
AE-1小鼠杂交瘤细胞(抗AChE)
- 来源:B淋巴细胞;淋巴瘤
- 细胞特征:悬浮细胞,淋巴母细胞样
- 培养基:生长培养基:DMEM+10% FBS+1% P/S
- 其他:该细胞为悬浮细胞,请注意离心收集细胞悬液;请勿直接倒掉细胞培养液。
小鼠杂交瘤细胞 AE-1,又称 AE1,是一种悬浮生长的肿瘤细胞,来源于 B 淋巴细胞,其特征为淋巴瘤。 AE1细胞是通过融合脾细胞与SP2/O-Agl4骨髓瘤细胞而形成,培养过程中利用纯化的人红细胞乙酰胆碱脂酶免疫小鼠。
AE-1 细胞表达抗人乙酰胆碱脂酶单克隆抗体免疫球蛋白。这些抗体能够结合人和猴的乙酰胆碱脂酶,与 AE-2 细胞的反应位点不同。AE-1细胞表现出对人乙酰胆碱酯酶的抗原决定簇反应。AE-1 细胞被确认为短肢畸形(鼠痘)病毒阴性。
细胞特性与形态:AE-1 细胞具有悬浮生长特性,属于淋巴母细胞样的细胞。其生长特点为悬浮生长。
AE-1小鼠杂交瘤细胞参数表
名称 | 小鼠杂交瘤细胞 AE-1(抗AChE) |
别称 | AE1 |
种属 | 小鼠 |
组织来源 | B 淋巴细胞 |
细胞类型 | 肿瘤细胞 |
肿瘤类型 | 杂交瘤细胞 |
生长特性 | 悬浮生长 |
细胞形态 | 淋巴母细胞样 |
抗原决定簇 | 人乙酰胆碱酯酶 |
基因表达 | 抗人乙酰胆碱酯酶单克隆抗体免疫球蛋白 |
抗体结合 | 与人和猴乙酰胆碱酯酶结合,与AE-2不同的表位反应 |
特殊检测结果 | 对牛痘病毒为阴性 |
生物安全等级 | BSL-1 |
保藏机构 | ATCC; HB-72 |
冻存条件 | 冻存液:55% 基础培养基+40%FBS+5%DMSO,液氮储存 |
生长培养基 | DMEM + 10% FBS + 1% P/S |
培养条件 | 气相:空气,95%;CO2,5%;温度:37℃ |
推荐换液频率 | 2-3次/周 |
注意事项 | 该细胞为悬浮细胞,请注意离心收集细胞悬液;请勿直接倒掉细胞培养液。 |
参考资料(来源文献) | 用纯化的人红细胞乙酰胆碱脂酶免疫实验动物,并将脾细胞与SP2/O-Agl4骨髓瘤细胞融合。 |
检测发现AE-1细胞短肢畸形(鼠痘)病毒阴性。 |
培养教程
1. 培养基准备:
准备 DMEM(Dulbecco's Modified Eagle Medium)培养基。
向培养基中添加 10% FBS(胎牛血清)和 1% P/S(青霉素/链霉素)。
混匀培养基,并在 37°C 的培养箱中预暖。
2. 细胞解冻:
从液氮罐中取出冻存的 AE-1 细胞,并立即放入 37°C 的水浴中迅速解冻。
解冻后,将细胞转移到预暖的培养基中,并轻轻振荡混匀。
3. 细胞传代:
当细胞密度达到80-90% 的密度时,进行传代。传代的频率通常为每 2-3 天一次。
使用含有 0.25% 胰酶和 0.02% EDTA 的 PBS 缓冲液将细胞从培养瓶中收集。
4. 收集悬液:
收集培养瓶中的细胞悬液,避免直接倒掉细胞培养液。
使用离心机将细胞悬液离心,以沉淀细胞。离心条件通常为 1200 rpm(250g左右),离心时间为 3 分钟。
5. 细胞接种:
弃掉上清液,将细胞沉淀重新悬浮在新的预暖培养基中。
根据需要,调整细胞密度,并将细胞重新接种到新的培养瓶中。
6. 细胞培养条件:
将细胞培养在 37°C、95% 空气和 5% CO2 的培养箱中。
每隔 2-3 天检查细胞密度,并根据需要进行细胞传代或换液。
7. 冻存和存储:
对于冻存,使用含有 55% 基础培养基、40% FBS 和 5% DMSO 的冻存液,迅速冷冻保存在液氮罐中。
经常检查细胞冻存状态,确保细胞冷冻保存的稳定性和健康状态。
8. 实验操作:
根据实验需要,定期从冻存状态中恢复细胞,并进行相关实验操作。
STR鉴定及相关
STR点位信息
18-3 | 17,18,19,21 |
6-7 | 12 |
5-5 | 13,14,15 |
X-1 | 25 |
1-2 | 17,18 |
7-1 | 24.2,28,29 |
8-1 | 13 |
1-1 | 16,17,18 |
19-2 | 12,13 |
15-3 | 21.3,22.3,23.3 |
12-1 | 16,17 |
6-4 | 18,19,20 |
4-2 | 21.3,23.3 |
3-2 | 13,14 |
2-1 | 16,17 |
13-1 | 15.2,16.2,17.2 |
11-2 | 15,16,17,18 |
17-2 | 15,16,17 |
参考文献
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