
SCaBER细胞(人膀胱鳞癌细胞)
- 来源:膀胱;鳞癌
- 细胞特征:贴壁细胞 , 上皮细胞样
- 培养基:MEM+10% FBS+1% P/S
- 其他:SCaBER细胞含有不常见的葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(G6PD)A型同工酶,是一种罕见的生化标记
SCaBER细胞系来源于一名58岁白人男性膀胱鳞状细胞癌的组织。SCaBER细胞呈现出上皮样的形态特征,并且通过贴壁方式生长,常用于癌症研究。
SCaBER细胞系的核型为2n=46,属于亚三倍体。细胞群中有9.2%的2S成分,常见标记染色体包括t(1;?)del(1)(p13)、t(3;?)、i(4q)等。SCaBER细胞系中至少有一条Y染色体可被检测到。细胞未发现均匀染色区域(HSR)或双分钟(DM)。
SCaBER细胞特性特征
SCaBER细胞呈现上皮样细胞形态、贴壁生长;
SCaBER细胞在裸鼠体内可诱发表皮样癌;
同工酶类型:AK-1,1;ES-D,1;G6PD,A;GLO-I,1-2;Me-2,2;PGM1,1-2;PGM3,1-2;
特殊同工酶: SCaBER细胞含有不常见的葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(G6PD)A型同工酶,是一种罕见的生化标记,增加了SCaBER细胞的特异性和研究价值。
SCaBER细胞参数表
细胞名称 | SCaBER细胞(人膀胱鳞癌细胞) |
细胞别称 | SCABER, Scaber |
种属/供体 | 人类(Homo sapiens);58岁白人男性 |
组织来源 | 膀胱鳞状细胞癌 |
细胞特性 | 肿瘤细胞;上皮细胞样;贴壁生长 |
安全等级 | BSL-1 |
致瘤性 | 在裸鼠体内可诱发表皮样癌 |
同工酶类型 | AK-1,1; ES-D,1; G6PD,A; GLO-I,1-2; Me-2,2; PGM1,1-2; PGM3,1-2 |
培养基 | 90% RPMI-1640 + 10% FBS;或MEM(ATCC改良)+ 10% FBS + 1% P/S |
培养环境 | 37℃,95%空气 + 5% CO2 |
传代方法 | 1:2至1:3,每周2-3次;换液2-3次/周;消化2-3分钟 |
冻存方法 | 介质:55%基础培养基 + 40% FBS + 5% DMSO;液氮储存 |
标志物表达 | 可能表达E-cadherin、Cytokeratin、p63、CK5/6等 |
基因突变 | 可能存在TP53、RB1等基因突变 |
研究用途 | 膀胱癌机制研究;药物筛选;细胞功能研究 |
保藏信息 | ATCC;编号HTB-3 |
产品规格 | 1×10^6 cells/T25或1mL冻存管 |
培养教程
SCaBER人膀胱鳞癌细胞培养教程
SCaBER细胞的传代步骤
准备:吸出SCaBER细胞的原培养液。
润洗:加入约2 mL PBS,轻轻晃动培养瓶以润洗SCaBER细胞,然后吸出PBS丢弃。
消化:加入约1 mL 0.25% 胰蛋白酶-EDTA溶液,轻轻晃动以覆盖所有SCaBER细胞。
观察消化:在培养箱中消化2-3分钟,显微镜下观察SCaBER细胞块中间细胞变圆且有间隙时终止消化。
终止消化:加入3 mL 含血清培养基,反复吹打使SCaBER细胞脱壁形成单细胞悬液。
离心:SCaBER细胞悬液以1200 rpm离心3分钟,吸出上清液。
重悬:加入新鲜培养基,吹打混匀SCaBER细胞。
接种:按1:3至1:4比例接种到新培养瓶中,补足SCaBER细胞培养基。
SCaBER细胞的培养维护
换液频率: 每周2-3次
传代频率: 根据SCaBER细胞生长情况,每周2-3次
SCaBER细胞常见污染问题
细菌污染:
表现为SCaBER细胞培养基浑浊、pH值下降。
预防:严格无菌操作,定期更换SCaBER细胞培养基,使用抗生素。
真菌污染:
表现为SCaBER细胞培养基出现丝状或絮状物。
预防:洁净环境,使用抗真菌药物如两性霉素B。
支原体污染:
影响SCaBER细胞生长与代谢。
预防:定期检测支原体,使用去除试剂。
病毒污染:
导致SCaBER细胞形态变化和生长异常。
预防:使用经过检测的血清和培养基。
交叉污染:
不同细胞系之间的交叉影响实验结果。
预防:分开处理SCaBER细胞,使用独立培养器具。
SCaBER细胞的冻存和复苏步骤
SCaBER细胞的冻存步骤
准备:确保SCaBER细胞处于对数生长期,冻存前24小时换液。
细胞收集:消化SCaBER细胞并用含血清培养基终止。计数SCaBER细胞,确保密度为2×10^6 - 5×10^6 cells/mL。
配制冻存液:使用55%基础培养基、40% FBS和5% DMSO。
细胞悬液制备:将冻存液加入SCaBER细胞悬液,混匀。
分装:将SCaBER细胞悬液1 mL/支分装至冻存管,旋紧盖子。
程序冻存:放入程序冻存盒中,置于-80°C过夜,然后移至液氮中保存。
SCaBER细胞的复苏步骤
快速解冻:从液氮中取出SCaBER细胞冻存管,放入37°C水槽中快速解冻,轻摇1分钟。
细胞复苏:将解冻SCaBER细胞转移至含10 mL预热培养基的离心管中,1200 rpm离心3分钟。
重悬和培养:吸出上清,加入新鲜培养基,混匀SCaBER细胞。接种至培养瓶中,补足SCaBER细胞培养基。
观察和换液:每日观察SCaBER细胞,2-3天后换液,确保细胞恢复正常生长。
相关资料
STR鉴定及相关
Amelogenin | X,Y |
CSF1PO | 11,13 |
D2S1338 | 19,21 |
D3S1358 | 16 |
D5S818 | 12,13 |
D7S820 | 8,10 |
D8S1179 | 13,14 |
D13S317 | 11,12 |
D16S539 | 11,12 |
D18S51 | 15 (PubMed=11416159) |
15,17 (ATCC=HTB-3) | |
D19S433 | 10,13 |
D21S11 | 29,32.2 |
FGA | 22,23 |
Penta D | 3.2,5 |
Penta E | 7,9 |
TH01 | 7,9 |
TPOX | 9,11 |
vWA | 16 |
参考文献
上一篇:J82细胞(人膀胱移行细胞癌)