞是膀胱癌的肌层浸润性细胞系。

UM-UC-3细胞系是超三倍体的，模式染色体数为80，约42%的细胞显示此特征。部分细胞具有78条染色体的特征也较为常见，且倍性较高的细胞占比达到2.5%。每个细胞通常含有30条或更多的标记染色体，包括但不限于der（1）t（1；？）（p32；？）、t（1p5p）、i（3q）、t（7q14q）以及t（2p3p）等。此外，X和N3染色体在每个细胞中各有一份，而其他染色体则常以两至三个拷贝存在。

致瘤性：在皮下接种10（7）个细胞的裸鼠中形成肿瘤，肿瘤在21天内以100%的频率（5/5）发展。

UM-UC-3细胞参数表

UM-UC-3人膀胱移行细胞癌细胞培养教程

• 准备工作：预热培养基至37°C、准备0.25% 胰蛋白酶-EDTA溶液。

• 细胞消化：吸去旧的培养基、使用PBS轻轻冲洗UMUC3细胞。

• 添加适量的0.25% 胰蛋白酶-EDTA溶液，37°C孵育2-3分钟，观察UMUC3细胞开始脱落。

  
  

• 终止消化：

• 添加含10% FBS的培养基以终止消化。

• 轻轻吹打细胞悬液，使UMUC3细胞完全脱落。

  
  

• 细胞收集：

• 将细胞悬液转移至离心管中，1000 rpm离心5分钟。

• 吸去上清，加入新鲜培养基重悬UMUC3细胞。

  
  

• 细胞接种：

• 按所需传代比例（1:2至1:3）接种UMUC3细胞至新培养瓶中。

• 加入适量培养基（T25瓶中添加6-8 mL，T75瓶中添加15 mL）。

• 培养：将培养瓶置于37°C、5% CO2的培养箱中继续培养UMUC3细胞。

UMUC3细胞冻存方法

• 准备工作：预冷冻存液（基础培养基 + 5% DMSO + 10% FBS或20% FBS）至4°C。

• 细胞收集：按传代方法步骤1-4收集UMUC3细胞。

• 细胞重悬：用预冷的冻存液重悬UMUC3细胞，细胞密度约为1-2 × 10^6 cells/mL。

• 分装：将细胞悬液分装到冻存管中，每管1 mL。

• 程序降温：将冻存管放入程序降温盒中，以-1°C/min的速度降温至-80°C。

• 长期储存：将冻存管转移至液氮气相中进行长期保存UMUC3细胞。

UMUC3细胞复苏步骤

• 解冻：将冻存管从液氮中取出，立即放入37°C水浴中快速解冻，轻轻摇动。

  
  

• 接种：

• 解冻后，将UMUC3细胞悬液转移至含10 mL培养基的离心管中，1000 rpm离心5分钟。

• 吸去上清，加入新鲜培养基重悬UMUC3细胞。

  
  

• 培养：

• 将细胞悬液接种至培养瓶中，添加适量培养基。

• 将培养瓶放置于37°C、5% CO2培养箱中继续培养UMUC3细胞。

保持UMUC3细胞培养基的新鲜度

• 现配培养基：

• 尽量现配UMUC3细胞培养基，避免长时间储存。配好的培养基应在两周内使用完毕，因为某些成分（如叶酸）在长时间储存中会分解。

• 小批量配制UMUC3细胞培养基以减少浪费。

  
  

• 储存条件：

• 配制好的UMUC3细胞培养基应储存在4°C冰箱中，避免反复冻融。

• 对于光敏感成分，应使用遮光瓶或将瓶子包裹在铝箔中储存。

  
  

• 无菌操作：

• 在无菌条件下配制和分装UMUC3细胞培养基，使用无菌过滤器（0.22μm）过滤以去除可能的污染物。

• 使用无菌容器储存UMUC3细胞培养基，防止二次污染。

  
  

• 定期更换：

• 即使UMUC3细胞培养基没有变黄，也应每2-3天更换一次，以保证细胞获得足够的新鲜营养。

• 换液时，轻轻侧过培养瓶/皿，避免细胞飘起，用巴氏吸管轻轻吸取部分上清弃去，然后补加等体积的新鲜UMUC3细胞培养基。

  
  

• 使用前预热：

• 使用前将UMUC3细胞培养基预热至37°C，以避免对细胞的温度冲击。

  
  

• 添加剂的稳定性：

• 某些添加剂如抗生素、非必需氨基酸应在使用前新鲜加入UMUC3细胞培养基中，避免长期储存导致活性下降。

  
  

• 培养基标记：

• 每次配制UMUC3细胞培养基时，在瓶子上标记配制日期和有效期，确保在有效期内使用。