MR1细胞（中国仓鼠X小鼠B淋巴细胞杂交瘤）

MR1细胞系是一种杂交瘤细胞系，通过将中国仓鼠（Cricetulus griseus）和小鼠B淋巴细胞融合而获得。MR1细胞是HB-11048的衍生物，主要用于生产针对CD40配体（CD154; CD40L; gp39）的单克隆抗体。

MR1细胞构建过程

• 免疫接种：使用小鼠T细胞（Th1）进行免疫处理，以刺激小鼠的免疫系统对CD40配体（CD154；CD40L；gp39）产生特异性反应。

• 细胞融合：将免疫后的小鼠脾细胞与NS-1骨髓瘤细胞融合。NS-1骨髓瘤细胞是一种可以无限增殖的细胞系，常用于杂交瘤技术。

• 杂交瘤形成：通过融合中国仓鼠细胞与小鼠B淋巴细胞，产生具有双重特性的杂交瘤细胞。MR1细胞既具备像骨髓瘤细胞那样的无限增殖能力，又能够像B淋巴细胞那样产生针对CD40配体的单克隆抗体。

MR1细胞特性特征

• MR1细胞产生针对CD40配体（CD154; CD40L; gp39）的IgG单克隆抗体。
  

• 检测在活化的小鼠T细胞上选择性表达的39 kDa蛋白质。

• MR1细胞具有高效的抗体生产能力；能够无限增殖，类似骨髓瘤细胞。

• MR1细胞主要用于生产单克隆抗体，特别是针对CD40配体的抗体。
  

• 适用于免疫学研究，尤其是T细胞和B细胞相互作用的研究。

• 遗传特征：MR1细胞结合了中国仓鼠和小鼠B淋巴细胞的遗传特性

• 动物用小鼠T细胞（Th1）免疫。
  

MR1细胞（中国仓鼠X小鼠B淋巴细胞杂交瘤）参数表

MR1中国仓鼠X小鼠B淋巴细胞杂交瘤培养教程

MR1细胞复苏

• 预热37℃水浴。
  

• 准备含有RPMI-1640基础培养基、10% FBS和0.05 mM β-巯基乙醇的培养瓶。

• 在生物安全柜中操作。

• 从液氮中取出冻存的MR1细胞管，迅速放入37℃水浴中解冻，轻轻摇动。
  

• 解冻后立即用75%乙醇擦拭管外表面，转移到生物安全柜中。

• 将MR1细胞悬液转移到15 mL离心管中，加入5 mL预热的培养基，轻轻混匀。

• 以1000 rpm离心5分钟，弃上清。

• 重悬MR1细胞沉淀于10 mL新鲜培养基中，转移到培养瓶中，置于37℃、5% CO2培养箱中培养。

MR1细胞培养

• 培养条件:37℃, 5% CO2, 95%空气。

• 换液和传代:推荐传代比例: 3×10^5-5×10^5 MR1 cells/mL。

• 推荐换液频率: 2-3次/周。

• 每次换液前，轻轻摇动培养瓶，使MR1细胞均匀悬浮。
  

• 用移液器吸取适量MR1细胞悬液，离心收集细胞（1000 rpm，5分钟）。

• 弃上清，重悬MR1细胞于新鲜培养基中，按推荐传代比例进行传代培养。

MR1细胞冻存

• 预冷冻存管和冻存液。
  

• 收集处于对数生长期的MR1细胞，离心（1000 rpm，5分钟），弃上清。
  

• 重悬MR1细胞于预冷冻存液中，细胞浓度约为1×10^6-1×10^7 cells/mL。

• 分装到冻存管中，每管1 mL。

• 将冻存管置于-80℃冰箱中过夜，然后转移到液氮中长期保存。

注意事项

• 支原体检测: 定期进行支原体检测，避免污染影响MR1细胞实验结果。

• 细胞收集: 离心收集MR1细胞悬液时，请勿直接倒掉细胞培养液。

• 识别特征: MR1细胞多为多边形，培养液一般会变浑浊。

MR1细胞传代频率对实验结果的影响

• 细胞状态

• 适当的传代频率（推荐2-3次/周）可以保持MR1细胞处于良好的生长状态，有利于获得稳定的实验结果。

• 传代过于频繁可能导致MR1细胞生长不稳定，影响细胞活力和功能。

• 传代间隔过长可能使MR1细胞过度生长，导致营养不足和代谢产物积累，影响细胞状态。

  
  

• 抗体产量

• MR1细胞主要用于生产抗CD40配体的单克隆抗体，传代频率会影响抗体的产量和质量。

• 保持适当的传代频率有助于维持MR1细胞的抗体分泌功能，获得稳定的抗体产量。

  
  

• 实验重复性

• 统一的传代频率有助于保持不同批次MR1细胞的一致性，提高实验的重复性和可靠性。

• 不规律的传代可能导致MR1细胞状态波动，影响实验结果的一致性。

  
  

• 细胞特性

• 长期培养和频繁传代可能导致MR1细胞特性发生变化，影响其分子和功能特征。

• 保持推荐的传代频率有助于维持MR1细胞的原有特性。

  
  

• 污染风险

• 过于频繁的传代操作可能增加MR1细胞污染的风险，影响实验结果的准确性。